依据芥末Sin a I基因、羽扇豆核糖体内转录间隔区(ITS)基因、胡桃Jug r 2基因、榛果Oleosin基因、芹菜Mtd基因、杏仁Pru du 1基因、燕麦Avenin基因和芝麻2S albumin mRNA基因设计的特异性引物序列,在普通PCR方法的基础上,通过2组4重PCR扩增,建立了同时检测芹菜、杏仁、燕麦、芝麻、芥末、羽扇豆、胡桃和榛果等8种食物过敏原的方法。该方法特异性强,灵敏性高,可应用于食品中多种食物过敏原的快速检测和监控。
[目的]本文旨在研究超高压协同温度处理对过敏原Bos d 6抗原性和二级结构的影响。[方法]采用间接竞争ELISA和圆二色光谱方法,研究在25、40和55℃条件下,100、200、300、400、500和600 MPa压力分别处理10 min对过敏原Bos d 6抗原性及二级结构的影响,并分析过敏原抗原性与其二级结构中α-螺旋的相关性。[结果]超高压处理能有效降低过敏原Bos d 6的抗原性及其二级结构中α-螺旋含量;随着处理温度的增加,过敏原抗原性和α-螺旋含量的降低幅度明显;超高压协同温度处理后过敏原Bos d 6抗原性与α-螺旋含量呈明显的正相关性。[结论]超高压协同温度处理技术可以通过改变过敏原Bos d 6蛋白质的空间构象来达到降低其抗原性的目的。
建立一种超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法同时检测猪肉中β-受体激动剂类、磺胺类、砜类抑制剂类、喹诺酮类、糖皮质激素类以及大环内酯类等20种兽药残留。待测药物使用80%体积分数的乙腈水溶液提取,经固相萃取小柱净化和氮气吹干后使用体积分数10%甲醇水进行复溶,复溶液经微孔滤膜过滤后进行UPLC-MS/MS测定。使用BEH C_(18)色谱柱梯度洗脱分离,选用电喷雾电离源,正离子扫描及多反应监测模式测定。20种药物检出限(limit of detection,LOD)在0.5~5μg/kg之间,定量限(limit of quantitation,LOQ)在1.7~16.7μg/kg之间,当加标水平为1、5、10μg/kg时,平均回收率在62.1%~118.3%范围内,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在0.4%~16.7%范围内。
