王伟刚
- 作品数：8 被引量：37H指数：3
- 供职机构：江苏万邦生化医药股份有限公司更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 一种重组羧肽酶B的制备方法
- 本发明涉及一种重组羧肽酶B的制备方法，包括如下步骤：首先将带有重组羧肽酶B原基因序列的质粒导入大肠杆菌细胞中，构建重组工程菌，经发酵诱导表达重组羧肽酶B原，经复性、胰酶转化和分离纯化后得到具有活性的羧肽酶B。本发明的特点...
- 文良柱温传彬王伟刚
- 文献传递
- 猪胰岛素与重组人胰岛素的高效液相色谱分析被引量：6
- 2003年
- 目的鉴别猪胰岛素与重组人胰岛素。方法采用C8、C1 8及常规孔径 (6～ 1 0nm)与大孔径 (30nm)色谱柱用梯度洗脱和等度洗脱对猪胰岛素与重组人胰岛素的分离方法进行研究。结果用梯度洗脱代替英国药典中的洗脱体系能达到相同的分离效果。结论用常规C1
- 孔毅王伟刚乔德水
- 关键词：重组人胰岛素高效液相色谱法
- 重组大肠杆菌高表达高密度发酵研究被引量：27
- 2006年
- 大肠杆菌高密度高表达发酵技术是现代发酵工程的重要研究课题,此项技术可以有效地提高大肠杆菌的产量和外源重组蛋白的表达量,该文就影响大肠杆菌高密度发酵的主要因素如宿主菌类型、培养基组成、培养条件、生长抑制物质、补料调控等进行了阐述和讨论。
- 杨炜王伟刚田海英许伟温传彬
- 关键词：大肠杆菌发酵
- 一种重组人胰岛素的制备方法
- 本发明一种重组人胰岛素的制备方法涉及蛋白质多肽类药物领域。本发明所要解决的技术问题是提供一种大肠杆菌表达重组人胰岛素的制备方法以克服现有技术中存在的使用有毒有害物质CNBr、生产工艺复杂之技术缺陷。本发明的重组人胰岛素的...
- 王伟刚曹韫旭文良柱
- 文献传递
- 羧肽酶B保存方法及其稳定性比较被引量：1
- 2006年
- 研究从猪胰脏中提取的羧肽酶B,在不同使用条件下,采用不同的保存方法,对其酶活力及稳定性进行比较。最佳保存条件为浓缩后加保护剂,在-80℃冻存。
- 王伟刚吴以芳姚松
- 关键词：羧肽酶B稳定性
- 一种重组人胰岛素的制备方法
- 本发明一种重组人胰岛素的制备方法涉及蛋白质多肽类药物领域。本发明所要解决的技术问题是提供一种大肠杆菌表达重组人胰岛素的制备方法以克服现有技术中存在的使用有毒有害物质CNBr、生产工艺复杂之技术缺陷。本发明的重组人胰岛素的...
- 王伟刚曹韫旭文良柱
- 文献传递
- HPLC法与UPLC法对比测定胰岛素类似物被引量：3
- 2012年
- 目的用高效液相色谱(HPLC)法与超高效液相色谱(UPLC)法对比测定胰岛素类似物。方法 HPLC法采用Inertsil ODS-SP C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以0.2 mol/L硫酸盐缓冲液(pH 2.3)-乙腈(82∶18)为流动相A,0.2 mol/L硫酸盐缓冲液(pH 2.3)-乙腈(50∶50)为流动相B,流速1.0 mL/min,梯度洗脱;检测波长214nm;柱温40℃。UPLC法采用Halo C18(4.6 mm×150 mm,2.7μm)色谱柱,以0.2 mol/L硫酸盐缓冲液(pH 2.3)-乙腈(82∶18)为流动相A,0.2 mol/L硫酸盐缓冲液(pH 2.3)-乙腈(50∶50)为流动相B,流速0.5 mL/min,梯度洗脱;检测波长214 nm;柱温40℃。结果 2种方法所得测定结果一致,精密度、回收率均符合要求。结论 UPLC较HPLC法更加简便迅速,UPLC法能够成功替代HPLC法,为胰岛素类似物及其制剂的质量控制提供新的检测方法。
- 吴世斌朱春红王伟刚温传彬倪楠卢敏
- 关键词：重组赖脯胰岛素重组人胰岛素胰岛素高效液相色谱超高效液相色谱
- 羧肽酶B活力及稳定性研究被引量：1
- 2002年
- 研究在不同pH、温度条件下 ,从猪胰脏中提取的羧肽酶B的稳定性。其活力最佳pH范围在 7 5～8 5 ,最佳温度为 5 5℃。
- 王伟刚孔毅徐波杨桦温传彬戴素霞
- 关键词：羧肽酶B稳定性PH温度
