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李念

作品数:1 被引量:0H指数:0
供职机构:中南大学湘雅医院更多>>
发文基金:湖南省科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇质粒
  • 1篇质粒构建
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤抑制
  • 1篇周期
  • 1篇转染
  • 1篇组氨酸
  • 1篇稳定转染
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇细胞周期
  • 1篇氨酸
  • 1篇A549细胞
  • 1篇A549细胞...

机构

  • 1篇中南大学湘雅...
  • 1篇中南大学

作者

  • 1篇邢晓为
  • 1篇何碧秀
  • 1篇肖锏
  • 1篇李念

传媒

  • 1篇中南大学学报...

年份

  • 1篇2014
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
RBM5基因表达载体构建、稳定转染A549细胞系的建立及功能的初步研究
2014年
目的:通过构建表达载体、建立稳定转染RNA结合基序5(RNA binding motif 5,RBM5)的A549细胞系,初步研究RBM5基因过表达对A549细胞增殖以及天冬-谷-丙-组氨酸盒多肽15[DEAH box polypeptide 15,DHX15]表达的影响。方法:应用分段克隆法构建pc DNA3.1(+)/RBM5真核表达载体;将测序验证后的重组质粒pc DNA3.1(+)/RBM5转染肺腺癌A549细胞并以G418进行筛选,采用Western印迹鉴定RBM5基因过表达阳性细胞,流式细胞仪分别检测经pc DNA3.1(+)/RBM5稳定转染的A549细胞[pc DNA3.1(+)/RBM5-A549]及pc DNA3.1(+)空白质粒转染的A549细胞[pc DNA3.1(+)-A549]的周期分布;运用RT-PCR技术分别检测pc DNA3.1(+)/RBM5-A549和pc DNA3.1(+)-A549细胞中剪接相关因子DHX15的表达情况。结果:成功构建出pc DNA3.1(+)/RBM5真核表达载体,筛选出RBM5基因稳定转染过表达阳性细胞株;pc DNA3.1(+)/RBM5-A549较pc DNA3.1(+)-A549细胞处于G1期细胞比例增大、S期细胞比例减小(均P<0.01);c DNA3.1(+)/RBM5-A549较pc DNA3.1(+)-A549细胞的DHX15表达上调(P<0.01)。结论:成功构建重组质粒pc DNA3.1(+)/RBM5,并建立了RBM5稳定转染的A549细胞系;初步证实RBM5基因过表达可抑制肺腺癌A549细胞的细胞周期,并使DHX15表达上调。
肖锏李念邢晓为何碧秀
关键词:A549细胞系质粒构建肿瘤抑制细胞周期
共1页<1>
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