吕嘉伟
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部重点实验室开放基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪转录因子SOX2下游调控蛋白筛选及调控网络建立
- 2019年
- SOX2是早期胚胎发育与干细胞多能性维持相关的重要转录因子。从猪孤雌囊胚中克隆获得猪SOX2基因并构建对应过表达体系。通过猪pEF细胞系与PK15细胞系中过表达SOX2基因及qPCR技术,检测89个下游调控候选基因表达情况,建立猪SOX2下游调控网络。结果发现,GATA4、MSC、GSC、FGF4、STELLA、ACACA、FN1、KLF4以及MEK基因在pEF细胞系与PK15细胞系间呈差异性调控表达。BMP4、FGFR2、ACAA2、ACSL3、β-CATENIN、c-MYC、MYST3、GSK3β、ALDH3A2、STAT3、SMAD2、KDM6A、ACADL、PI3K与WDR3基因在两种细胞系中呈同趋势性调控表达;经JASPAR数据库预测发现,WDR3、β-CATENIN、ACAA2、KDM6A、STAT3、ACADL、GSK3β与ALDH3A2基因启动子区域存在高相关性的SOX2蛋白结合位点,推测这些基因受SOX2蛋白直接调控;同时构建针对猪SOX2基因的高效敲除体系。研究结果为建立物种特异性的猪SOX2调控网络提供数据基础。
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- 关键词：转录因子调控网络基因敲除
- 糖浓度对三维培养体系下小鼠胚胎干细胞成骨分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨明胶海绵作为小鼠胚胎干细胞(ESCs)成骨诱导支架材料的可行性,并考察葡萄糖浓度对三维培养体系下小鼠ESCs骨向分化的影响。方法:体外培养小鼠ESCs,将消化所得的单细胞接种到可降解明胶海绵上,分别于高糖骨诱导培养液和低糖骨诱导培养液中进行培养,同时设立自然分化对照组。结果:诱导后第7、14天茜素红染色结果显示,高糖组矿化结节数少于低糖组。结论:明胶海绵可以作为小鼠胚胎干细胞体外成骨诱导的培养支架;在骨诱导过程中高葡萄糖浓度抑制了小鼠胚胎干细胞的骨向分化能力。
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- 关键词：小鼠胚胎干细胞明胶海绵成骨分化
- CRISPR/Cas9系统介导的一步法胚胎注射获得猪GGTA1敲除胚胎被引量：3
- 2016年
- 利用CRISPR/Cas9系统介导的一步法注射方式,对猪1-细胞期孤雌胚胎进行注射来获得GGTA1基因敲除胚胎,同时对胚胎发育过程进行跟踪,探索CRISPR/Cas9系统介导猪基因敲除效率和对胚胎发育的影响。结果表明,与对照组相比,利用CRISPR/Cas9系统一步法制备基因敲除胚胎,对卵裂率、囊胚率等胚胎发育指标方面无显著影响;利用T7内切酶I检测发现,GGTA1基因突变率约为28.07%;测序发现,突变类型包括插入型突变以及插入-删除型突变。说明CRISPR/Cas9系统介导的一步法能够高效快速地实现基因敲除且不影响早期胚胎发育。
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- 关键词：基因敲除异种器官移植
- 猪Slc22a18与Slc22a3的克隆及印迹表达分析
- 2014年
- 本试验通过鉴定候选印迹基因Slc22a18与Slc22a3,以丰富猪中已鉴定印迹基因的数量,为今后在猪中的印迹研究提供基础。本研究采用单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)直接测序法检测了猪Slc22a18与Slc22a3在16个组织器官中的印迹状态。首先,克隆得到657bp的Slc22a18cDNA序列及1 077bp的Slc22a3cDNA序列,然后进行SNP直接测序法检测。Slc22a18在1月龄仔猪的组织器官中为双等位基因表达,而在45d胎盘中为母源等位基因表达。Slc22a3的表达具有母源偏好性。实时定量PCR显示,Slc22a18在各组织器官中表达水平差异很大,在肝、肾和小肠中表达水平显著高于其他各组织,Slc22a3在各组织器官中广泛表达。上述结果表明,Slc22a18与Slc22a3在猪不同组织器官中存在印迹多态性,是猪母源表达的印迹基因。
- 周洋焦明霞吕嘉伟朱江于淼孔庆然刘忠华
- 关键词：SLC22A18印迹基因
- BMP7对三维条件下小鼠iPS细胞成骨能力的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨明胶海绵作为体外成骨支架材料的可行性及BMP7对小鼠诱导型多能干细胞(miPSCs)在三维培养条件下骨向分化能力的影响。方法:miPSCs经体外培养形成拟胚体(EBs),将消化所得的单细胞于明胶海绵上成骨诱导,7d后检测其成骨能力及贴附情况。结果:miPSCs可以贴附并沿着明胶纤维伸展;BMP7添加组的钙结节含量及成骨基因表达水平高于未添加组。结论:明胶海绵可以作为miPSCs体外成骨的培养支架;BMP7对三维培养条件下miPSCs的成骨能力有促进作用。
- 徐冉张宇邢舰誉王屹博丁超吕嘉伟伟人悦史久慧刘忠华
- 关键词：成骨分化BMP7
