魏迪
- 作品数：4 被引量：22H指数：1
- 供职机构：河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 基于CRISPR/Cas9系统的人类线粒体基因组编辑技术的构建
- 线粒体是存在于大多数真核生物中的细胞器，参与细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程。线粒体DNA(mtDNA)突变与人类线粒体遗传病密切相关，对于mtDNA精确矫正是治疗线粒体遗传病的重要策略。 CRISPR(clust...
- 魏迪
- 关键词：线粒体基因组核酸酶
- TALENs新型模块组装法及活性鉴定方法
- 2016年
- 旨在提供一种新型的转录激活样效应子核酸酶(Transcription activator-like effector nucleases,TALENs)模块组装法(Unit assembly,UA)及活性鉴定方法。利用TALE-NT 2.0在线工具在线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mt DNA)设计TALENs识别位点和剪切位点,借助p EGFP-N1质粒将该段靶序列随机整合于HEK293F核基因组中,构建HEK293F-T1细胞系,用于TALENs活性鉴定。依据转录激活样效应子(Transcription activator-like effectors,TALEs)自然单元模块序列,设计出一种新型的人工TALEs偏单元;根据TALENs识别位点,选取相应一单元模块,利用UA法组装;并设计出含有相应双酶切位点的TALEs串联模块序列和TALENs载体序列,定向连接后瞬时转染HEK293F-T1细胞系。结果显示,新型模块组装法定向组装TALEs模块,克隆效率高且瞬时转染后可看到清晰的套峰。结果表明,新型模块组装方法提高了TALENs构建过程中的克隆效率,并且不受末位0.5模块的RVD(repeat-variable diresidue)限制,增加了靶序列设计的灵活性。
- 高敬魏迪池振奋张癸荣张万明聂凌云
- 关键词：线粒体DNA
- 常见肉类鉴别技术研究进展被引量：22
- 2014年
- 近年来,食品安全问题,尤其是市场上各种肉类掺杂、掺假事件,成为人们日益关注的焦点。严格监测市场上肉制品,必须要有可靠、简便、快速的技术作支撑。本文综述了现阶段常见肉类鉴别技术的研究进展,并着重描述了聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,因其灵敏度高和特异性高、简便且耗时少,逐渐成为肉类检测的实用技术。
- 高敬魏迪张癸荣聂凌云
- 关键词：免疫学技术
- 一种检测线粒体核酸酶靶向剪切活性的新方法
- 2015年
- 旨在建立一种简便检测线粒体DNA(mt DNA)核酸酶靶向剪切活性的方法。利用转基因技术,将一段含有两个靶向目标序列(T1、T2)的线粒体DNA序列随机整合到宿主基因组中,通过实时荧光定量PCR筛选单拷贝或低拷贝的单克隆转基因细胞株。将含有T1、T2的CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas9质粒分别瞬时转染到所选细胞株中,靶向剪切核基因组,在靶向目标序列处造成DNA双链断裂,引发非同源末端连接修复机制,引入插入或缺失突变。观察测序峰图,证明两个靶向目标序列T1、T2均有剪切效率,且T1高于T2。建立了一种高效快速检测线粒体核酸酶靶向剪切活性的新方法。
- 魏迪高敬池振奋张癸荣聂凌云
- 关键词：实时荧光定量PCR
