徐奎
- 作品数：33 被引量：28H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪脂肪酸组成相关的分子标记和基因及应用
- 本发明提供了一种猪脂肪酸组成相关的分子标记和基因及应用，涉及生物技术领域。猪脂肪酸组成相关的分子标记为位于猪MSTN基因内含有如SEQ ID NO.1所示序列的片段，猪脂肪酸组成相关基因为猪MSTN基因缺失含有如SEQ ...
- 李奎樊自尧牟玉莲刘志国张艳敏吴添文徐奎
- 文献传递
- 特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品
- 本发明涉及基因工程技术领域，具体而言，提供了一种特异性识别猪Wip1基因的成套sgRNA及其应用和产品。该成套sgRNA包括Wip1‑sgRNA1和Wip1‑sgRNA2，其特异性强，可以显著减少脱靶现象，从而准确、高效...
- 牟玉莲李奎徐奎张秀玲刘志国
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- 六对特异识别猪H11位点的多肽及其编码基因和应用
- 本发明提供了六对特异识别猪H11位点的多肽及其编码基因和应用。本发明提供的六对多肽均由多肽甲和多肽乙组成，所述多肽甲和多肽乙均由18个TAL核酸识别单元组成，每个TAL核酸识别单元中具有两个重复序列可变的双氨基酸残基；本...
- 杨述林阮进学李奎李和刚牟玉莲吴添文魏景亮徐奎黄雷周荣刘楠
- 一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用
- 本发明提供了一对特异识别猪H11位点的sgRNA及其编码DNA和应用，该sgRNA对由sgRNA‑F和sgRNA‑R组成，sgRNA‑L的核苷酸序列如下1)或2)：1)序列表中的序列1所示的核苷酸序列；2)将所述1)的核...
- 杨述林阮进学李奎李和刚牟玉莲吴添文魏景亮徐奎黄雷周荣刘楠
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- 猪CBR1基因不同拷贝形式克隆及其多态性分析被引量：3
- 2018年
- 【目的】获得猪CBR1基因不同拷贝形式编码区序列,了解其序列特征,分析猪CBR1基因不同拷贝形式的多态性及其与繁殖性能间的相关性。【方法】以五指山猪睾丸组织的c DNA为模板,采用克隆测序技术获得猪CBR1基因不同拷贝形式编码区序列。利用DNASTAR对CBR1不同拷贝形式编码的氨基酸序列进行分析。利用DNAMAN软件分析猪CBR1基因不同拷贝形式间的同源性,及其与多个哺乳动物间的同源性。利用Ex Pa Sy提供的Protparam在线软件分析猪CBR1基因不同拷贝的蛋白质理化特性。采集136头大白和47头长白繁殖母猪耳组织样,提取基因组DNA,采用PCR-测序检测猪CBR1基因不同拷贝形式的多态位点,分析其与繁殖性能的相关性。【结果】猪CBR1基因的3个不同拷贝形式均编码3个外显子,其编码区序列全长分别为870,870和846bp,其12—18位氨基酸残基均为保守的GlyXXXGly XGly序列,符合CBRs家族的结构特性。同源性比对结果显示,CBR1基因不同拷贝形式的CDS序列同源性达87%以上,不同哺乳动物间的CBR1基因的CDS序列同源性达82%以上,可见哺乳动物CBR1基因在进化过程中比较保守。CBR1的3种不同拷贝形式编码蛋白质的理化特性较为相近,均不稳定,且为亲水性蛋白,说明其3个不同拷贝形式可能在体内发挥着类似的功能。多态性分析结果显示,拷贝V1中发现5个SNP位点,拷贝V2中发现4个SNP位点,拷贝V3中发现2个SNP位点。大白猪中,拷贝V1的启动子上游153 bp处的A/T突变和外显子3的379 bp处的C/T突变,拷贝V2上游10 bp处的AC插入突变、外显子1—63 bp处C/T突变和内含子1—76 bp处G/T突变与产活仔数显著相关。长白猪中的SNP位点则与繁殖性能不相关。【结论】获得了猪CBR1基因不同拷贝形式的编码区序列,发现了5个与大白猪经产仔数显著相关的SNP位点,CBR1基因可能作为有价值的候选基因应用于大白猪的繁殖性能选育。
- 齐传翔徐奎牟玉莲牟玉莲杨述林李奎
- 定点突变LDLR基因的方法
- 本发明公开了定点突变LDLR基因的方法。本发明公开的定点突变LDLR基因的方法，包括向受体动物细胞中导入靶向LDLR基因靶序列的gRNA的编码基因与Cas9的编码基因，得到LDLR基因被定点突变的动物细胞；LDLR基因靶...
- 牟玉莲李奎黄雷程英徐奎
- 定点突变LDLR基因的方法
- 本发明公开了定点突变LDLR基因的方法。本发明公开的定点突变LDLR基因的方法，包括向受体动物细胞中导入靶向LDLR基因靶序列的gRNA的编码基因与Cas9的编码基因，得到LDLR基因被定点突变的动物细胞；LDLR基因靶...
- 牟玉莲李奎黄雷程英徐奎
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- 基于CRISPR/Cas9技术的Wip1基因敲除ST细胞的建立被引量：4
- 2021年
- 旨在采用CRISPR/Cas9编辑系统获得Wip1基因敲除的猪睾丸(swine testis,ST)细胞,为后续在细胞水平上探究Wip1基因对ST细胞增殖、凋亡的影响奠定基础。本研究将实验室已有的靶向Wip1基因第一外显子的两条sgRNA(sgWip1-1和sgWip1-2)分别连接到pX330-GFP和pX330-RFP载体,然后共转染ST细胞(从80~90日龄的猪胚胎睾丸组织中分离出未成熟的支持细胞)。利用流式细胞仪收集红绿双荧光阳性的ST细胞,以用于单克隆细胞挑选。对得到的30个单克隆细胞进行基因型鉴定,并将PCR产物进行T-A克隆。结果显示,有29个单克隆细胞出现了基因片段敲除,Wip1基因的片段敲除效率为96.7%。其中单等位基因片段敲除的有5个,纯合双等位基因片段敲除的有8个,杂合双等位基因片段敲除的有16个。本研究高效地构建了Wip1基因敲除的ST细胞,不仅为后续研究Wip1基因对ST细胞增殖、凋亡的影响提供了细胞模型,也为研究Wip1基因对公猪繁殖性能的影响奠定了基础。
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- 关键词：ST细胞
- 定点突变ApoE基因的方法
- 本发明公开了定点突变ApoE基因的方法。本发明公开的定点突变ApoE基因的方法，包括向受体动物细胞中导入靶向ApoE基因靶序列的gRNA的编码基因与Cas9的编码基因，得到ApoE基因被定点突变的动物细胞；ApoE基因靶...
- 牟玉莲李奎黄雷程英徐奎
- 文献传递
- 一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法
- 本发明提供了一种利用定点切割系统对猪H11位点定点插入的方法，该包括以下步骤：1)设计被敲除基因的5’端同源臂和3’端同源臂以及相应的通用引物；2)将上述同源臂、通用引物和欲插入的基因引入到载体中，得到打靶载体；3)转染...
- 李奎阮进学杨述林李和刚牟玉莲吴添文魏景亮徐奎黄雷周荣刘楠
