邢娜
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属金山医院更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- PKM2基因沉默对人肺癌A549细胞放射敏感性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨通过siRNA干扰技术沉默丙酮酸激酶同工酶M2（pyruvate kinase M2,PKM2）基因表达对人肺癌A549细胞放射敏感性的影响.方法 以人肺癌A549细胞为研究对象,根据PKM2 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染A549细胞.用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测PKM2基因的表达.设PKM2 siRNA干扰组,阴性对照组、空白对照组.各组细胞分别接受不同剂量6MVX射线照射,通过集落形成实验检测细胞放射敏感性,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡率.每组实验重复3次.结果 RT-PCR和Western blot显示,PKM2 siRNA干扰组较空白对照组的PKM2 mRNA和蛋白表达都明显下降（t=20.91、47.00,P＜0.01）,抑制率分别为（70.27±1.38）％和（70.42±1.18）％;集落形成实验显示,PKM2 siRNA干扰＋IR组A549细胞D0、Dq、N和SF2值均低于空白对照＋IR组（t=43.82、28.44、15.60、29.63,P＜0.01）,放射增敏比（SER）为1.27.流式细胞仪分析显示,PKM2 siRNA干扰组G2/M期细胞的百分率明显高于空白对照组（t=8.35,P＜0.01）,经10 Gy X射线照射,G2/M期细胞比例也明显升高（t=27.87,P＜0.01）.两者联合使用后G2/M期阻滞更加明显.siRNA干扰组细胞凋亡率较空白对照组无显著升高,空白对照＋ IR组较空白对照组凋亡率明显升高（t=23.99,P＜0.01）;PKM2 SiRNA干扰＋IR组较空白对照＋IR组和PKM2 siRNA干扰组差异均有统计学意义（=9.42、65.21,P＜0.01）.结论 特异性沉默PKM2基因表达能够增加A549细胞的放射敏感性,推测其机制可能与改变细胞周期分布及使射线诱导细胞凋亡的作用增强有关.
- 袁素娟乔田奎庄喜兵陈伟邢娜张琪
- 关键词：RNA干扰细胞周期凋亡
- CpG ODN1826对小鼠放射性肺纤维化和TGF-β1的作用
- 目的 初步探讨CpG ODN1826对小鼠放射性肺纤维化和TGF-β 1的作用及其可能的机制.方法 采用6MVX射线单次左肺照射20 Gy,建立小鼠放射性肺纤维化模型.ICR小鼠160只完全随机分为空白对照组、Radia...
- 乔田奎李轩邢娜
- 一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用，具体地，本发明建立了一个放射抵抗性显著提高的放射抗拒性肺癌细胞株，保藏号为CCTCC No.C201537，利用该细胞株制备得到肺癌全细胞疫苗，通过动物实验证实该...
- 乔田奎庄喜兵燕丽邢娜张琪
- 文献传递
- 一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用，具体地，本发明建立了一个放射抵抗性显著提高的放射抗拒性肺癌细胞株，保藏号为CCTCC C201537，利用该细胞株制备得到肺癌全细胞疫苗，通过动物实验证实该肺癌全...
- 乔田奎庄喜兵燕丽邢娜张琪
- 文献传递
- 放射抗拒Lewis肺癌细胞系的建立被引量：4
- 2015年
- 目的通过X射线反复照射体外培养的Lewis肺癌细胞系（LLC），建立其放射抗拒细胞系（R—LLC），并比较两种细胞系间Survivin蛋白的表达及分泌细胞因子水平的差异。方法应用6MVX射线反复照射Lewis肺癌细胞系，5Gy／次，共6次，30Gy。采用CCK-8实验及克隆形成实验测定两种细胞系的放射敏感性；Western blot法检测两种细胞系Survivin蛋白表达的差异；ELISA法检测两种细胞系培养液上清细胞因子TNF-α、IL-12的浓度。结果R—LLC及LLC细胞系的平均致死剂量D0分别是（1．397±0．128）和（1．053±0．214）Gy，外推值Ⅳ分别是2．680±1．179和4．149±0．785，Dq值分别为1．038和1．988Gy，SF2值分别为0．353±0．092和0．682±0．092，显示了明显的辐射抗性；Western blot结果显示，R—LLC细胞株的Survivin蛋白表达水平较LLC细胞株升高，差异有统计学意义（t=15．310，P〈0．05）；ELISA结果显示，R—LLC细胞上清液TNF—α和IL-12浓度较LLC细胞明显升高，差异有统计学意义（t=2．867和3．014，P〈0．05）。结论反复照射使肿瘤细胞获得了辐射抗性，同时又促进了Lewis肺癌细胞Survivin蛋白及细胞因子的表达，为放射增敏及肿瘤免疫相关的研究提供依据。
- 庄喜兵乔田奎许国雄陈学袁素娟张琪邢娜陈伟
- 关键词：电离辐射放射抗拒肿瘤免疫
