廖小红
- 作品数:4 被引量:24H指数:1
- 供职机构:广州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广州市科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 三种不同腺病毒基因组提取方法对全基因组克隆构建的影响分析被引量:1
- 2016年
- 目的 建立一种简单、快速、有效、纯度高的人腺病毒全基因组提取的方法 。方法 用60 mm细胞培养皿培养A549或AD293细胞,接种培养人7型腺病毒(HAdV-7)CQ1198株,收集病毒感染的细胞,分别用Hirt's改良法、试剂盒A和试剂B提取HAdV-7-CQ1198病毒株全基因组,提取的基因组进行限制性内切酶酶切实验、细菌内同源重组实验和转染细胞拯救病毒实验。结果 几种方法都成功获得高质量的腺病毒全基因组,可以用于PCR、测序、酶切、同源重组和转染实验;两种试剂盒方法较传统的Hirt's改良法更快,不需要特别步骤去除细胞基因组,可以在1h内完成基因组提取。其中,试剂盒A提取的病毒基因组量最多(20-50μg),RNA含量最少,不需要另外加入核糖核酸酶(RNase),而Hirt's改良法需要在裂解液中或最终产物中加入RNase以去除细胞RNA成分。结论 试剂盒A和试剂盒B均可替代传统Hirt's提取方法用于快速提取高质量腺病毒基因组,提取的基因组能用于酶切分型、转染等实验操作。
- 李潇周荣马强蒋再学周志超廖小红田新贵
- 关键词:腺病毒酶切分析病毒感染
- 急性呼吸道感染中18种病原体流行病学分析及临床特征研究
- 目的:了解广东地区呼吸道感染症候群病原谱的构成,探究该地区呼吸道病原体流行病学及临床特征;协助建立和完善我国呼吸道传染病病原体监测平台;为临床疾病确诊及制定有效的治疗方案提供科学依据,避免抗生素滥用,为区域性卫生政策的制...
- 廖小红
- 关键词:呼吸道病原体呼吸道感染流行病学分析
- 1型登革病毒抗原表位嵌合人3型腺病毒六邻体重组病毒的构建及免疫学鉴定被引量:1
- 2015年
- 目的构建六邻体嵌入1型登革病毒(DENVI)抗坂表位的人3型重组腺病毒,鉴定其抗原性。方法以人3型腺病毒骨架质粒pBRAd△E3GFP为模板,overlap PCR在六邻体高变区HVR1插入DENV1的抗原表位,突变的六邻体片段克隆到穿梭载体,酶切后与线性化的3型腺病毒骨架质粒pBRAd△E3GFP在大肠杆菌BJ5183同源重组,获得阳性重组腺病毒质粒pBRAd△E3GFP-DENV1。线性化后转染AD293细胞拯救重组腺病毒rAd△E3GFP-DENV1并大量培养。纯化后腺病毒免疫BALB/c小鼠,通过ELISA和Western blot检测小鼠的体液免疫应答。结果在人3型腺病毒六邻体成功插入DENV1抗坂表位并包装出重组腺病毒,ELISA和Westernblot结果显示小鼠免疫后能产生血清识别DENV1。结论成功构建六邻体HVR1嵌入DENV1抗原表位的重组腺病毒,为多价登革病毒疫苗的研究奠定了基础。
- 招穗珊周志超李潇樊晔廖小红周荣苏晓波
- 关键词:腺病毒高变区登革病毒抗原表位
- 广州地区儿童呼吸道合胞病毒与肺炎支原体流行病学分析被引量:22
- 2015年
- 目的监测广州地区急性呼吸道疾病患儿呼吸道合胞病毒(RSV)与肺炎支原体(MP)流行情况,分析RSV与MP在广州地区的流行特征,为广州地区RSV与MP的监控和防治提供参考。方法采集2012年1月至2014年1月在广州地区急性呼吸道疾病患儿(≤14岁)咽拭子标本,提取标本核酸,利用荧光定量PCR进行RSV与MP检测;并对其流行特征进行分析。结果在3760例患儿中,检出RSV392例,阳性率为10.4%;检出MP339例,阳性率9.0%。在RSV阳性病例中,年龄在0—9个月患儿最高,达19.6%(181/923例)。RSV流行高峰发生于2012年2月至4月和2013年1月至4月,阳性率分别为26.8%(136/507例)和18.0%(151/839例)。在MP阳性病例中,年龄在6-10岁阳性率最高,达20.1%(97/484例),MP流行高峰发生在2012年7月至10月和2013年6月至10月,阳性率分别为16.3%(92/564例)和13.4%(124/922例)。在上呼吸道症状中,RSV感染患儿鼻塞[28.6%(112/392例)]、流涕[33.2%(130/392例)]发生率显著高于MP阳性患儿[15.0%(51/339例)、20.6%(70/339例)],2组比较差异均有统计学意义(χ^2=19.199、14.325,P均〈0.001);RSV感染患儿咳嗽[78.1%(306/392例)]、咳痰[20.4%(80/392例)]发生率显著低于MP阳性患儿[90.0%(305/339例)、27.1%(92/339例)],2组比较差异均有统计学意义(r=18.791、4.577,P〈0.001,P=0.032)。在下呼吸道症状中,RSV阳性患儿气喘[33.2%(130/392例)]、气促[13.5%(53/392例)]、喘鸣音[29.3%(115/392例)]、痰鸣音[18.9%(74/392例)]发生率显著高于MP阳性患儿[11.5%(39/339例)、6.5%(22/339例)、11.5%(39/339例)、10.6%(36/339例)],2组比较差异均有统计学意义(χ^2=47.979、9.760、34.763、9.698,P〈0.001,P=0.002,P�
- 曾志奇刘文宽陈德晖檀卫平梁焕喜陈美欣邱淑燕廖小红周荣
- 关键词:急性呼吸道疾病呼吸道合胞病毒肺炎衣原体流行病学特征