谢卫华
- 作品数:30 被引量:112H指数:6
- 供职机构:江西中医药大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 半夏曲炮制过程中微生物数量动态变化的初步分析被引量:3
- 2019年
- 目的:检测半夏曲炮制过程中细菌、酵母菌、霉菌的菌落数量并定量分析其中4种优势微生物数量的动态变化,为研究半夏曲炮制机制提供实验依据。方法:参照《中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂》(第十册)制备半夏曲,取半夏曲炮制过程中0,30,60,90,120 h共5个不同时间点样品,分别用选择性培养基进行细菌、霉菌、酵母菌的培养和分离纯化,并进行菌落计数;应用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,宛氏拟青霉Paecilomyces variotii,丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis,黑曲霉Aspergillus niger进行绝对定量,分别以枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉重组质粒为对照品,经倍比稀释后制作标准曲线,对半夏曲炮制至5个不同时间点(0,30,60,90,120 h)样品中的4种微生物进行定量分析。结果:半夏曲炮制过程中细菌数量少且变化平缓,而酵母菌和霉菌数量至发酵后期时迅速增加,至发酵结束时均>1×10^6CFU·m L^-1。枯草芽孢杆菌5个不同时间点样品中的拷贝数分别为3.53×10^5,7.56×10^4,1.58×10^5,1.90×10^6,1.85×10^6copies·g^-1;宛氏拟青霉的拷贝数为0,0,0,3.45×10^7,4.15×10^8copies·g^-1;丝衣霉菌的拷贝数为0,0,0,1.04×10^8,2.28×10^8copies·g^-1;黑曲霉的拷贝数为0,0,9.48×10^5,1.47×10^6,7.56×10^6copies·g^-1。结论:半夏曲炮制过程中微生物菌群变化趋势可以用4种优势微生物的动态变化来反映,霉菌在半夏曲炮制中可能起重要作用。荧光定量PCR技术具有快速灵敏、重复性好和特异性高的优点,适用于半夏曲的炮制机制研究。
- 龙凯王立元郭佳佳翁美芝谢卫华苏明声杨明谢小梅
- 关键词:半夏曲菌群变化优势菌种黑曲霉
- TLR4基因的沉默下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中抗烟曲霉孢子刺激作用被引量:3
- 2012年
- 为研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时NOD1和TLR4信号通路在细胞处于正常状态和免疫抑制状态时发挥的作用,以及沉默TLR4基因后对NOD1信号通路的影响,通过建立细胞免疫抑制模型,利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,运用RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后NOD1,TLR4,RIP2,MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达变化.研究发现:(1)给予RAW264.7细胞含免疫抑制剂甲泼尼龙琥珀酸钠浓度为0.04mg/mL的RPMI1640培养液培养12h后,细胞抑制效果最佳,存活率约为90%.(2)正常RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,NOD1和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用,当细胞处于免疫抑制状态时,NOD1和TLR4信号通路不能激发其有效的免疫应答.(3)TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%.(4)TLR4基因的沉默,使NOD1信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,表明沉默TLR4基因下调了NOD1信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用.
