陈爽
- 作品数:10 被引量:3H指数:1
- 供职机构:延边大学医学院更多>>
- 发文基金:吉林省重大科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 溶瘤腺病毒ATV联合顺铂协同抑制A 549细胞的研究被引量:3
- 2017年
- 目的探讨双特异性溶瘤腺病毒ATV与化疗药物顺铂联用对人肺癌细胞A 549治疗的增效减毒作用。方法将构建的溶瘤腺病毒ATV感染A 549细胞后进行Annexin V检测,分析ATV对肿瘤细胞的抑制方式;单用ATV、顺铂以及两者联合作用于人肺癌A 549细胞,采用MTS法检测细胞体外增殖情况,采用划痕试验、Transwell迁移试验和Transwell侵袭试验检测细胞的迁移侵袭情况;构建A 549皮下移植瘤裸鼠模型,单独注射重组腺病毒、顺铂以及重组腺病毒和顺铂联合使用,观察监测肿瘤生长情况,评价溶瘤腺病毒联合顺铂对肿瘤的体内抑制作用。结果双特异性重组腺病毒ATV主要通过诱导A 549细胞凋亡达到对细胞的杀伤;ATV联合顺铂体外杀伤A 549细胞具有一定的剂效和时效关系,且其抑制作用显著强于ATV及顺铂单独使用;ATV联合顺铂作用下,可使A 549细胞迁移侵袭能力降低,且能显著抑制小鼠皮下移植瘤生长,延长模型小鼠生存期。结论 ATV可诱导肿瘤细胞凋亡,ATV与化疗药物顺铂联用可增强对A549细胞生长及迁移侵袭能力的抑制作用,即具有抑制肺癌细胞A 549的增效减毒作用。
- 李文杰陈智飞郭丽娇李霄姜爽李一权陈爽李敏崔传信范园园艾迪郭焱金宁一
- 关键词:溶瘤腺病毒顺铂增效减毒
- 凋亡素构建的重组腺病毒ATV对人乳腺癌细胞的自噬作用研究
- <正>引言细胞自噬(autophagy)又称为Ⅱ型程序性细胞死亡,是真核生物普遍存在的现象,它是以细胞质内出现自噬体为特征,一方面实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新;同时自噬性死亡也可在细胞无法维持自身生存时进行死...
- 陈爽尹逊哲李一权范园园李文杰李善智
- 文献传递
- 携带Apoptin及hTERT启动子的双重特异性重组腺病毒的构建及鉴定
- 2018年
- 从质粒pMT-E1a和pIRES-neo中获得目的基因E1a和PolyA并连接入质粒pKS-hTERTp,用Xh0I和SpeI双酶切后连接入线性化的pAd—Apoptin,获得穿梭载体pAd—apoptin-PolyA—hTERTp—Ela。穿梭载体pAd—Apoptin-PolyA—hTERTp—Ela和腺病毒骨架质粒(pAd5)共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad—Apoptin-hTERTp—Ela,采用RT—PCR和Westernblot对重组腺病毒进行鉴定,MTs法检测病毒对A549细胞的抑制作用;绘制重组腺病毒生长曲线,监测重组腺病毒在细胞内的复制能力。结果显示:构建出的重组腺病毒中包含有了目的基因Apoptin和E1a,并且目的基因在细胞中正确的表达;MTs结果显示重组腺病毒对A549具有抑制作用,且抑制作用具有一定的时效及剂效关系;重组腺病毒具有在A549细胞中正常复制的能力。结果表明:成功的构建出了具有特异性杀伤和特异性复制能力的双重特异性重组腺病毒Ad—Apoptin-hTERTp—E1a。
- 艾迪李文杰李一权陈爽陈爽崔英丽朱羿龙崔传信李敏崔传信马艺珍李霄金宁一
- 关键词:重组腺病毒凋亡素
- 携鸡贫血蛋白VP3基因重组腺病毒对癌细胞的体内外作用研究
- 引言鸡传染性再生障碍性贫血是由鸡贫血病毒(CIA)(1)引起。此圆环病毒基因编码三种蛋白,分别为VP1、VP2、VP3,其中VP3(apoptin)蛋白可以特异性的引起转化的或肿瘤细胞凋亡,而对正常的二倍体细胞无明显影响...
- 陈爽兰添李一权范园园李文杰李霄
- 双特异性溶瘤腺病毒ATV对肺癌的抑制作用研究
- 引言近年来,肺癌的发病率和死亡率在全球范围内呈明显上升的趋势,已经成为全球死亡率居首的恶性肿瘤。目前,传统的肺癌治疗方法,以手术、放疗和化疗等为主,但放化疗不仅杀伤癌细胞,同时也对正常细胞产生毒性作用。随着分子生物学、细...
