李茜 作品数:8 被引量:18 H指数:2 供职机构: 青岛市市立医院 更多>> 发文基金: 山东省科技发展计划项目 山东省卫生厅科技基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白及分子流行病学研究 目的 了解青岛市两医院鲍曼不动杆菌(AB)耐药情况及分布特征,院内及院间主要克隆株流行情况;探讨外膜蛋白介导对碳青霉烯类耐药的可能机制.方法 收集两院2013 年7 月至2014 年7 月期间145 株AB 临床分离株,... 李茜 李庆淑 李智 曲彦 胡丹pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒的构建及其在小鼠精子内的表达 目的构建含有绿色荧光蛋白/(green fluorescent protein, GFP/)基因与乙型肝炎病毒/(hepatitis B virus, HBV/) preS1基因的重组真核表达载体pcDNA3.1-pre... 李茜关键词:重组质粒 绿色荧光蛋白 小鼠精子 文献传递 青岛两所医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分析 被引量:4 2015年 目的了解青岛市两所医院鲍曼不动杆菌(AB)耐药情况、分布特征,碳青霉烯酶基因携带情况。方法收集两所医院临床分离的145株(A院78株,B院67株)AB进行药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶基因,肠杆菌科基因间一致重复序列(ERIC)-PCR对菌株进行同源性分析。结果 A院AB对临床常用的16种抗菌药物普遍耐药,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低(3.85%),其次是米诺环素(16.67%),对其他抗菌药物耐药率均>73%。B院AB对常用的23种抗菌药物普遍耐药,对米诺环素和替加环素均不耐药,对阿米卡星和左氧氟沙星的耐药率分别为23.88%、38.81%,对其他抗菌药物的耐药率均>64%。两院所有菌株均携带OXA-51基因,A、B两院碳青霉烯耐药组OXA-23基因的携带率分别为86.76%(59/68),56.67%(34/60),差异有统计学意义(χ2=14.53,P<0.001);A院3株菌携带OXA-58基因,B院未检出OXA-58基因。145菌株共分为8个基因型,其中A型71株和E型37株,为主要流行株;A院主要流行A型(46.15%)和E型(41.03%),B院主要流行A型(52.24%)和C型(17.91%)。结论两所医院临床分离的AB耐药情况严重,且存在医院流行,OXA型酶OXA-23、OXA-51基因在介导AB对碳青霉烯类药物耐药中发挥重要作用。 李茜 李庆淑 李智 曲彦 胡丹关键词:鲍曼不动杆菌 碳青霉烯酶 多重耐药 卵巢子宫内膜异位症恶变过程中PTEN突变及微卫星不稳定的作用 被引量:2 2009年 目的:探讨卵巢子宫内膜异位症恶变过程中PTEN突变及微卫星不稳定的作用。方法:选取子宫内膜异位症相关性卵巢癌(endometriosis associated ovarian cancer,EAOC)26例、不典型子宫内膜异位症(atypical endometriosis,aEMs)7例、典型子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)25例,应用PCR结合单链构象多态性(PCR-SSCP)技术及ABI测序系统对各组中PTEN基因第5和第8外显子突变情况检测,应用PCR-SSCP银染方法对5个微卫星监测点Bat25、Bat26、D2S123、D5S346及D17S250的微卫星不稳定(MSI)进行检测分析。结果:EAOC组、aEMs组及EMT组中PTEN的突变率分别为30.76%,14.29%及8%;MSI发生率分别为46.15%,28.67%及0。EAOC组中PTEN基因突变率和MSI发生率均明显高于aEMs和EMT组(P<0.05),并且EAOC组中PTEN突变率与MSI发生率呈正相关。(r=0.409,P<0.05)。结论:PTEN突变及MSI可能参与了子宫内膜异位症的恶变过程。 徐万里 戴淑真 王培林 姚勤 赵新蕊 李茜关键词:PTEN 微卫星不稳定 青岛两所医院鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因及同源性分析 目的 了解青岛市两所医院鲍曼不动杆菌(AB)耐药情况及分布特征,碳青霉烯酶基因携带情况及与耐药情况.方法 收集两所医院临床分离145 株AB(A 院78 株,B 院 67 株),进行药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)扩... 