吕颖 作品数:25 被引量:46 H指数:4 供职机构: 陕西省人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省科学技术研究发展计划项目 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
Wnt/β-catenin信号通路在硒缺乏大鼠心力衰竭中的调控作用 被引量:2 2018年 目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在硒缺乏大鼠心力衰竭中的调控作用。方法 40只大鼠被随机分为对照组和硒缺乏组,分别喂食标准饲料(硒含量为0.5 mg/kg)和硒缺乏饲料(硒含量为0.01 mg/kg),喂养17周后采用2,3-二氨基萘荧光法测定血清硒含量,BNP检测试剂盒测定脑尿钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)水平,心脏超声进行检测心功能,Western blot检测心肌组织中Wnt及β-catenin的表达。结果硒缺乏组的血清硒水平较对照组显著降低[(0.035±0.002)ng/L vs(0.142±0.004)ng/L,P<0.05],而硒缺乏组BNP水平则显著高于对照组[(1 450±4.64)pg/ml vs(850±3.27)pg/ml,P<0.05]。心脏超声提示硒缺乏组大鼠左心室射血分数较对照组显著降低[(42.73±11.03)%vs(72.54±12.28)%,P<0.05]。Western blot结果显示,硒缺乏组Wnt蛋白表达水平和β-catenin蛋白表达水平高于对照组[(25.06±1.37)%vs(12.13±1.68)%;(30.15±1.46)%vs(10.09±1.52)%,均P<0.05]。结论硒缺乏可导致大鼠发生心力衰竭,其可能机制与Wnt/β-catenin信号通路的上调有关。 邢玉洁 张荣怀 吕颖 刘仲伟 潘硕 赵娜关键词:WNT/Β-CATENIN信号通路 硒缺乏 心力衰竭 长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体的构建及表达 2015年 目的构建先天性长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体p EGFP-C2-HERG,并检测其于活体细胞中表达及定位。方法采用限制性内切酶双酶切法和基因重组技术将HERG基因片段构建到真核表达载体p EGFP-C2中,通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序验证;构建成功的p EGFP-C2-HERG真核表达载体用脂质体转染法转染HEK293细胞后通过蛋白免疫印迹法再次鉴定重组蛋白的表达,并通过激光共聚焦显微镜观察其荧光蛋白表达及定位。结果琼脂糖凝胶电泳证实新构建的真核表达载体p EGFP-C2-HERG碱基大小正确,DNA测序提示HERG基因碱基序列与模板一致,新构建表达载体成功转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达。结论成功构建p EGFP-C2-HERG真核表达载体,转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达通道蛋白;此方法构建的表达绿色荧光的真核表达载体为药物筛查、突变型基因的研究奠定了基础。 韩稳琦 李国良 程功 吕颖 武金娥 蒋永荣 孙超峰关键词:遗传性长QT综合征 HERG基因 基因重组 蛋白表达 HEK293细胞中杂合状态下无义突变体L539fs/47对野生型HERG电流的作用 2016年 目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HERG蛋白定位及表达量,全细胞膜片钳检测IHERG电流密度。结果野生组HERG的mRNA表达量高于L539fs/47突变组(1.066±0.612 vs.0.254±0.397,P<0.01)。免疫荧光检测发现野生型HERG蛋白多于突变体,野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体蛋白大部分滞留胞质。免疫印迹显示:不同于野生型HERG135ku及155ku 2个条带,突变体仅60ku 1个条带。全细胞膜片钳检测WT+MT组IHERG较WT组下降55.23%(22.03±2.62 vs.49.20±2.31pApF,P<0.01)。结论 HEK293细胞中杂合状态下截断突变体L539fs/47对野生型HERG电流的不完全负显性抑制作用。 吕颖 张军波 张爱峰 刘仲伟 王军奎 韩稳琦 潘军强 李国良 孙超峰关键词:HERG 无义突变 HEK293细胞 细胞外钾对HERG基因无义突变L539fs/47表达的调控 被引量:1 2016年 目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果:用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体L539fs/47蛋白大部分滞留胞浆;并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多(P<0.01),WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组(P<0.05)。免疫印迹显示,不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带,突变体仅60 kD 1个条带,3个条带均受细胞外钾影响(P<0.05)。结论:细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性,持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。 