- 范园园陈爽李一权陈智飞李文杰胡宁宁李霄金宁一
- 八联重组痘苗病毒的体内外毒性研究
- 2015年
- 为评价本实验室构建的八联重组痘苗病毒rVTT-C-J-8+的体内外毒性,用MTS方法和结晶紫染色方法检测rVTT-C-J-8+的体外细胞杀伤能力;通过鼻腔接毒后小鼠的体重变化检测rVTT-C-J-8+的体内毒性;通过颅内接毒后的小鼠存活率检测rVTT-C-J-8+的神经毒性;通过兔斑形成试验检测rVTTC-J-8+对家兔的致病能力。MTS检测结果表明,rVTT-C-J-8+对5种细胞的生长抑制作用明显低于VTT;结晶紫染色表明,rVTT-C-J-8+只有在BHK21和MDCK细胞具有较明显的细胞间扩散水平;小鼠体重变化和兔斑形成试验结果表明,rVTT-C-J-8+对小鼠体重变化影响较小,同时对兔背部皮肤损伤较小,体内毒力和致病力明显小于VTT;小鼠神经毒性的检测表明,rVTT-C-J-8+对小鼠几乎无神经毒性。结果证明,八联重组痘苗病毒rVTT-C-J-8+具有较低的体内外毒性,副作用较小,为今后多联多价疫苗的生产提供了参考依据。
- 李一权范园园胡宁宁姜爽安林陈爽郭海宁兰添李霄金宁一
- 关键词:病毒载体痘苗病毒毒性
- 重组痘苗病毒TTVAC7理化特性
- 2016年
- 探讨重组痘苗病毒TTVAC7的理化特性,对重组痘苗病毒活载体疫苗的规模化生产、保存、运输和净化具有一定的指导意义。将重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT经热、酸、碱、乙醚、氯仿、胰蛋白酶、紫外线照射及超声波破碎处理后,接种于BHK-21细胞,通过测定TCID50观察上述理化因子处理前后TTVAC7和VTT毒价的变化,并分析这些理化因子对TTVAC7和VTT的影响。结果显示,TTVAC7经55℃作用15min,VTT经55℃作用30min即可完全被灭活;在pH值3~9的范围内,pH值的变化不会引起TTVAC7和VTT病毒滴度的显著变化;紫外线垂直距离10、30cm照射病毒液60min,不能完全灭活病毒粒子;对氯仿敏感;经1%胰蛋白酶37℃处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降2个滴度以上;对乙醚不敏感;经40、80Hz的非接触式超声处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降低于2个滴度。结果表明,重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT理化性质相似,均不耐高温,耐酸、碱、乙醚、紫外线及超声波,对氯仿和胰蛋白酶敏感。
- 范园园李一权张诺娜邢彬胡宁宁韩继成兰添李敏陈爽李霄金宁一
- 关键词:重组痘苗病毒病毒活性
- 重组腺病毒对人骨肉瘤细胞OS732的抑制作用
- 引言骨肉瘤是骨肿瘤中发病率最高的肿瘤。目前对于骨肉瘤的治疗主要采取手术治疗和多种药物联合化疗。由于病灶的快速转移且对化疗产生抗性,最终发展成肺转移瘤,这是导致患者死亡的主要原因。近年来,基因治疗和基因治疗药物及溶瘤病毒的...
- 李文杰赵津李霄陈爽李一权李敏崔传信范园园艾迪
- 文献传递
- 重组腺病毒Ad-HP对胃癌的抑制作用
- 2016年
- 目的:探讨表达HN蛋白的重组腺病毒Ad-HP在体内外对人胃癌细胞的抑制作用。方法:通过MTS法检测Ad-HP(Ad-HN-PEG3p-E1a)对SGC7901细胞的增殖抑制效果,采用Annexin V染色、Caspase酶活性检测、Western blot免疫印迹检测揭示Ad-HP对SGC7901细胞的抑制方式和途径。对BALB/c裸鼠进行瘤内注射Ad-HP探究其在体内的抗肿瘤作用。结果:体外实验中Ad-HP明显抑制SGC7901细胞增殖,并表现出时间效应和剂量效应关系。Ad-HP能提高Caspase酶活性,并释放细胞色素C。体内实验中Ad-HP能显著延缓瘤体生长并延长模型动物的平均生存期,而且能上调IL-2和IFN-γ等细胞因子,使免疫反应朝向Th1优势。结论:Ad-HP可特异性有效抑制胃癌细胞增殖和肿瘤生长。
- 赵津李奚李一权周晔陈爽兰添范园园李霄孙丽丽金宁一
- 关键词:人胃癌细胞溶瘤腺病毒新城疫
- 携Apoptin和PEG3启动子双特异性重组腺病毒的构建及鉴定被引量:1
- 2015年
- 目的利用凋亡素基因(Apoptin)和进行性增量基因3(progression-elevated genes 3,PEG3)构建具有特异性杀伤和特异性复制功能的双特异性溶瘤腺病毒Ad-Apoptin-PEG3p-E1a,为研究Ad-Apoptin-PEG3p-E1a的抗肿瘤作用奠定基础。方法从pMT-E1a和pIRES-neo获得目的基因E1a和PolyA并连接入pKS-PEG3p,用XhoⅠ和SpeⅠ双酶切后连接入pAd-Apoptin,获得穿梭载体pacAd-Apoptin-PEG3p-E1a。用pacAd-Apoptin-PEG3p-E1a和腺病毒骨架质粒(pAd5)共转染HEK293细胞,获得重组腺病毒Ad-Apoptin-PEG3p-E1a,利用RT-PCR、Western blot和电镜对重组病毒进行鉴定,采用MTS检测病毒对A549细胞的抑制效果及其对L02细胞的影响;通过绘制一步生长曲线,检测重组毒在细胞内的复制情况。结果构建的重组病毒基因组中含有Apoptin目的基因,电镜下具有正常形态。MTS检测重组腺病毒对A549细胞的抑制作用具有时效和量效关系(P<0.05),抑制作用在100MOI、96h时达峰值为(79.84±1.0)%,对正常细胞L02无显著影响,该双特异性重组腺病毒能够在A549肿瘤细胞内复制,在L02细胞内几乎无复制能力。结论成功包装重组腺病毒Ad-Apoptin-PEG3p-E1a,且该病毒具有肿瘤特异性杀伤和肿瘤特异性复制功能。
- 兰添李一权张诺娜邢彬胡宁宁范园园陈爽姜爽于海玲李霄金宁一
- 关键词:重组腺病毒APOPTIN特异性抗肿瘤