王琪 作品数:115 被引量:307 H指数:9 供职机构: 桂林医学院附属医院 更多>> 发文基金: 广西壮族自治区自然科学基金 国家自然科学基金 广西壮族自治区科学研究与技术开发计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
卵巢癌铂类耐药细胞株与敏感株间差异蛋白的筛选 被引量:1 2011年 目的:筛选卵巢癌铂类耐药细胞和敏感细胞间的差异蛋白质。方法:提取卵巢癌耐卡铂细胞SKOV3/CB和亲本细胞SKOV3的总蛋白,用二维液相色谱技术(ProtemeLabTM PF-2D)分离、筛选差异蛋白,用电喷雾离子化串联质谱(ESI-MS/MS)分析鉴定蛋白质。结果:共分离筛选出差异蛋白54个,其中SK-OV3/CB表达上调的34个,SKOV3表达上调的20个。初步鉴定出5个SKOV3/CB表达上调的差异蛋白,即硫氧还原蛋白(thioredoxin,Trx)、Myosin regulatorylight polypeptide 9(MYL9)、AX887247NID、stanniocalcin homolog、human regu-lator of G-protein signaling 5(RGS-5)。这些蛋白涉及氧化还原、凋亡调控、甲基化及信号传导等多方面。结论:卵巢癌铂类耐药细胞和敏感细胞间存在蛋白表达差异,这些差异蛋白可能通过多种机制介导了卵巢癌对铂类的耐药。 冯同富 王琪 张玮 黎丹戎 李力 唐步坚关键词:卵巢肿瘤 有机铂化合物 蛋白质阵列分析 趋化因子配体18基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:2 2012年 目的:探讨趋化因子配体18(CCL18)基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:采用荧光定量PCR法对经病理确诊的卵巢恶性肿瘤31例,良性卵巢肿瘤14例和正常卵巢组织14例中CCL18mRNA表达进行测定并分析其与临床病理的关系。结果:(1)CCL18基因在恶性肿瘤组织中较良性肿瘤组织、正常卵巢组织中的阳性率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)恶性肿瘤组织中CCL18基因的表达在组织学类型、手术病理分期、病理分级、残余灶等方面,差异均无统计学意义(均P>0.05)。(3)CCL18基因阳性患者中位生存时间为(32.088±4.284)个月,阴性患者中位生存时间为(20.625±3.572)个月,CCL18表达阳性的患者其中位生存时间较阴性表达患者长,但两组患者的生存时间差异无统计学意义(P>0.05)。(4)Cox比例风险回归模型显示残余灶是影响预后的独立因素,而CCL18mRNA过度表达与否不是影响预后的独立因素。结论:CCL18基因的过度表达可能与卵巢癌发病相关。 张玮 杨莹珠 阳志军 潘忠勉 王琪关键词:卵巢恶性肿瘤 荧光定量PCR 趋化因子CXCL5及受体CXCR2在肝细胞癌中的表达及其与临床预后的关系 2014年 [目的]探讨趋化因子CXCL5及其受体CXCR2与肝细胞癌(HCC)的临床病理特征和术后复发的关系。[方法]根据随访结果,分为早期复发组、非早期复发组和无复发组。运用荧光定量PCR检测3组肝癌患者组织中CXCL5和CXCR2的相对表达量。[结果]CXCL5在早期复发组的相对表达量高于无复发组(P=0.011);与临床分期和HBsAg状态有关(P<0.05)。CXCR2在早期复发组的相对表达量高于无复发组(P<0.001),同时高于非早期复发组(P=0.005);与临床分期、肿瘤直径和HBsAg状态有关(P<0.05)。CXCL5-CXCR2共同高表达患者的5年累积生存率明显低于其他患者(P=0.005)。[结论]CXCL5和CXCR2在肝癌中高表达,并与临床病理特征和术后复发有关。CXCL5和CXCR2有望成为肝癌术后预后判断的指标。 黄山 黄盛鑫 王琪 杨琦 刘柯 吴飞翔关键词:肝肿瘤 趋化因子 CXCR2 预后 TIMP-1基因突变与卵巢恶性肿瘤临床病理关系的初步探讨 被引量:1 2011年 目的:探讨TIMP-1突变与临床的相关性。