- 饶振华谢卫华苏明声龙凯罗闳丹谢小梅
- TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用被引量:2
- 2012年
- 目的研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路发挥的作用,以及沉默TLR4基因后,对TLR2信号通路的影响。方法利用RNAi技术将11LR4-siRNA转染RAW264.7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,将细胞随机分为正常组(N组)、正常+烟曲霉孢子刺激组(N+Af组)、正常+TLR4-siRNA组[TLR4(RNAi)组]、正常+TLR4-siRNA+烟曲霉孢子刺激组[TLR4(RNAi)+Af组],RT-PCR和Westernblot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF-α蛋白的表达变化。结果(1)TLR4基因沉默前:与N组比较,N+Af组TLR2、TLR4、MyD88mRNA及TNF.Ot蛋白表达量均显著升高(P〈0.05)。(2)TLR4-siRNA(100nmol/L)转染RAW264.7细胞,沉默效率达83%。(3)TLR4基因沉默后:与N组比较,TLR4(RNAi)组TLR2、MyD88mRNA的表达量均显著降低(P〈0.05);与N+缈组比较,rrLR4(RNAi)+4厂组的TLR2、MyD88mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低(P〈0.05);与TLR4(RNAi)组比较,TLR4(RNAi)+A厂组MyD88mRNA表达量显著升高(P〈0.05),而TLR2mRNA及TNF.仪蛋白表达量却无显著变化(P〉0.05)。结论RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用;当沉默TLR4基因后,TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用,可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用。
- 饶振华朱根华谢卫华苏明声龙凯罗闳丹谢小梅
- 淡豆豉炮制中影响γ-氨基丁酸富集的主次因素初步分析被引量:10
- 2019年
- 目的对淡豆豉炮制中影响γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)富集的主次因素进行初步研究,为揭示淡豆豉高含量GABA的形成机制奠定基础。方法用常规方法测定淡豆豉炮制过程中pH值、温度、水分、蛋白酶和谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)等指标的动态变化,用本实验室建立的柱前在线衍生法测定各样本GABA含量,通过SPSS统计软件对各指标与GABA进行相关性分析。结果相关性分析和多元回归分析结果表明,淡豆豉炮制过程中水分和酸性蛋白酶与GABA相关性系数分别为0.211和-0.340,P值分别为0.324和0.228,相关性较小且无统计学差异;比较回归系数绝对值的大小可知,其他各指标在GABA形成中的主次地位为pH值(-0.375)>温度(-0.284)>GAD(0.140)>碱性蛋白酶(0.047)>中性蛋白酶(-0.030),其中pH值、温度和中性蛋白酶与GABA具有负相关性,GAD活力和碱性蛋白酶与GABA存在正相关性。结论淡豆豉炮制过程中温度、pH值、GAD、中性及碱性蛋白酶是影响GABA形成的重要因素。
- 陈青峰任佳秀周姝含熊京京苏明声王立元翁美芝谢卫华谢小梅
- 关键词:淡豆豉Γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶
- 淡豆豉炮制中γ-氨基丁酸含量测定及其抗抑郁作用研究被引量:17
- 2021年
- 目的检测淡豆豉炮制过程中各样本γ-氨基丁酸(GABA)含量并研究其抗抑郁作用。方法应用柱前在线衍生-高效液相色谱技术测定原料黑大豆(H)、发酵第6天(F6)、再闷6 d(Z6)、再闷15 d(Z15)样本水煎液中GABA含量;将昆明种小鼠随机分成对照组、模型组、盐酸氟西汀(阳性对照,0.01 g/kg)组、GABA(0.0128 g/kg)组、H(1.52 g/kg)组、F6(1.52 g/kg)组、Z6(1.52 g/kg)组和Z15低、中、高剂量(0.76、1.52、3.04 g/kg)组,采用单笼饲养加慢性温和不可预知性应激(CUMS)制备小鼠抑郁模型,各组在造模同时开始ig给药,每日应激前1 h给药,连续28 d。检测各组小鼠体质量、糖水偏好、敞箱、悬尾、强迫游泳等行为学指标的变化。结果H和F6样本水煎液未检出GABA,Z6、Z15样本的GABA质量分数分别为5.559、8.421 mg/g。