吕颖 张军波 刘仲伟 张爱峰 潘军强 王军奎 潘硕 韩稳琦 孙超峰关键词:HERG基因 无义突变 HEK293细胞 不同年龄自发性高血压大鼠血浆和心室肌AngⅡ及心室肌ATR表达 被引量:1 2019年 目的:探讨年龄对血浆和心室肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平及心室肌受体血管紧张素受体(ATR)表达的影响。方法:雄性自发性高血压大鼠(SHR)60只均分为幼年组(7周龄)、成年组(26周龄)及老年组(51周龄);取各组大鼠SHR血浆及心室肌组织,采用ELISA法检测循环血液和心室肌组织匀浆中的AngⅡ水平,取左心室石蜡染色、切片观察间质纤维化程度,免疫组化SABC法测定ATR亚型AT1和AT2表达。结果:3组SHR大鼠循环血浆中AngⅡ含量随年龄增大而增加、但差异无统计学意义(P>0.05),心室肌匀浆中AngⅡ含量随年龄增加而升高、差异有统计学意义(P<0.01);3组SHR大鼠心肌IOD值随年龄增加而增加,差异有统计学意义(P<0.01),且心肌胶原纤维沉积随年龄增加而明显增加,尤其在老年组;3组SHR大鼠左室心肌中AT1的GD值随年龄增加而降低,AT2的GD值在幼年组均高于成年及老年组(P<0.05);老年组和成年组的AT1/AT2值均低于幼年组(P<0.01)。结论:年龄对SHR循环血液中AngII影响较小,但可引起心肌组织局部血管紧张素受体(ATR)的改变,导致心肌间质纤维化。 张军波 吕颖 韩稳琦 刘仲伟 潘军强 王军奎关键词:血管紧张素受体 自发性高血压大鼠 心室肌 自发性高血压大鼠肾α-adducin基因表达的增龄性改变和盐摄入的影响 2007年 目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)肾脏α-addu-cin基因表达增龄性改变的一般规律及高盐摄入对其的影响.方法:以雄性SHR为观察对象,按周龄分为幼年组(9wk,13只)成年组(28wk,15只)SHR和老年组(53wk,13只).应用实时荧光定量PCR进行α-adducin基因表达的检测.结果:成年组与幼年组SHR相比,肾脏α-adducin基因表达无统计学差异(P>0.05);而老年组肾脏α-adducin基因表达比成年组(0.37±0.12vs5.43±2.22,P<0.05)和幼年组(0.37±0.12vs4.48±1.30,P<0.05)降低,均具有统计学意义.在各年龄组SHR中高盐组和正常盐组比较,肾脏α-adducin基因表达无统计学差异(P>0.05).结论:SHR肾脏存在增龄性α-adducin基因表达异常;短期高盐摄入对α-adducin基因表达无明显影响. 孙超峰 郝丽娜 吕颖 殷艳蓉 高海燕 程功关键词:Α-ADDUCIN基因 高血压 年龄因素 混合式教学法在心内科住院医师规范化培训中的效果评价 被引量:3 2022年 目的为应对新冠肺炎疫情的防疫要求,探讨常态化疫情防控下混合式教学法在我院的心血管内科住院医师规范化培训中应用的学习效果。方法将学员随机分为混合教学组和传统教学组,每组32人,分别采用线上、线下相结合的混合教学法和线上面授的传统教学法进行临床教学活动,在教学完成时及结束后3个月对两组学员进行理论及技能操作考核,比较两种教学法的效果及学员对这两种教学方法的满意度及教学效果评价。结果在教学结束时及结束3个月后,混合教学组学员的理论成绩及技能成绩均显著高于传统教学组(P<0.01),混合教学组学员的教学效果评价及满意度均显著高于传统教学组(P<0.01)。结论在新冠疫情防控背景下,线上与线下相结合的混合教学法可以有效地提高学员的理论知识及实践应用能力,是一种有效的教学模式。 祁杰 吕颖 苟棋玲 钟妮尔关键词:混合教学法 血凝状态对急诊冠状动脉介入治疗后发生无复流的评价 2015年 目的:探讨血凝状态对急诊冠状动脉介入治疗(AMI-PCI)发生无复流的评价。方法:连续入选首诊AMI,12 h内行急诊PCI的患者187例,观察术后无复流发生;检测血浆血管性假血友病因子(v WF)、P-选择素(Ps)、组织因子(TF)。结果 :AMI急诊PCI无复流发生率为23.5%。AMI无复流组高凝状态高于正常血流组(P=0.003)。Logistic分析显示高凝状态为无复流的独立预测因子(OR=2.361,95%CI 1.083~5.148,P=0.031)。结论 :血浆v WF、Ps、TF水平升高提示存在高凝状态,对无复流发生具有一定预测价值。 夏国志 吕颖 官功昌 姚晓伟 刘新宏 王军奎关键词:无复流 血凝 一种心血管疾病防治装置 本实用新型涉及按摩器技术领域,尤其涉及一种心血管疾病防治装置,其技术方案包括:手套外衬层,所述手套外衬层内嵌入安装有手套内衬层,所述手套外衬层正面下方开孔并嵌入安装有充液管,所述充液管上方的手套外衬层正面设有安装座,所述... 吕颖盐负荷对SHR左心室AT1和AT2受体表达的影响 被引量:2 2018年 目的以自发性高血压大鼠(SHR)为研究对象,探讨盐负荷对心肌局部胶原成分、心肌细胞凋亡、血管紧张素Ⅱ受体AT1和AT2蛋白表达的影响。方法成年雄性SHR 60只,随机分为低盐(n=30)和高盐饮食组(n=30),分别用9g/L Na Cl和40g/L Na Cl干预3周。鼠尾法测量血压,尿钠测定;称体重,石蜡切片Mallory染色法观察心肌间质纤维化程度,TUNNEL法检测凋亡,免疫组化SABC法测定AT1和AT2蛋白表达。结果高盐负荷后SHR大鼠的血压、尿钠明显升高(P<0.05);左心室肌凋亡增多,胶原纤维沉积亦增多(P<0.05);盐负荷均能显著增加左心室AT1和AT2表达(P<0.01),AT1/AT2比值增大(P<0.05)。结论高盐负荷可导致SHR大鼠左心室肌重塑,心肌组织局部血管紧张素Ⅱ受体(ATR)的改变可能是SHR大鼠血管壁重塑的机制之一,减少盐的摄入对预防高血压引发的心肌肥厚、心衰的发生和发展有着重要的意义。 张军波 吕颖 韩稳琦 刘仲伟 潘军强 王军奎关键词:心室肌 自发性高血压大鼠