刘钰
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 制备疫苗用W135/Y群脑膜炎球菌菌种的免疫原性及遗传稳定性观察
- 2010年
- 目的 为保证生产四价流脑（A、C、W135、Y群）结合疫苗质量一致性和可控性,对分离自国内的W135、Y群脑膜炎球菌CMCC（B）29037株和CMCC（B）29028株进行免疫原性及遗传稳定性观察.方法 将W135/Y群脑膜炎球菌工作种子批菌种分别连续传代至30代,并收获3、5、10、15、20、25及30代次菌液,对各代次菌进行免疫原性、抗原性、生化反应、毒性、毒力测定,并将30代次菌发酵培养后提取荚膜多糖进行质量分析.结果 CMCC（B）29037株和CMCC（B）29028株工作种子批菌种诱导小鼠产生总IgG抗体分别为1∶1114和1∶2229,杀菌抗体水平与IgG抗体间差异无统计学意义;试管凝集效价均达到1∶320,生化检定两菌株均发酵葡萄糖、麦芽糖,不发酵果糖、蔗糖、甘露醇和乳糖;两菌株的LD50均＞109,30代次内各代次菌的免疫原性、抗原性、生化反应和毒性均无差异.30代次菌液脑腔毒性测定显示均无病理改变,用第30代次菌生产的W135/Y群脑膜炎球菌荚膜多糖各项检定指标均合格.结论 分离自国内的CMCC（B）29037株和CMCC（B）29028株为脑膜炎球菌W135/Y群菌株,免疫原性、抗原性好,生化反应合格、安全性良好,连续传至30代次仍保持较好的安全性和免疫原性,30代次菌纯化的W135/Y群脑膜炎球菌荚膜多糖质量符合质控要求,可以用作四价流脑结合疫苗生产株.
- 刘钰刘梅影王义萍陈敬张燕斌王平王雪薇林海涛焦小玲李冶珊焦梦
- 关键词：血清学试验生化反应荚膜多糖
- Y群脑膜炎球菌多糖活化工艺的优化被引量：3
- 2010年
- 目的优化Y群脑膜炎球菌多糖活化工艺,为A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗的研制奠定基础。方法分别以多糖衍化率和游离多糖含量为指标,按照三因素三水平正交试验,以不同的pH值、活化时间和活化剂加量对多糖进行活化后,与破伤风类毒素(TT)偶联,并经Sepharose4FF层析纯化后,对多糖-TT结合物进行各项生化检定、免疫原性检测及稳定性观察,确定最佳活化工艺,并对优化的工艺进行验证。结果以多糖衍化率为指标,可确定pH值和活化剂加量二因素对Y群脑膜炎球菌多糖的活化有显著影响(P<0.05),而以游离多糖为指标时,无法确定三因素对多糖的活化有显著影响(P>0.05),结合各项指标检测及稳定性观察结果 ,确定多糖活化最佳工艺为:在pH12条件下,向每mg多糖中加入等量活化剂,反应10min。采用优化的多糖活化工艺制备3批Y群脑膜炎球菌多糖-TT结合物,各项指标均符合多糖结合疫苗的常规质控标准。结论优化的多糖活化工艺可制备出游离多糖含量低、免疫原性高的Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物,结果具有重复性。
- 刘梅影陈敬刘钰李冶珊林海涛张燕斌王平王雪薇焦小玲王义萍
- 关键词：活化免疫原性
- A、C群脑膜炎奈瑟球菌免疫原性及毒性和传代稳定性研究被引量：1
- 2008年
- 目的为保证疫苗质量的一致性和可控性，对A、C群脑膜炎奈瑟球菌结合疫苗生产用菌株CMCC（B）29201和CMCC（B）29205株进行毒性和抗原传代稳定性研究，并对30代次菌进行脑腔毒性、免疫原性和产糖质量分析。方法将A、C群脑膜炎奈瑟球菌工作种子批菌种分别连续传代至30代次并收获3、5、10、15、20、25及30代次菌液，小鼠腹腔注射观察各代次毒性，试管凝集试验和间接ELISA测定各代次抗原性。其中30代次菌液进行小鼠脑腔攻击观察是否引起脑组织病理改变，小鼠皮下免疫观察免疫原性，同时进行发酵培养提取荚膜多糖的质量分析。结果CMCC（B）29201株和CMCC（B）29205株工作种子批菌种的半数致死量（LD50）均≥10^9个／ml，30代次内的LD50也均≥10^9个／ml，30代次菌液脑腔毒性测定显示均无病理改变；抗原性试管凝集效价均达1：320，30代次内的试管凝集效价均达1：320，ELISA几何平均滴度（GMT）分别为1：4835和1：3915，且30代次内的ELISA效价分别为1：4315和1：3752以上；30代次菌液的血清杀菌抗体均≥1：32，用第30代次工作种子批菌种生产的A群和C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖各项检定指标均达到国家标准。结论A、C群脑膜炎奈瑟球菌结合疫苗生产用菌株CMCC（B）29201和CMCC（B）29205株毒性低、抗原性和免疫原性良好，连续传代至30代次仍保持较低的毒性和较好的抗原性及免疫原性，纯化的A群和C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖质量符合质控要求。
- 王建华刘梅影王雪薇杨建勇陈芸吕世泽刘钰许正莉王义萍
- 关键词：脑膜炎奈瑟球菌免疫原性毒性抗原性荚膜多糖
- A、C群脑膜炎球菌结合疫苗免疫原性研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究A、C群脑膜炎球菌结合疫苗的免疫原性，包括剂量、免疫记忆及抗原相容性。方法将不同剂量的A、C群脑膜炎球菌结合疫苗分别免疫小鼠，末次免疫后14d采集血清测定血清抗体滴度，确定最佳免疫剂量后，再分别以单价A群和C群脑膜炎球菌结合疫苗及二价A、C群脑膜炎球菌结合疫苗同时对小鼠分别进行1、2、3针免疫，考察其针次效应和抗原相容性。结果A、C群脑膜炎球菌结合疫苗中的A抗原和C抗原均以1．25μg剂量免疫小鼠时，其免疫原性较好。A、C群脑膜炎球菌结合疫苗能够诱导小鼠产生免疫回忆应答，且在二价结合疫苗中的A群耦联物和C群耦联物配伍后无干扰作用，抗原相容性良好。结论A、C群脑膜炎球菌结合疫苗具有较好的免疫原性和明显的免疫回忆应答，抗原相容性良好。
- 王建华刘梅影李冶姗郭京蓉张燕斌陈芸高华林云刘钰
- 关键词：免疫剂量免疫记忆
- 伤寒、副伤寒甲沙门菌毒性和抗原性的稳定性
- 2009年
- 目的观察伤寒Vi多糖结合疫苗生产用菌株伤寒沙门菌CMCC50098株和副伤寒甲沙门菌CMCC50073株毒性和抗原性的稳定性。方法将CMCC50098和CMCC50073菌株分别连续传代至30代,取3、5、10、15、20、25、30代次菌,进行小鼠毒性试验,免疫家兔制备血清,进行抗原性试验。结果CMCC50098和CMCC50073菌株连续传30代,毒性均未改变,抗原性均未下降,血清凝集效价均达到1∶12800。结论CMCC50098和CMCC50073菌株连续传代至30代,毒性及抗原性均稳定。
- 刘钰刘梅影吕世泽张学峰王平张达伦林云王建华
- 关键词：伤寒沙门菌毒性抗原性稳定性
