胡敏
- 作品数:6 被引量:17H指数:3
- 供职机构:河南省人民医院更多>>
- 发文基金:河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 蛋白激酶D抑制剂SD-208对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响被引量:2
- 2016年
- 目的探讨蛋白激酶D抑制剂SD-208对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法采用5、10、20、30μmol/L SD-208处理非小细胞肺癌细胞A549(设不加SD-208仅添加完全培养基组为对照组),分别在24、48、72 h 3个不同刺激时间点应用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测A549细胞的吸光值并计算增殖抑制率;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双染色法结合流式细胞术检测不同浓度SD-208处理A549细胞24、48 h后的细胞凋亡情况,PI染色法流式细胞仪检测分析不同浓度SD-208处理A549细胞48 h后细胞周期时相分布情况;Western blotting检测不同浓度SD-208处理48 h后的细胞周期蛋白A(Cyclin A)、Cyclin D1、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和p16蛋白的表达水平。结果 SD-208可抑制A549细胞的增殖,且呈剂量和时间依赖性(P<0.05);SD-208处理后A549细胞的凋亡率及G0/G1期细胞比例均高于对照组,而S、G2/M期细胞比例均低于对照组,各浓度间的差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,SD-208处理后的Cyclin D1和CDK4蛋白水平降低,p16蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。SD-208处理对A549细胞Cyclin A和Cyclin E蛋白水平无影响,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SD-208可抑制A549细胞增殖并诱导细胞凋亡及G0/G1期阻滞,其机制可能与其影响细胞周期及相关调控蛋白水平有关。
- 王稣佳胡敏
- 关键词:非小细胞肺癌增殖凋亡细胞周期
- miRNA-223对非小细胞肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响被引量:3
- 2015年
- 目的探讨microRNA-223(miR-223)在非小细胞肺癌(NSCLC)A549/DDP细胞对顺铂(DDP)耐药性方面的影响及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测DDP耐药肺腺癌细胞株A549/DDP及其亲本细胞株A549中miR-223的水平,将A549/DDP细胞分为3组:对照组、空转染组(转染无关序列)和抑制组(转染miR-223 inhibitor),于转染24、48、72及96 h后分别采用qRT-PCR和CCK-8法检测转染效果及细胞增殖情况,CCK-8法评价转染后A549/DDP细胞对DDP的药物敏感性变化,采用流式细胞术检测转染48 h后的细胞凋亡和细胞周期情况,Western blotting检测转染48 h后耐药基因蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)及肺耐药相关蛋白(LRP)的表达。结果 A549/DDP细胞中的miR-223水平较高,为A549细胞的(7.14±0.26)倍(P<0.05);抑制组转染后的miR-223水平降低,转染96 h后的miR-223水平分别降至对照组的(67.15±2.84)%和空转染组的(65.80±3.47)%,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,抑制组转染后的增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期细胞比例均升高,而S和G2/M期细胞比例及3种耐药基因蛋白水平均降低,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。DDP对抑制组细胞的半数抑制浓度(IC50)值为(15.67±1.30)μg/ml,低于对照组的(33.71±2.61)μg/ml(P<0.05)。结论 miR-223可增加A549/DDP细胞对DDP的耐药性,可能与耐药基因蛋白表达上调有关;降低miR-223水平可抑制A549/DDP细胞增殖、诱导凋亡及细胞周期阻滞,并下调耐药蛋白的表达,从而增加A549/DDP细胞对DDP的敏感性。
- 胡敏魏晓霞邹杰崔发财庞晓辉
- 关键词:非小细胞肺癌顺铂耐药蛋白
- RNA干扰沉默IQGAP1表达可提高食管鳞癌细胞KYSE150对顺铂的化疗敏感度被引量:6
- 2017年
- 目的研究具有IQ结构域的GTP激酶活化蛋白1基因(IQGAP1)对食管癌细胞KYSE150化疗敏感度的影响及其相关作用机制。方法构建针对IQGAP1基因的小干扰RNA(si RNA)并转染至食管鳞癌细胞株KYSE150,采用MTT法观察KYSE150细胞对化疗药物顺铂敏感度的改变;流式细胞技术检测IQGAP1基因沉默前后顺铂对KYSE150细胞周期分布及凋亡的影响;Western blot检测细胞转染前后转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达水平变化。结果转染si RNA可显著下调KYSE150细胞中的IQGAP1 m RNA和蛋白表达水平;经(1、5、10、20)μmol/L顺铂处理细胞24 h后,干扰组(IQGAP1-si RNA)的细胞生存率均较对照组发生明显下降(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示干扰组在顺铂处理后G_0/G_1期细胞比例和凋亡率均明显高于对照组(P<0.05);Western blot结果显示IQGAP1基因沉默后,Nrf2和MRP1蛋白表达下调。结论沉默IQGAP1基因可有效提高人食管鳞癌细胞株KYSE150对顺铂的化疗敏感度,该作用可能是通过下调Nrf2和MRP-1蛋白表达来实现的。
