朱丽萍
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 供职机构：青岛农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省高等学校科技计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 酶消化组织块法体外培养奶牛乳腺上皮细胞被引量：5
- 2016年
- 建立稳定培养奶牛乳腺上皮细胞系的方法。结合酶消化法和组织块法,在体外进行分离培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰酶消化进行纯化和传代。通过倒置显微镜观察、细胞爬片姬姆萨染色和角蛋白18免疫组织化学方法对培养的细胞进行形态学观察和鉴定。观察发现,细胞排列紧密,呈多角形或梭形,长满后呈铺路石样。胞核呈圆形或椭圆形,核仁清晰可见,多为3～5个。通过细胞角蛋白18免疫组织化学方法对乳腺上皮细胞进行鉴定,呈阳性反应。获得的乳腺上皮细胞增殖旺盛,培养至40代生长活性仍然稳定。酶消化组织块法成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,是分离乳腺上皮细胞的一种有效方法。
- 杨文浩朱丽萍齐晓楠张倩任婷婷李华涛丛霞曹荣峰田文儒
- 关键词：酶消化组织块乳腺上皮细胞奶牛
- 葛根素对热应激致牛睾丸支持细胞氧化损伤的保护作用被引量：3
- 2016年
- 葛根素(Pue)是从中药野葛或甘葛藤根中提取的黄酮类化合物,有明显的抗氧化功能。Pue是否有对热应激时牛睾丸支持细胞(SCs)保护作用尚不清楚。本研究采用42℃热应激1 h,然后34℃恢复6 h。用CCK-8检测细胞存活率;用Hoechst33258检测细胞凋亡;用分光光度法检测细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的变化,以及Western-Blot检测HSP70蛋白表达。结果显示,热应激后细胞存活率下降,细胞发生凋亡,产生氧化损伤。葛根素和维生素E可以极显著降低热应激时细胞MDA含量,显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。Pue与维生素E组相比无显著性差异。此外,葛根素可显著增加受热应激SCs中HSP70蛋白的表达。上述结果表明,葛根素能减少热应激下SCs的氧化损伤,其机制可能与提高抗氧化酶活性及增加热休克蛋白HSP70的表达有关。
- 丛霞张东君任婷婷张倩朱丽萍李琪曹荣峰田文儒李华涛
- 关键词：葛根素热应激HSP70
- 脂多糖诱导奶牛乳腺上皮细胞中炎性因子和核转录子-κB的表达被引量：5
- 2016年
- 试验预探索脂多糖（LPS）刺激奶牛乳腺上皮细胞炎性因子产生时间、浓度以及其对NF-κB信号通路的激活情况。用酶消化法培养奶牛乳腺上皮细胞（b MEC）;CCK-8法筛选LPS最佳刺激浓度（IR≤10%）,并用其处理对数期生长的b MEC。ELISA试剂盒检测0-24 h不同处理时间细胞培养液上清中TNF-α和IL-1β表达变化,以确定炎症模型是否建立成功;用Western-Blot检测核转录因子NF-κB（p-p65和p65）及其抑制蛋白（p-IκBα和IκBα）的表达。结果显示,用酶消化法成功培养原代b MEC;CCK-8法筛选LPS的最佳致炎浓度为1μg/m L;LPS处理后3-24 h可极显著增加奶牛乳腺上皮细胞中TNF-α和IL-1β表达,并在处理后15 min极显著提高b MEC中p-p65和p-IκBα的表达。上述结果说明,LPS能够在3-24 h内有效诱导b MEC炎症模型的建立,并能在15 min时活化奶牛乳腺上皮细胞中的NF-κB信号通路。
- 朱丽萍杨文浩任婷婷丛霞李华涛曹荣峰刘楚君田文儒
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞脂多糖IL-1Β
