董玉
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用SPR检测26肽与β_1-肾上腺素受体自身抗体的相互作用被引量：2
- 2016年
- 目的探讨根据β_1肾上腺素受体细胞外第二环(β_1-adrenergic receptor,β_1-AR-EC_Ⅱ)的氨基酸序列合成的26肽与β_1-肾上腺素受体β_1-AR-EC_Ⅱ的单克隆抗体(β_1-adrenergic receptor autoantibodies,β_1-AA)的相互作用。方法根据人β_1-肾上腺素受体细胞外第二环(β_1-AR-EC_Ⅱ)的氨基酸序列合成26肽;采用杂交瘤细胞融合的方法获得针对β_1-AR-EC_Ⅱ的单克隆抗体(β_1-AA);利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)检测该合成的26肽与β_1-AA的亲和力;利用乳鼠心肌细胞跳动频率实验验证该合成26肽对β_1-AA的中和作用。结果提取的β_1-AA可以使乳鼠心肌细胞跳动频率增加(P<0.05),提示该β_1-AA具有生物学活性;合成26肽与β_1-AA结合的亲和力(K_D)为4.44μmol/L,属于中等强度结合;较β_1-AA组相比,26肽处理后可明显降低心肌细胞跳动频率(P<0.05)。结论该合成26肽与β_1-肾上腺素受体自身抗体之间存在相互作用,并且可以拮抗β_1-AA引起的乳鼠心肌细胞跳动频率的增加。
- 董玉吕婷婷徐文丽白燕武烨刘慧荣王雯
- 关键词：表面等离子共振
- 硝化应激参与衰老血管内皮功能障碍被引量：4
- 2015年
- 目的观察硝化应激对自然衰老大鼠血管内皮形态和功能的影响,探讨衰老时血管内皮功能障碍的机制。方法 3月龄和20月龄两个年龄段健康雄性SD大鼠各12只,分组如下:1青年对照组(3月龄对照组);2青年+过氧亚硝基(peroxynitrite,ONOO-)清除剂内消旋-四(N-甲基-4-吡啶)卟啉五氯化钠(Ⅲ)〔Fe(III)meso-tetra(N-methyl-4-pyridyl)porphine pentachloride,Fe TMPy P,3月龄〕;3老年对照组(20月龄对照组);4老年+过氧亚硝基清除剂组(Fe TMPy P,20月龄)。为抑制过氧亚硝基,腹腔注射给予过氧亚硝基清除剂Fe TMPy P(3 mg/kg,每3天1次,共5次)。蛋白印记法(Western blotting)检测肝脏组织衰老相关蛋白P53和P21表达情况;离体胸主动脉血管环灌流,观察血管环对不同浓度乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应;HE染色观察胸主动脉血管结构改变;免疫组织化学法检测血管3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)、内皮标志物血管假性血友病因子(von willebrand factor,v WF)及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)。结果 20月龄衰老大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张功能较3月龄大鼠显著下降,采用过氧亚硝基的清除剂Fe TMPy P干预可明显提高衰老血管内皮依赖性舒张功能;HE及免疫组织化学染色结果显示20月龄衰老大鼠胸主动脉较3月龄大鼠均出现较明显的损伤,采用过氧亚硝基的清除剂Fe TMPy P干预可明显减轻衰老血管形态学损伤;免疫组织化学结果显示衰老大鼠胸主动脉3-NT升高,提示出现明显的硝化应激反应,采用过氧亚硝基的清除剂Fe TMPy P干预可明显降低3-NT。结论衰老时过氧亚硝基生成增多,硝化应激反应增强,参与血管形态学损伤和血管内皮依赖性舒张功能降低。
- 马语曼孙琪董玉王环愿王雯
- 关键词：衰老硝化应激血管内皮
- Tyr163和Tyr223硝基化修饰参与同型半胱氨酸诱导的胱硫醚β-合酶失活
- 2017年
- 目的探讨酪氨酸(tyrosine,Tyr,Y)残基(Tyr163,Tyr223)硝基化修饰与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的胱硫醚β-合酶(cystathionineβ-synthase,CBS)活性降低之间的关系。方法运用体外基因突变的方法,将CBS可能发生硝基化修饰的酪氨酸残基替换为苯丙氨酸(phenylalanine,F)或丙氨酸(alanine,A),构建野生型(WT)和突变型(Y163F,Y223A)质粒,转染HEK293H工具细胞,诱导重组基因表达;利用Hcy刺激后,提取细胞蛋白,分析硝基化CBS的含量及其酶活性。结果 WT,Y163A和Y223F质粒均能正常表达CBS并且具有活性;Hcy(500μmol/L,24h)诱导WT CBS发生硝基化修饰,但是Y163A和Y223F突变使CBS的硝基化程度明显下降(P<0.05,P<0.01);WT+Hcy组CBS活性明显低于WT组(P<0.01);Y163A+Hcy组和Y223F+Hcy组CBS活性高于WT+Hcy(P<0.01,P<0.05)。结论 Hcy可以导致CBS活性降低,与Hcy诱导CBS酪氨酸残基(Tyr163,Tyr223)发生硝基化修饰有关。
- 王环愿徐嘉惠周艺孙琪董玉王雯
- 关键词：胱硫醚Β-合酶同型半胱氨酸
- 抗体中和法治疗心血管疾病的研究进展
- 2017年
- 自身抗体在心血管疾病的发生、发展中起着十分重要的作用。临床研究表明,在扩张性心肌病、围生期心肌病、原发性高血压等多种疾病患者体内,均存在高滴度的受体自身抗体。自身抗体与受体结合,启动G蛋白偶联介导的信号转导通路。通过对受体的过度正性刺激,导致心肌耗损增加。目前,针对自身抗体阳性的心血管疾病患者的治疗手段主要有免疫吸附法和抗体中和法。其中,抗体中和法因其通用性强、侵入性小、治疗费用少等优点成为近些年自身抗体类疾病治疗的热点。本文就抗体中和法治疗心血管疾病的研究进展做一综述。
- 马琳董玉王雯
- 关键词：自身抗体心血管疾病
- 外周血循环内皮祖细胞减少参与了硝化应激引起的衰老大鼠阻力血管内皮依赖性舒张功能降低
- 目的:观察自然衰老大鼠中硝化应激对阻力血管内皮依赖性舒张功能的影响,探讨衰老血管内皮功能障碍的机制.方法:3 月龄、9 月龄和20 月龄健康雄性SD 大鼠分为:青年组、中年组、老年组及各自给予过氧亚硝基(peroxyni...
- 孙琪董玉王环愿焦昆刘慧荣王雯