与对照组比较,模型组小鼠的体质量、糖水偏好、跨格数和直立数均显著减少(P<0.01),悬尾及游泳不动时间显著增加(P<0.05、0.01),表明CUMS抑郁模型制备成功。与模型组比较,盐酸氟西汀组、GABA组、Z6组和Z15高剂量组糖水偏爱度、敞箱实验跨格数和直立数均显著增加(P<0.05、0.01),Z15中剂量组糖水偏爱度和敞箱实验直立数显著增加(P<0.05、0.01);盐酸氟西汀组、GABA组、Z6组及Z15高、中剂量组悬尾实验的不动时间均显著减少(P<0.05、0.01);各组小鼠强迫游泳实验的不动时间均显著缩短(P<0.05、0.01)。结论发现淡豆豉炮制后期出现高含量GABA;淡豆豉显著改善小鼠的快感缺失、行为绝望等抑郁症状,具有良好的抗抑郁作用并与GABA含量可能有关。
- 陈青峰贺婧谢小梅王立元谢卫华苏明声罗小泉龙凯
- 关键词:淡豆豉Γ-氨基丁酸抗抑郁作用行为学指标
- 制药工业废水处理及其脱色的研究进展被引量:5
- 2015年
- 制药工业废水的处理一直以来都是医药企业关注的焦点,因成分复杂,排放量大,危害严重,其已成为影响自然环境,人民健康甚至企业发展的重要因素。目前,制药工业废水处理和脱色的方法多样,各具特点,差异显著,给医药企业的实际生产和应用带来了一定的困难。故本文就近年来制药工业废水处理和脱色的方法进行简单的综述,为制药企业的废水处理提供一定的理论依据和参考。
- 韩飞康国仙王棋李智峰谢卫华程桂阳胡捷
- 关键词:制药工业污染物质废水处理脱色
- MPO及TNF-α在小鼠侵袭性肺曲霉病中的作用
- 2009年
- 烟曲霉菌是自然界广泛存在的腐生致病菌,易导致免疫力低下患者发生严重且致死性的侵袭性肺曲霉病(IPA)。通过建立小鼠侵袭IPA模型,探讨髓过氧化物酶(MPO)及TNF—α在侵袭IPA中的作用,为阐明IPA的发病机制提供资料。
- 罗闳丹谢卫华李祥石青刘金辉谢小梅
- 关键词:侵袭性肺曲霉病TNF-Α小鼠MPOIPA烟曲霉菌
- 项目教学法在药事管理学课程教学中的应用被引量:5
- 2017年
- 药事管理学课程理论性较强,法律法规的解读比较多,不与实践结合起来,学生难以活学活用。针对这种现状,文章选取在"药品经营质量管理"教学内容中引入"项目教学法",以能够贯穿教学内容知识点的"GSP认证申报材料准备"为项目实施"项目教学法"。
- 谢卫华吴苏芳
- 关键词:项目教学法药事管理GSP
- 雷公藤甲素对大鼠胰腺腺泡细胞的损伤作用被引量:1
- 2013年
- 雷公藤为卫矛科雷公藤属植物雷公藤(Tripterygiumwil—fordiiHook.F)的根及根茎,有免疫抑制、抗肿瘤、抗生育及抗病毒等药理作用,广泛应用于临床。但其毒性大,已报道雷公藤毒副作用表现在生殖、肝、肾及血液系统等全身多个脏器。雷公藤甲素(triptolide,TP)是雷公藤的主要活性和毒性成分。胰腺有重要的分泌功能,其损伤将产生严重后果。
- 程文超谢卫华梁永红苏明声李刚谢小梅杨明
- 关键词:雷公藤甲素胰腺腺泡细胞淀粉酶增殖抑制
- 淡豆豉炮制中产γ-氨基丁酸微生物在不同pH值和不同温度下产酶能力比较研究被引量:4
- 2020年
- 目的阐明淡豆豉炮制中微生物调控γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)的形成机制。方法采用Berthelot比色法、福林酚法测定枯草芽孢杆菌、鸟肠球菌、屎肠球菌、解淀粉芽孢杆菌、黑曲霉、黄曲霉、溜曲霉、桔青霉、极细支孢霉、白腐菌、米根霉、鲑色锁掷酵母菌12种微生物在不同pH值和不同温度条件下产谷氨酸脱羧酶(glutamicacid decarboxylase,GAD)、蛋白酶(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶)能力。结果 12种微生物在pH 5~7、28~37℃时产GAD和蛋白酶酶活较高。其中黄曲霉产GAD酶活最高,为41.97 U/h,最适pH 7、温度28℃;其次是鲑色锁掷酵母菌、黑曲霉、米根霉、枯草芽孢杆菌,酶活分别为29.04、25.78、22.42、19.43 U/h。枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶活最高,为24.80 U/mL,最适pH 7、温度37℃;其次是解淀粉芽孢杆菌、米根霉、鸟肠球菌,酶活分别为16.86、12.51、9.18 U/mL。解淀粉芽孢杆菌产碱性蛋白酶活最高,为13.29U/m L,最适pH7、温度34℃;其次是枯草芽孢杆菌、米根霉,酶活分别为8.86、6.20 U/mL。12种微生物产酸性蛋白酶能力普遍较差。结论所选的12种微生物产酶最适pH值、温度与淡豆豉自然炮制基本一致,其中真菌有较强的产GAD能力,细菌有较强的产中性蛋白酶能力,淡豆豉高富集GABA是多菌种共同作用所致。
- 周姝含黄越燕熊京京刘宇星苏明声王立元龙凯谢卫华谢小梅
- 关键词:淡豆豉Γ-氨基丁酸微生物溜曲霉桔青霉米根霉