苏海燕
- 作品数：1 被引量：8H指数：1
- 供职机构：吉林省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：吉林市科技发展计划项目博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 荧光分析活性氧在血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞增殖中的作用被引量：8
- 2015年
- 应用荧光分析方法探讨活性氧(Reactive oxygen species,ROS)在血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)诱导心肌成纤维细胞(Myofibroblasts,myoFbs)增殖中的作用。实验中采用胰酶消化法分离、培养原代新生大乳鼠myoFbs,10%胎牛血清培养,采用2~3代myoFbs,并随机分为正常对照组、AngⅡ处理组、N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)干预组,培养12、24和36 h后,分别采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5)-Dimethylthiahiazo(-z-yl)-3,5-diphcnyt-etrazoliumromide,MTT)法测定myoFbs的增殖率;硝酸酶还原法检测myoFbs产生羟自由基(·OH)的量;利用荧光探针DCFH-DA分析检测myoFbs中ROS的水平;免疫细胞化学染色法及荧光共聚焦测定p-PKCα的表达及膜转位。结果显示一定浓度的AngⅡ作用myoFbs 24 h时myoFbs增殖率明显增加(η值(%)为117.05);并诱导myoFbs产生大量ROS,其中myoFbs增殖率越高,·OH的含量(94.53±1.68)越高;免疫细胞化学染色及荧光共聚焦可见,AngⅡ能明显促进pPKCα的表达及膜转位(与对照组比较p<0.01或p<0.001);NAC(10^(-4)mol/L)可抑制AngⅡ引起myoFbs的增殖(OD值为0.357±0.13),减少myoFbs内ROS及·OH的量(75.57±1.48),抑制p-PKCα的表达及膜转位。
- 王立英苏海燕王璇周艳杨世杰
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸心肌成纤维细胞蛋白激酶CΑ活性氧