李茜 李庆淑 李智 曲彦 胡丹pcDNA3.1-preS1-GFP重组质粒构建及其小鼠精子表达 2010年 目的构建绿色荧光蛋白(GFP)与乙型肝炎病毒(HBV)preS1基因的重组真核表达载体并观察其在小鼠精子内的表达。方法采用PCR方法 ,以HBV全基因组质粒为模板扩增HBVpreS1基因片段,利用DNA重组技术将其定向插入到含有GFP的真核表达载体pcDNA3.1-GFP,经酶切及测序鉴定后,用脂质体介导法转染小鼠精子,在荧光显微镜下观察并应用PCR技术检测HBVpreS1基因的存在与表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1-preS1-GFP真核表达载体,将其转染小鼠精子后,在荧光显微镜下观察到转染精子头部有绿色荧光,PCR扩增得到位于HBVpreS1基因区域内长约589bp的片段。结论重组质粒pcDNA3.1-preS1-GFP的成功建立及其在小鼠精子内的表达,为建立新的HBVDNA垂直传递的小鼠模型奠定了实验基础。 李茜 王培林 王亮 张喆 郑征关键词:绿色荧光蛋白质类 精子 小鼠 对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌外膜蛋白表达及其分子流行病学的研究 被引量:11 2015年 目的:分析鲍曼不动杆菌耐药情况、分布特征,以及院内、院间主要克隆株的流行情况;探讨外膜蛋白介导对碳青霉烯类耐药的可能机制。方法收集青岛大学附属医院黄岛院区及解放军第四〇一医院2013年7月至2014年7月鲍曼不动杆菌临床分离株145株,采用纸片扩散法对其进行药敏试验;应用肠杆菌科基因间一致重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)对菌株进行DNA分型及同源性分析,并采用PCR扩增外膜蛋白carO基因。随机抽取碳青霉烯耐药组30株鲍曼不动杆菌和敏感组17株鲍曼不动杆菌,用超声破碎及高速离心法提取外膜蛋白,并用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析外膜蛋白的表达情况。结果145株鲍曼不动杆菌对临床常用16种抗菌药物普遍耐药,其中耐碳青霉烯类128株(耐药率88.3%),多重耐药(MDR)137株,泛耐药(XDR)126株;对米诺环素敏感率最高(79.3%),其次是阿米卡星(40.7%)。碳青霉烯耐药组carO基因阳性率达97.7%(125/128),碳青霉烯敏感组carO基因阳性率达17.6%(3/17)。SDS-PAGE显示,碳青霉烯敏感组17株鲍曼不动杆菌约在相对分子质量47000(16株)、37000(13株)和29000(13株)处有相应条带表达;而耐药组30株在这3处分别有20株、25株、23株呈不同程度的缺失或减弱。聚类分析显示,145株鲍曼不动杆菌共分为8个ERIC基因型,其中A型71株和E型37株,为主要流行株。结论两家医院临床分离鲍曼不动杆菌耐药情况严重且存在院内、院间流行。外膜蛋白carO基因在耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌中广泛存在,外膜蛋白表达的缺失或减弱是鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类的重要机制之一。 李茜 李智 曲彦 李海玲 邢金燕 胡丹关键词:鲍曼不动杆菌 外膜蛋白 乙醇在HBV DNA转染中对大鼠血睾屏障的影响及其机制探讨(英文) 被引量:1 2010年 目的:探讨机体摄入大量乙醇后,血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)能否有效阻止含乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA的质粒转染生精小管生精上皮细胞和影响BTB完整性的因素。方法:取20只Wistar成熟雄性大鼠随机分为实验组(A组)和对照组(B组),应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和原位杂交(in situ hybridization,ISH)检测HBVDNA的存在和生精小管的转染情况,应用透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)技术检测BTB与生精内环境的超微结构形态学变化。结果:①PCR:A组样本可见特异的HBVDNA阳性条带;②原位杂交:A组发现阳性杂交信号弥散,可被广泛发现于生精上皮基底室和近腔室的生精细胞上;③TEM:A组大鼠睾的生精小管基膜厚薄不均,基膜组织疏松增厚,成波浪式皱褶,可见基膜断裂,精原细胞与支持细胞及生精小管的基膜之间出现较多空泡,生精小管、生精上皮、生精细胞及支持细胞与相邻细胞之间的间隙扩大。结论:BTB的完整性是其起保护功能的重要基础,乙醇可以破坏其完整性,会使全部生精细胞易受HBV的感染。 王亮 欧阳奇琦 欧阳奇琦 李茜关键词:乙醇 HBV