公共文化服务平台

赵润鹏: 作品数：11 被引量：25H指数：4; 供职机构：安徽理工大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省科技攻关计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

合作作者

ESAT6通过mTOR抑制自噬并促进BCG增殖: 目的:研究MTOR在结核杆菌毒力因子ESAT6诱导的自噬抑制以及促进BCG增殖中的作用。方法:PCMV-HA-ESAT6质粒转染Raw264.7细胞,用蛋白免疫印记检测LC3,P62,P-MTOR,P-70S6K;MTO...; 赵润鹏; 关键词：ESAT6 MTOR 自噬 BCG; 文献传递

6 kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)抑制巨噬细胞的自噬并促进BCG的增殖被引量：1: 2017年; 目的 6 kD早期分泌型抗原靶点(ESAT6)能够促进卡介苗(BCG)的增殖,巨噬细胞的自噬功能能有效杀伤BCG,研究ESAT6与自噬的相互作用,为揭示ESAT6介导的免疫逃逸提供实验依据。方法分别观察对照质粒pCMV-HA和重组质粒pCMV-HA-ESAT6转染以及Earle平衡盐溶液(EBSS)处理的小鼠RAW264.7巨噬细胞中BCG的生长情况,Western blot法检测转染pCMV-HA-ESAT6的RAW264.7细胞0、8、12、24、32 h后,微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白水平。转染pCMV-HA、pCMV-HA-ESAT6、氯喹(CQ)单独处理和CQ与pCMV-HA-ESAT6转染联合处理条件下,Western blot法检测LC3的水平,Lyso Tracker Red染料法计数溶酶体数量,观察罗琴培养基上BCG的情况。结果 pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中BCG的生长旺盛,而EBSS处理组生长受抑制;在0、8、12、24、32 h,pCMV-HA-ESAT6转染的RAW264.7细胞中LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转换逐渐增强;与对照组相比,溶酶体荧光探针Lyso Tracker Red染色法显示pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的溶酶体较多且体积大,但后三组间均无显著性差异;pCMV-HA-ESAT6、CQ以及CQ与pCMV-HA-ESAT6转染处理组的BCG生长旺盛。结论 ESAT6抑制RAW264.7细胞内的自噬水平,并且能够促进RAW264.7细胞中感染BCG的生长。; 徐雪维赵润鹏张荣波吴静胡东邢应如倪升发铁保贤; 关键词：巨噬细胞自噬

ESAT6通过mTOR抑制自噬并促进BCG增殖: 2017年; 目的研究mTOR在结核杆菌毒力因子ESAT6诱导的自噬抑制以及促进BCG增殖中的作用。方法 PCMV-HA-ESAT6质粒转染Raw264.7细胞,用蛋白免疫印迹检测LC3、P62、P-mTOR和P-70S6K表达水平;用mTOR阻断剂Torin1联合ESAT6转染以及分别作用于Raw264.7细胞后,免疫印迹检测P62和P-mTOR表达水平,LysoTracker Red染色观察溶酶体变化,BCG增殖实验计数各组菌落数。结果 ESAT6转染细胞后,细胞P62、P-mTOR和P-70S6K表达水平显著增高,LC3I完成向LC3II的转化;联合Torin1的ESAT6转染组和Torin1处理组的P-mTOR和P62无显著变化,溶酶体无变化,BCG菌落数减少。结论 ESAT6诱导的自噬抑制和BCG的增殖依赖于mTOR的活化。; 赵润鹏徐雪维李文月邢应如倪升发铁保贤吴静胡东; 关键词：ESAT6 MTOR 自噬结核杆菌

结核分枝杆菌感染的巨噬细胞的死亡和自噬被引量：6: 2016年; 结核分枝杆菌(MTB)是一种兼性细胞内寄生菌,能将单核/巨噬细胞内物质转化为对其自身生存有利的成分。在结核病中细胞凋亡有助于机体保护作用,包括消除病原菌的复制环境、促使体液免疫对游离病原菌产生免疫应答以及增强抗原提呈作用。细胞坏死未显示抗MTB免疫保护作用。巨噬细胞的自噬诱导能有效杀伤MTB,巨噬细胞与MTB通过自噬产生复杂的对话机制。因此,开展MTB诱导的宿主细胞应答机制研究有可能被用于结核病的防治。本文主要总结了MTB感染巨噬细胞死亡和自噬的研究现状。; 赵润鹏吴静胡东; 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞细胞死亡自噬

自噬在结核病中的研究进展被引量：1: 2016年; 1963年,著名的细胞生物学家和生物化学家Christian De Duve提出了自噬（autophagy）这一概念,用来描述细胞内容物由囊泡包裹被送入溶酶体的过程。挪威生物化学家Per Ottar Seglen在20世纪80年代时发现氨基酸及很多激酶抑制剂能够抑制自噬发生并且细胞营养状态可以影响自噬。; 徐雪维赵润鹏邢应如倪升发铁保贤吴静胡东; 关键词：自噬溶酶体生物化学家激酶抑制剂 AUTOPHAGY 清道夫受体

SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM和Rab7的相互作用: 2016年; 目的研究Rab7在结核分枝杆菌毒力因子分泌性酸性磷酸酶(SapM)诱导的自噬体-溶酶体融合阻断中的作用。方法采用Rab7小干扰RNA(si Rab7)转染Raw264.7细胞,Western blot法检测P62蛋白水平。m Cherry-SapM转染Raw264.7细胞后免疫荧光检测SapM与Rab7共定位情况,免疫共沉淀分析SapM与Rab7的关系。用3种SapM的突变体SapM△ARCA,SapM△FRED和SapM△CT转染Raw264.7细胞,分析SapM的不同突变体与Rab7的关系。结果 si Rab7处理后,细胞P62水平显著增高;免疫组织化学染色结果显示SapM与Rab7在胞内共定位;免疫共沉淀分析显示SapM与Rab7可相互沉淀;3种不同突变形式的SapM中,只有SapM△CT不能与Rab7相互作用。结论 SapM诱导的自噬体-溶酶体融合阻断依赖于SapM与Rab7的相互作用。; 胡东王婉赵润鹏徐雪维邢应如倪升发徐从景铁保贤张荣波吴静; 关键词：自噬

稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞株的建立被引量：5: 2015年; 目的建立能够稳定表达红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白轻链3(RFP-GFP-LC3)的小鼠RAW264.7巨噬细胞。方法构建含RFP-GFP-LC3基因的慢病毒重组质粒载体,将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,收集病毒上清后感染RAW264.7细胞。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞株,用荧光显微镜和流式细胞术分析感染效率。饥饿处理稳定感染细胞,荧光显微镜下观察RFP-GFP-LC3斑点。结果成功构建了慢病毒p LV-CMV-RFPGFP-LC3,经感染和嘌呤霉素筛选获得稳定表达RFP-GFP-LC3的RFP-GFP-LC3-RAW264.7细胞;荧光显微镜和流式细胞术显示RFP和GFP荧光率均达到100%,饥饿处理后自噬斑点显著增多。结论成功建立稳定表达RFP-GFP-LC3的RAW264.7细胞株,为自噬研究建立了可靠细胞平台。; 王婉张庆赵润鹏徐雪维邢应如张荣波吴静胡东; 关键词：自噬慢病毒 RAW264.7细胞

结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶(SapM)抑制小鼠巨噬细胞自噬被引量：7: 2016年; 目的研究结核分枝杆菌分泌性酸性磷酸酶(Sap M)对小鼠巨噬细胞自噬的影响。方法分别用Sap M、渥曼青霉素、饥饿处理GFP-LC3-Raw264.7细胞。荧光显微镜下观察自噬体的形成,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ水平;再用Sap M处理GFP-LC3-Raw264.7细胞后加氯喹,Western blot法检测LC3Ⅱ水平。结果 Sap M和饥饿均导致GFP-LC3斑点增多和LC3Ⅱ水平增高,在Sap M处理的细胞中加入氯喹并没有引起LC3Ⅱ的进一步升高。结论 Sap M可阻断自噬体与溶酶体的融合,从而抑制小鼠巨噬细胞自噬。; 胡东王婉赵润鹏徐雪维邢应如徐从景张荣波吴静; 关键词：自噬

鸡六种病毒多重PCR检测方法的建立和应用被引量：5: 2016年; 禽流感(Avian influenza,AI)、鸡新城疫(Newcastle disease,ND)、鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)、鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)、鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)和鸡减蛋综合症(Egg drop syndrome 76,EDS-76)是6种常见的禽类病毒性传染病,给养鸡业造成重大经济损失。依据NCBI核酸数据库中禽流感病毒(Aiv)、新城疫病毒(Ndv)、鸡传染性支气管炎病毒(Ibv)、传染性法氏囊病(Ibdv)、鸡传染性喉气管炎病毒(Iltv)及减蛋综合征病毒(Edsv)基因序列,设计了6对特异性引物,建立并优化针对鸡Aiv、Ndv、Ibv、Ibdv、Iltv和Edsv的多重PCR鉴别诊断方法,同时进行现场检测应用。结果显示该多重PCR体系检测限为100fg,与其他常见病原体无交叉反应。研究表明鸡六种病毒多重PCR方法具有较高敏感性与特异性,在禽类常见病毒现场诊断方面具有广阔的应用前景。; 吴静赵润鹏徐雪维王婉杨小康胡东; 关键词：多重PCR 禽流感病毒新城疫病毒鸡传染性支气管炎病毒鸡传染性喉气管炎病毒

青蒿琥酯调节肝癌细胞自噬机制及对细胞生长的影响: 研究青蒿素的一种衍生物青蒿琥酯的抗肝癌细胞作用，发现青蒿琥酯诱导自噬的作用机制，探究青蒿琥酯通过IRGM受体增强自噬并抑制肿瘤增殖的作用机制，为新型肿瘤化疗辅助治疗提供一个新的方向，能够有效提高药物抗肿瘤疗效，降低耐药性...; 赵润鹏; 关键词：青蒿琥酯肝癌细胞自噬

赵润鹏

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

赵润鹏

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