方法:采用PCR-SSCP染色技术和核苷酸序列测定对正常组织、良性卵巢肿瘤组织及恶性卵巢肿瘤组织中TIMP-1基因突变进行检测,并分析TIMP-1基因突变与其临床病理因素的关系。结果:(1)所有的标本TIMP-1第1,2,3编码外显子扩增产物均为一个带型,DNA测序显示未见突变;(2)TIMP-1基因第4外显子在恶性肿瘤组织中突变率为69.2%(27/39),高于良性肿瘤[20%(2/10)]和正常组织的[27.8%(5/18)],差异均有统计学意义(P=0.014,P=0.030);TIMP-1基因第5外显子在恶性肿瘤组织中突变率为61.5%(24/39),显著高于正常组织[22.2%(4/18)](P=0.013),但与良性肿瘤组织[40%(4/10)]比较无统计学差异(P=0.384)。9例(23.1%)编码外显子错译突变全部为卵巢恶性肿瘤。结论:卵巢恶性肿瘤组织中存在TIMP-1编码子突变现象,MMPs和TIMPs之间平衡失调可能与TIMP-1编码子突变有关。 张玮 周杰 黎丹戎 王琪 潘忠勉 李力关键词:卵巢肿瘤 基因突变 耐紫杉醇卵巢癌细胞株中凋亡途径相关基因的差异表达 被引量:1 2010年 目的:探讨耐紫杉醇卵巢癌细胞株SKOV3/TAXOL中凋亡途径相关基因的表达差异。方法:运用real-ti me-RT-PCR技术,检测耐紫杉醇卵巢癌细胞株SKOV3/TAXOL和敏感细胞株SKOV3中凋亡途径相关基因TRADD、DFFA、MADD和TGM2的表达量,并对结果进行对比分析。结果:4个基因在SKOV3/TAXOL中的表达量均高于SKOV3,其中TRADD、DF-FA、MADD、TGM2分别高2.25、3 333、3.5×105和2 865倍。结论:凋亡相关基因TRADD、DFFA、MADD和TGM2在SK-OV3/TAXOL细胞株中表达都升高,说明卵巢癌细胞对紫杉醇耐药可能在一定程度上与细胞凋亡功能异常相关。 王鹤 王琪 尹茳平 张玮 李力关键词:卵巢癌 耐药 紫杉醇 凋亡 应用SELDI技术筛选肺癌血清标志物的研究 被引量:4 2009年 目的:采用SELDI技术筛选肺癌患者的血清标志物。方法:用WCX2芯片SELDI技术分别检测31例肺癌患者、32例健康人血清、29例肺部良性病变。应用Proteinchipsoft ware 3.2软件采集蛋白峰,找出差异蛋白;应用Biomarker Pattern软件建立诊断模型。结果:肺癌患者和健康人血液标本比较,两组间有23个差异蛋白(P<0.05),用这些差异蛋白构建的诊断模型诊断肺癌敏感度为100%,特异度为96.9%,ROC曲线下面积为100%。肺癌和肺部良性病变患者的血清进行差异蛋白质组学研究发现,两组间有8个差异蛋白(P<0.05),用这些差异蛋白构建的诊断模型诊断肺癌敏感度为71.0%,特异度为62.1%,ROC曲线下面积为92.68%。结论:SELDI技术可以将肺癌患者、肺部良性病变患者和健康人正确区分,这对肺癌的筛查和早期诊断有重要意义。 温红侠 陈一强 何敏 王琪 孔晋亮 闫萍 冯晓凯关键词:肺癌 蛋白芯片 SELDI 标志物 应用SELDI-TOF-MS技术筛选不同分型卵巢上皮性癌血清标志物 2010年 目的:应用表面增强激光解析离子化—飞行时间—质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选不同分型的卵巢上皮性癌患者血清标志物。方法:选择卵巢上皮性癌68例,健康妇女87例,卵巢良性肿瘤组20例血清,以及体外培养的卵巢恶性肿瘤细胞系SKOV3、A2780、HO8910、HO8910PM为材料,采用WCX2蛋白质芯片分析血清和体外培养的恶性肿瘤细胞系蛋白质表达差异蛋白,选择卵巢上皮性癌血清与细胞均存在表达的差异蛋白建立卵巢上皮性癌诊断模型进行验证。结果:WCX2芯片捕获的M/Z为5343和5640蛋白质,在卵巢浆液性上皮癌和浆液性上皮癌细胞系HO8910、HO8910PM中均上调表达。以上述2个蛋白质建立诊断模型判别浆液性卵巢癌的敏感性为97.8%,特异性为82.7%,优于CA125的检测结果。结论:M/Z为5343和5640蛋白质在卵巢浆液性上皮癌发生和发展的过程中的变化可以反映到血清中,而且可以验证血清标志蛋白的组织特异性,为其作为卵巢癌的肿瘤标志物提供强有力的支持。 