杨飞
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
- 供职机构：河北大学医学部更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CH2b对RA模型小鼠的Th1/Th2、Th17/Treg免疫平衡紊乱的影响被引量：7
- 2017年
- 目的 探讨前期合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂CH2b对类风湿关节炎（RA）模型小鼠的Th1/Th2、Th17/Treg免疫失衡的影响.方法 应用免疫调节剂CH2b对混合肽段诱导的RA模型小鼠进行干预,以α-GalCer作为阳性对照,CBA法检测各组小鼠各期血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α、IL-6的水平变化;小鼠Th1、Th2、Th17亚群分析试剂盒检测Th1/Th2/Th17亚群比例;PCR法检测各组肝组织中T-bet mRNA、GATA-3 mRNA、ROR-γt mRNA、Foxp3 mRNA的表达水平.结果 （1）与健康对照组相比,模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-6、TNF-α水平在造模第8天开始上升,第14天升高至最高峰后逐渐下降,IL-6、TNF-α水平在第14天时上升显著（P＆lt;0.05）,IL-4水平变化无统计学意义（P＆gt;0.05）.与模型组相比,α-GalCer、CH2b组IFN-γ、IL-6、TNF-α水平从造模第8天开始逐渐下降直至炎症逐渐缓解,IL-6、TNF-α水平在第14天时显著降低（P＆lt;0.05）,IL-4水平在第14天升高.（2）造模第8天,与健康对照组相比,模型组Th1/Th17亚群比率显著增多（P＆lt;0.05）,Th2亚群比率减少;与模型组相比,α-Galcer、CH2b组Th1亚群比率减少,Th2亚群比率显著增多（P＆lt;0.05）.造模第14天,与健康对照组相比,模型组Th1/Th2/Th17亚群比率均显著增多（P＆lt;0.05）;与模型组相比,α-Galcer、CH2b组Th1/Th2/Th17细胞亚群均减少,且Th2细胞亚群显著减少（P＆lt;0.05）.（3）造模的第14天,与健康对照组相比,模型组T-bet mRNA、ROR-γt mRNA表达增强,GATA-3 mRNA表达减弱,且T-bet mRNA表达显著增强（P＆lt;0.05）;与模型组相比,α-GalCer组、CH2b组GATA-3 mRNA、Foxp3 mRNA的表达增强,T-bet mRNA的表达减弱,且GATA-3 mRNA的表达显著增强（P＆lt;0.05）,T-bet mRNA的表达显著降低（P＆lt;0.05）;与健康对照组比较,模型组T-bet mRNA与GATA-3 mRNA,ROR-γt mRNA与Foxp3 mRNA相对表达量的比值均增大;相比于模型组,α-GalCer组、CH2b组T-bet mRNA与GATA-3 mRNA
- 陈冬志王园园张雪娇刘嘉琳杨飞尹晓琳孟明侯明辉
- 关键词：免疫调节剂类风湿关节炎TH1/TH2TH1/TH2
- 葡萄糖-6-磷酸异构酶混合肽段诱导的DBA/1小鼠类风湿性关节炎模型的建立被引量：5
- 2016年
