李剑
- 作品数：65 被引量：286H指数：11
- 供职机构：北京师范大学水科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程医药卫生理学农业科学更多>>
- 酵母双杂交技术构建重组维甲酸X受体(RXR)基因酵母被引量：2
- 2008年
- 应用酵母双杂交技术构建重组维甲酸X受体(RXR)基因酵母,用以筛选具有类/抗维甲酸活性的化合物.构建含有RXR基因的酵母表达质粒pGBT9-RXRβ,称为诱饵质粒;构建含有RXR协同激活因子GRIP1基因的酵母表达质粒,形成靶质粒pGAD424-GRIP1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,构建RXRβ-GRIP1双杂交酵母.考察RXRβ-GRIP1酵母与典型的RXR配体化合物天然激素-9-顺维甲酸的结合情况.结果表明,9-顺维甲酸能够诱导RXRβ-GRIP1酵母酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,EC50值为1.5×10-7mol·L-1.构建的RXRβ-GRIP1酵母与报道的RXRβ-TIF2酵母相比,对9-顺维甲酸的EC50值接近,但诱导活性较高.进一步建立了检测环境污染物诱导/抑制RXRβ-GRIP1酵母β-半乳糖苷酶活性的实验方法,用于检测三丁基锡乙酸盐化合物、Aroclor1254以及水厂进水和出水样品.证明三丁基锡乙酸盐能够较强地诱导RXRβ-GRIP1酵母酶活性;而Aroclor1254能够显著抑制9-顺维甲酸诱导的RXR酶活性,是RXR拮抗剂;水厂进水样品能够抑制9-顺维甲酸诱导的酶活性,而现行工艺对RXR拮抗剂有很好的去除效果.证实了该重组基因酵母用于环境污染物类/抗维甲酸干扰效应的筛选可行性。
- 李剑饶凯锋马梅王子健
- 关键词：酵母双杂交维甲酸受体重组基因酵母
- 意大利城镇污水处理的管理现状与经验探析被引量：3
- 2016年
- 为顺利完成《水污染防治行动计划》的既定目标,本文对意大利在城镇污水处理方面的先进经验进行了系统的总结与分析,对照识别了我国在城镇污水处理管理方面存在的不足,从而对我国目前存在的监管体系不完善、违规排污的法律概念不明确、合理的计罚体系缺失、污水污泥处理技术不完善、公众参与度及公信力低等问题提出了可行性建议,为我国的城镇污水处理管理给予一定的借鉴与参考.
- 曹潇元王金生李剑
- 关键词：水环境污水处理
- 基于ICE-SSD联用的地下水中苯并[a]芘生态风险评价——以下辽河平原地下水为例
- 2018年
- 借鉴地表水生态风险评价框架,尝试构建地下水生态风险评价方法,以下辽河平原地下水为例,开展地下水中苯并[a]芘(BaP)的生态风险评价工作.通过开展示范区地下水生态系统特征分析,筛选出用于地下水生态风险评价的代表性物种,共计5门9科.基于种间关系模型(ICE),推导地下水代表性物种的毒性数据.选取日本三角涡虫作为地下水典型物种,模拟地下水条件开展急性毒性试验,测试结果与模型推导数据间具有较好的一致性,初步验证了模型推导数据的可靠性;同时将测试结果应用于模型数据的校正,以降低方法的不确定性.基于此,构建地下水生态系统物种敏感度曲线(SSD);参考EPA方法构建地表水生态系统SSD曲线;地下水生态系统和地表水生态系统对于BaP 5%物种有害浓度(HC5)值分别为0.11μg·L^(-1)和0.58μg·L^(-1),初步表明地下水物种对BaP胁迫更为敏感.结合下辽河平原区地下水中BaP的暴露浓度水平,开展地下水生态系统风险评价,结果表明:处于高风险水平(RQ>1)的概率为0.61%,表明胁迫因子BaP对下辽河平原地下水生态系统影响有限.
- 于畅王荣芳刘贺丹沈扬李剑
- 关键词：地下水生态风险评价ICEBAP
- 检测类/抗甲状腺激素化合物的双杂交酵母及检测方法
- 本发明提供一种用于检测样品中类/抗甲状腺激素化合物的双杂交酵母细胞及其制备方法，其中该酵母中含有pGBT9－TR酵母表达质粒和pGAD424－GRIP1酵母表达质粒，其中pGBT9－TR酵母表达质粒包含甲状腺激素受体基因...
- 王子健李剑马梅饶凯锋
- 文献传递
- 基于H4IIE细胞株测试间接雌激素效应物质的代谢活化方法被引量：11
- 2006年
- 利用鼠肝癌细胞(H4IIE)代谢活化环境样品中间接雌激素效应物质的方法,以标准化合物双酚A和北方某污水处理厂各工艺过程的水样以及南方某水厂自来水样的有机提取物为对象,比较了代谢活化作用对雌激素效应检测结果的影响.研究结果表明,双酚A代谢活化产物的雌激素活性明显高于双酚A;环境样品中存在大量的间接雌激素效应物质,通过细胞代谢活化的方法能够检出其活性.因此,推荐将鼠肝癌细胞代谢活化与重组基因酵母检测的方法相结合,用于环境样品中直接和间接雌激素效应物质的检测.