王琪 尹茳平 黎丹戎 张玮 李力关键词:卵巢上皮性癌 血清标志物 卵巢癌细胞系 上行型与下行型鼻咽癌患者血清蛋白指纹图谱的检测及意义 被引量:5 2010年 目的:通过分析上行型与下行型鼻咽癌的血清蛋白质谱,筛选鼻咽癌蛋白质标志物,为预测鼻咽癌临床分型提供可能的简易方法。方法:应用CM10弱阳离子交换芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)分析22例上行型鼻咽癌和26例下行型鼻咽癌患者的血清标本,采用Biomarker Wizard 3.01及Biomaker Pattern 5.01分析软件对测得的数据进行处理并建立相应的检测模型。结果:通过对上行型、下行型鼻咽癌患者血清蛋白指纹图谱数据的比较,筛选出差异蛋白质峰9个(P<0.05),相对分子量分别为2 776.27 Da,3 940.04 Da,6 440.51 Da和9 138.54 Da的4个蛋白质峰被选择用于构建分类决策树模型,该模型交叉验证总准确率为81.3%,上行型鼻咽癌患者检出率为77.3%,下行型鼻咽癌患者检出率为84.6%。分别对这4个蛋白质峰进行数据库搜索,得到4种与分子量最为接近的蛋白质。结论:应用SELDI-TOF-MS技术构建的分类决策树模型能达到区分上下型鼻咽癌患者的效果,这可能对鼻咽癌的分子分型、制定个体化治疗方案及预后预测方面有一定的临床意义,可进一步深入研究。 朱小东 苏芳 曲颂 王琪 李力 张玮关键词:鼻咽癌 临床分型 改良2-^(△△CT)法分析RNASET2基因在卵巢癌卡铂耐药中的表达 被引量:1 2009年 目的:建立改良的相对定量2^(-△△CT)法并应用其分析RNASET2基因在卵巢癌卡铂耐药细胞系中的差异表达。方法:分别提取卵巢癌卡铂耐药SKOV3细胞系与其亲本SKOV3细胞系的总RNA,将等量的mRNA逆转录为cDNA,应用实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)技术检测核糖核酸酶T2(RNASET2)基因在卵巢癌卡铂耐药中的差异表达,参照2^(-△△CT)公式的推导步骤,对其改良演化出一个新的公式即改良2^(-△△CT)公式。以绝对定量法为对照,应用该公式分析real-time RT-PCR技术检测结果并比较两种方法的差异。结果:改良2^(-△△CT)公式与绝对定量法分析实验结果差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌卡铂耐药SKOV3细胞系RNASET2基因的表达相对于卵巢癌非耐药SKOV3细胞系的表达降低。结论:改良2^(-△△CT)公式分析real-time RT-PCR反应数据是一种简便可行的相对定量方法,RNASET2表达下调与卵巢癌卡铂耐药相关。 唐兆前 李力 张伟 王琪 蒋胜 唐步坚关键词:卵巢癌 耐药 REAL-TIME PCR CXCL-1基因稳定转染肝癌细胞株的建立、鉴定及其细胞生物学特性 被引量:1 2015年 目的 建立慢病毒载体介导稳定转染趋化因子CXCL-1的MHCC97-L肝癌细胞株,鉴定转染细胞中目的基因的表达并观察转染CXCL-1对MHCC97-L细胞增殖、迁移、侵袭能力及细胞周期的影响.方法 慢病毒载体介导CXCL-1基因稳定转染MHCC97-L肝癌细胞,qRT-PCR、蛋白印迹方法分别检测转染后细胞中CXCL-1在mRNA和蛋白水平的表达;MTT试验、克隆形成试验,Transwell小板细胞穿膜试验分别检测转染后细胞增殖能力、迁移能力及侵袭能力的变化.结果 成功建立了稳定转染CXCL-1的MHCC97-L肝癌细胞株.转染后细胞高表达CXCL-1基因.转染后MHCC97-L细胞增殖能力显著增强(P<0.05),侵袭能力显著增强(P<0.05),迁移能力变化则无统计学差异(P>0.05).转染后细胞株中G1期细胞比例显著减少(P<0.05).结论 成功构建稳定转染CXCL-1的肝癌细胞株,CXCL-1可增强肝癌细胞的体外增殖和侵袭能力. 黄山 刘柯 朱继业 杨琦 韦小波 王琪 吴飞翔 黎乐群关键词:肝癌细胞 稳定转染 增殖