- 崔发财陈瑜秦望森胡敏魏晓霞
- 关键词:食管鳞癌小干扰RNA
- 新疆哈密地区妇女HPV感染情况分析
- 2024年
- 目的 研究新疆维吾尔自治区哈密地区女性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染情况及基因型分布特点。方法 收集新疆生产建设兵团第十三师红星医院2022年1月—2023年12月门诊、体检及临床收治的8 660例女性样本,采用多重PCR和毛细管电泳片段分析法检测样本中25种HPV分型。结果 HPV总感染率为20.16%(1 746/8 660),高危型以HPV52、HPV16和HPV58型为主,低危型以HPV42最多见。单一感染率为14.92%(1 292/8 660),阳性构成比为74.00%,其中HPV52型在单一感染和多重感染中均为阳性率最高的亚型(2.21%和1.47%),多重感染最多可见到六重感染。不同年龄段的感染阳性率有较大差别,≤20岁阳性率最高(34.09%),31~40岁年龄段的阳性率最低(17.80%),阳性率排名前5的高危HPV亚型中HPV52、HPV58、HPV39和HPV56在不同年龄段的阳性率有明显差别(P<0.05)。宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者1~3型人群中,HPV52和HPV56在低级别病变中阳性率高于高级别病变(P<0.05)。结论 哈密地区女性人群中HPV流行亚型主要为HPV52、HPV16和HPV58型,在单一感染和多重感染中均较为常见,HPV52型在CIN低级别中更多见。该研究为HPV疫苗接种和相关疾病的预防提供有用依据。
- 李莎李翔焦何青杨艳萍胡敏
- 关键词:宫颈上皮内瘤变HPV分型检测
- 结直肠癌组织中NEK2的表达及其对HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响被引量:2
- 2021年
- 目的探讨中心体相关激酶2(NEK2)在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞HCT116增殖、侵袭及迁移的影响。方法构建针对NEK2的小干扰RNA(si-NEK2),脂质体法转染HCT116细胞。CCK8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室实验检测敲低NEK2表达后细胞增殖、周期分布、侵袭和迁移能力的改变。Western blot检测敲低NEK2表达后相关蛋白表达水平的改变。结果NEK2在结直肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(65.0%vs.35.0%,χ~2=14.593,P<0.01),其表达水平与结直肠癌TNM分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(均P<0.05);NEK2蛋白及mRNA在结直肠癌细胞中的表达水平显著高于正常结直肠黏膜细胞(P<0.01)。敲低NEK2表达后,HCT116细胞出现明显的G_0/G_1期阻滞,细胞的增殖、侵袭及迁移能力均显著降低(P<0.01),E-cadherin表达含量升高,N-cadherin、CDK4和cyclin D1表达含量降低。结论NEK2在结直肠癌组织中高表达并与临床病理特征相关,下调NEK2表达可有效抑制人结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。提示NEK2在结直肠癌的发生发展过程中发挥着重要的作用,可作为潜在的治疗靶点。
- 崔发财陈瑜胡敏毋小玉魏晓霞
- 关键词:NEK2增殖结直肠癌
- 结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平及其诊断意义被引量:4
- 2021年
- 目的检测结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平并分析其临床意义,探究miR-92a-1单独或联合CEA,CA-199检测对结直肠癌的诊断价值。方法连续收集2018年5月—2019年12月河南省人民医院收治的131例结直肠癌患者、50例结直肠腺瘤患者及50例健康受试者血清,分别采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)和电化学发光(electrochemiluminescence, ECLIA)法检测并比较3组研究对象血清miR-92a-1、CEA和CA199的表达水平,分析血清miR-92a-1与结直肠癌患者临床病理特征的关系,构建受试者工作特征曲线(receiver operating curves, ROC),分析miR-92a-1及其联合使用CEA,CA-199检测对结直肠癌的诊断价值。结果血清miR-92a-1、CEA及CA-199在结直肠癌患者中的表达水平显著高于结直肠腺瘤患者和健康对照者,差异有统计学意义(均P<0.05);结直肠癌患者血清miR-92a-1表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关(均P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径、发病部位无关(均P>0.05);miR-92a-1诊断结直肠癌的曲线下面积(area under ROC curve, AUC)为0.875(95%CI:0.833~0.918),诊断敏感性为72.5%,特异性为86%,miR-92a-1联合CEA、CA-199检测诊断结直肠癌的AUC为0.904(95%CI:0.865~0.943),诊断敏感性为80.2%,特异性为91%。结论 miR-92a-1在结直肠癌中高表达并与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和远处转移相关,miR-92a-1联合常规肿瘤标志物检测对结直肠癌有较高的诊断价值。
- 毋小玉崔发财胡敏朱亚郑培明
- 关键词:结直肠癌癌胚抗原糖类抗原199