- 李剑崔青马梅饶凯锋王子健
- 关键词：重组基因酵母环境样品
- 运用改进综合评分法筛选典型污染物的研究--以大武水源地地下水典型污染物筛选为例被引量：23
- 2014年
- 结合潜在危害指数法和综合评分法筛选大武水源地地下水典型污染物。鉴于潜在危害指数法不考虑污染物的环境浓度,将潜在危害指数作为综合评分法的评价指标之一,同时引进污染物的检出频率、生物降解性、生物累积性、研究区是否有污染源检出、是否为环境激素、是否为美国环境保护署(EPA)优先有机污染物、是否为中国优先污染物、是否为持久性有机污染物等指标,计算不同污染物的综合得分,再通过聚类分析,筛选出典型污染物。研究结果表明,大武水源地地下水典型污染物为三氯甲烷、三氯乙烯、四氯乙烯、四氯化碳和苯。
- 李沫蕊王韦舒任姝娟王金生李剑
- 关键词：综合评分法大武水源地地下水典型污染物
- 防控海洋溢油污染迫在眉睫——山东烟台长岛海域油污染事件解析被引量：10
- 2009年
- 世界石油资源分布的不平衡性催生和繁荣了现在的石油航运业,但是频繁发生的船舶溢油事故,又使海洋环境面临着前所未有的严峻挑战。突发性的溢油事件具有性质复杂、发生突然、危害严重、处理处置困难等特性,不但严重损害了海洋以及海岸的自然生态环境,也给当地渔业、水产养殖业、旅游业等造成巨大经济损失。据统计,1973年至2006年,我国沿海共发生大小船舶溢油事故2635起,其中溢油50吨以上的重大船舶溢油事故共69起,总溢油量3.7万吨。尽管迄今为止,我国从未发生过万吨以上的特大船舶溢油事故,但特大溢油事故险情不断。海洋在呻吟,防控海洋溢油污染已经到了刻不容缓的地步。本文以山东省长岛县海域为例,对3年间接连发生的4起溢油污染事件做了总结、分析,以期给人们以警醒和思考。
- 闫俊岭陈明李剑
- 关键词：海洋环境溢油污染污染事件船舶溢油事故海域
- 酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母被引量：32
- 2008年
- 应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母,用以检测类/抗雌激素化合物和环境样品的类/抗雌激素活性.采用多聚酶链反应(PCR)法扩增人雌激素受体(hER)基因,构建诱饵质粒pGBKT7-ER LBD;分别提取并纯化两种含有ER共激活因子基因的靶质粒pGAD424-GRIP1和pGAD424-SRC1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,分别构建两种ER双杂交酵母ER+GRIP1和ER+SRC1.考察双杂交酵母与不同激素:17β-雌二醇(E2)、二氢睾酮(DHT)、孕酮(PG)以及三碘甲状腺原氨酸(T3)的结合情况,并考察了雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬(4-OHT)与酵母的相互作用.结果表明:ER+GRIP1和ER+SRC1酵母均能够专一性的和E2结合,并存在显著的剂量-效应关系,E2对ER+GRIP1和ER+SRC1酵母β-半乳糖苷酶活性诱导的EC50值分别为7.3×10-11mol·L-1和1.5×10-10mol·L-1,其中ER+GRIP1酵母细胞诱导产生的酶活性值明显高于ER+SRC1酵母细胞.4-OHT能够抑制E2诱导ER+GRIP1酵母细胞产生的酶活性,并存在显著的剂量-效应关系,IC50值为1.0×10-7mol·L-1.表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品的类/抗雌激素活性.
- 李剑马梅饶凯锋王子健
- 关键词：酵母双杂交重组基因酵母
- 代谢活化作用对多溴代联苯类污染物类／抗甲状腺激素活性的影响被引量：6
- 2008年
- 选用大鼠肝匀浆(S9)和鼠肝癌细胞(H4ⅡE)两种体系代谢活化多溴代联苯醚混标(BDEs)和十溴联苯醚(BDE209),采用重组甲状腺激素受体基因酵母检测BDEs和BDE209母体及其代谢产物的类/抗甲状腺激素效应.结果表明,BDEs和BDE209母体均不表现甲状腺激素效应(p>0.05);但是经S9和H4ⅡE细胞代谢活化后,其代谢产物表现出明显的类甲状腺激素活性和抗甲状腺激素活性(p<0.05),BDEs和BDE209的干扰甲状腺激素效应需要经过代谢活化步骤.比较不同代谢活化体系,重组酵母细胞本身的代谢活化作用并不显著,而H4ⅡE细胞和S9代谢活化体系均能够导致活性中间体.
- 刘芸李剑马梅王子健饶凯锋张玉秀
- 关键词：多溴联苯醚S9甲状腺激素受体体外代谢
- 核受体超家族检测环境内分泌干扰物新技术
- 王子健马梅饶凯锋李剑李娜
- 随着内分泌干扰作用机制的阐明，其环境内分泌干扰物的种类和数量不断增加，已超过500多种.而中国对环境内分泌干扰物生物检测技术的开发研究相对单一，主要集中在直接环境类雌激素物质的检测，还没有相关内分泌干扰物检测的标准方法，...
- 关键词：
- 关键词：环境样品试剂盒
