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猪细小病毒灭活疫苗安全性试验及佐剂的筛选被引量：9: 2009年; 本研究以猪细小病毒(PPV)现地分离株(BQ)第30代细胞培养毒株作为灭活疫苗研究用种毒,通过优化病毒增殖条件和培养方法,获得较高滴度的病毒传代细胞培养物用于PPV灭活疫苗的制备。PPV细胞培养毒株分别用甲醛和β-丙内酯进行灭活,对2种灭活剂灭活的病毒液分别用国产铝胶佐剂、进口矿物质白油佐剂以及法国赛比克公司的MONTANIDETMISA 206、ISA15AVG、IMS251CVG 3种佐剂制备10种灭活疫苗,然后分别进行10日龄乳鼠、60日龄仔猪、不同妊娠阶段母猪的安全性试验及成年豚鼠的免疫效果对比试验。通过比较不同灭活疫苗的安全性和对成年豚鼠的免疫效果,初步确认甲醛灭活的病毒液与佐剂ISA15AVG的组合为PPV灭活疫苗的最佳灭活剂和佐剂组合。; 张超范崔尚金苗岚飞陈长木; 关键词：猪细小病毒灭活疫苗安全性

猪繁殖与呼吸综合征病毒反转录环媒恒温检测方法的建立被引量：25: 2009年; 本研究利用PrimerExplorer V4软件设计了针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N基因保守区6个特异性部位的4种引物,建立了PRRSV的反转录环媒恒温检测方法。利用该方法所建立的反应体系在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,而且猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和健康猪睾丸细胞的扩增结果均为阴性。本方法对PRRSV的最低检出量为1×100个～1×101个基因拷贝。反转录环媒恒温检测方法和普通RT-PCR方法检测临床样品的符合率为96.2%。该方法为现地开展猪繁殖与呼吸综合征的快速诊断和综合防治方案的提出提供了有力的诊断工具。; 陈长木崔尚金张超范鄢明华; 关键词：PRRSV

一种快速检测猪细小病毒的环介导等温扩增试剂盒: 本发明公开了一种快速检测猪细小病毒的环介导等温扩增试剂盒，包括：等温反应缓冲液，DNA聚合酶，dNTP，硫酸镁，由3对引物所组成的混合物，甜菜碱，蒸馏水和荧光染料；其中，第1对引物序列为SEQ ID NO：1和SEQ I...; 崔尚金陈长木

猪圆环病毒2型感染昆明小鼠模型的建立被引量：10: 2008年; 将SPF级昆明小鼠随机分为3组,即一次攻毒组(S组)12只、连续攻毒组(M组)3只和对照组(C组)12只。S组和C组小鼠于第1d分别接种RPMI1640培养液和猪圆环病毒2型(PCV2)细胞培养毒,M组小鼠于第1、7、14、28、35d连续进行PCV2接种。S组和C组小鼠分别在接种后第7、14、28和42d各处死3只,M组小鼠在接种后第42d全部处死,分析其增重、病毒组织分布、抗体水平、病理组织学变化。结果,C组小鼠体重增长速率大于S组和M组,S组又明显高于M组;S组和M组小鼠体内存在病毒复制,而C组小鼠体内无病毒复制;S组和M组小鼠均产生PCV2抗体,但M组小鼠抗体水平明显高于S组,C组小鼠未检测到PCV2抗体;S组和M组小鼠有明显的病理损伤,其中淋巴结损伤最严重,C组未发现病理损伤。结果表明PCV2可以成功感染SPF昆明小鼠。; 苗岚飞崔尚金张超范胡守萍陈长木张垚; 关键词：猪圆环病毒2型病理损伤动物模型

抗猪细小病毒单克隆抗体的制备被引量：3: 2009年; 为了建立一种快速准确的猪细小病毒(PPV)病诊断体系,本研究制备了抗PPV的单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株。将PPV免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用ELISA方法筛选,得到8株分泌抗PPVMAb细胞株,这8株MAb亚类均为IgG1,轻链均为κ型。交叉实验等特异性分析发现这些MAb只特异地与PPV发生反应,而不与猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)等发生交叉反应。将杂交瘤细胞注射BALB/c小鼠制备的腹水抗体效价介于1:2560～1:20480之间。Westernblot结果显示,8株MAb中2株针对VP1发生反应,5株针对VP2、VP3发生反应,但其中有1株呈阴性反应,该MAb可能识别的是PPV的构象表位。; 谢红玲崔尚金崔玉东张超范陈长木苗岚飞; 关键词：猪细小病毒单克隆抗体

一种快速检测猪细小病毒的环介导等温扩增试剂盒: 本发明公开了一种快速检测猪细小病毒的环介导等温扩增试剂盒，包括：等温反应缓冲液，DNA聚合酶，dNTP，硫酸镁，由3对引物所组成的混合物，甜菜碱，蒸馏水和荧光染料；其中，第1对引物序列为SEQ ID NO：1和SEQ I...; 崔尚金陈长木; 文献传递

ST细胞感染猪细小病毒后差异转录基因的鉴定及定量分析: 猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起初产母猪繁殖障碍的重要病原之一。初产母猪感染该病毒后可表现为胎猪死产、木乃伊胎、早期胚胎死亡和不育。除此之外,PPV还参与很多其它疾病,如PMWS、PRDC...; 陈长木; 关键词：猪细小病毒 ST细胞抑制性消减杂交差异基因; 文献传递

猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定: 从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到一株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育一株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-B020...; 张超范崔尚金戚亭陈长木苗岚飞谢红玲周盛华岳丰雄刘长明刘霓虹; 关键词：猪细小病毒; 文献传递

猪细小病毒细胞适应株的培育及鉴定被引量：23: 2008年; 从临床表现为皮炎消瘦症状的仔猪肝脏中分离到1株病毒,经聚合酶链式反应(PCR)证实为猪细小病毒(PPV),采用仔猪原代肾细胞和传代ST细胞分离培养,经蚀斑克隆纯化,培育1株ST传代细胞培养适应毒株,命名为PPV-BQ2007株。免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)检测病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质内。病毒感染细胞可被已知PPV阳性血清中和。免疫电镜可清晰见到聚集成团的大小不一的病毒粒子,近似圆形,无囊膜,直径大小约20nm～22nm。该分离株经ST细胞培养传代,能够产生典型的细胞病变,病毒滴度随代次显著增加,第30代后毒价达107TCID50/mL以上,且毒价和血凝价稳定。测序结果表明PPV-BQ2007株VP2基因与NCBI公布的皮炎型毒株Kresse株的同源性最高,达99.8%,在系统进化分支上处于同一个分支。PPV-BQ2007株传代细胞培养适应株的成功培育和鉴定,为进一步开展该病毒流行病学、致病机理、疫苗免疫与诊断研究等奠定了良好基础。; 张超范崔尚金戚亭陈长木苗岚飞谢红玲周盛华岳丰雄刘长明刘霓虹; 关键词：猪细小病毒

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陈长木