- 目的:利用葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)单一肽段及混合多肽片段免疫DBA/1小鼠,建立类风湿性关节炎(RA)模型,分析其主要评价指标及特点,为探讨RA的免疫机制及治疗提供新的理想动物模型。方法:h GPI325-339、h GPI469-483多肽片段和h GPI325-339单一肽段分别与完全弗氏佐剂充分乳化后,于小鼠尾根部皮下注射进行造模,并从体重变化、足踝关节症状评分、足踝关节病理改变、外周血及脾组织CD4+T细胞的表达、外周血i NKT细胞比例以及血清TNF-α和IL-6水平等方面进行模型鉴定及分析。结果:模型小鼠在造模第8天,后爪最先出现红肿,逐渐加重累及四肢,第14天红肿达到高峰,足踝肿胀,行动不利,此后开始逐渐缓解;组织形态学观察发现足踝关节有炎症细胞浸润,以单核细胞与淋巴细胞为主,浆细胞少量出现,混合肽段的炎症状况明显强于单肽片段。与健康对照组和单肽片段模型组相比,混合肽段模型组体重增长缓慢;外周血、脾脏CD4^+T细胞数量明显增多;炎症高峰期外周血i NKT细胞比例下降明显(P<0.05),血清中TNF-α水平显著升高(P<0.05)。结论:混合GPI肽段诱导的RA模型小鼠在免疫学特征,特别是i NKT细胞免疫病理方面与RA患者尤为接近,可作为RA免疫机制研究和治疗的良好工具。
- 张雪娇刘嘉琳杨飞娄永富王强陈冬志孟明
- 关键词：葡萄糖-6-磷酸异构酶类风湿性关节炎INKT细胞
- 免疫调节剂CH2b对活动期类风湿关节炎患者iNKT细胞免疫调节功能的影响被引量：3
- 2015年
- 目的研究新型合成的含噻唑烷4．酮的免疫调节剂CH2b对活动期类风湿关节炎（RA）患者iNKT（invariant nature killer T）细胞功能的影响。方法外周血单个核细胞（PBMC）分离自活动期RA患者，经α—Galcer和IL-2体外刺激扩增后利用iNKT分离试剂盒经磁珠分选（MACS）得到纯化的iNKT细胞；采用MTY法定量测定CH2b对iNKT细胞增殖的影响；MILLIPLEX MAP Human Cytokine／Chemokine kit检测相应iNKT细胞培养上清中IFN-γ/IL-4的水平；RT—PCR检测iNKT细胞中IFN-γ mRNA与IL-4 mRNA表达水平；Western blot检测iNKT细胞中T-bet／GATA-3表达水平。结果CH2b能显著促进IL-2活化的iNKT细胞体外增殖；增加IL-4的分泌且显著降低IFN-γ/IL-4比值；上调iNKT细胞GATA-3和IL-4 mRNA表达。结论免疫调节剂CH2b有可能通过GATA-3通路诱导iNKT细胞分泌Th2样细胞因子，促进Th0向Th2分化，提高iNKT细胞的免疫调节功能。
- 孟明杨飞许鸣华陈丹候明辉刘嘉琳陈冬志
- 关键词：类风湿关节炎INKT细胞
- 疾病模型构建新时代——CRISPR/Cas基因编辑技术被引量：1
- 2016年
- 在医学研究中,根据疾病构建模型一直是极其重要的。模型的构建对研究疾病的发生与治疗有着极为重要的意义。随着科学技术的发展,对在疾病模型构建中所应用的基因编辑技术的要求不断提高,CRISPR/Cas基因编辑技术应运而生。CRISPR/Cas是存在于细菌和古细菌中的一种免疫机制,通过人工改造CRISPR/Cas,可以使其成为一种新的基因编辑技术。相较于传统编辑方法,CRISPR/Cas系统更简单高效,易于操作,构建疾病模型成本低、耗时短,因此成为当今广泛研究和应用的方法。就CRISPR/Cas系统的基本构成、作用原理、技术方法与当前应用进行综述,并对该技术的前景进行展望,希望对有关领域的研究者有所帮助。
- 杨飞张雪娇段斐娄永富孟明
- 关键词：疾病模型
- 免疫调节剂CH2b对葡萄糖-6-磷酸异构酶混合肽段诱导的类风湿性关节炎小鼠的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探究前期合成的含噻唑烷-4-酮的免疫调节剂CH2b对葡萄糖-6-磷酸异构酶(Glucose-6-phosphate isomerase,GPI)混合肽段诱导的类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)小鼠发病的影响。方法:h GPI325-339、h GPI469-483多肽片段与完全弗氏佐剂充分乳化后,于DBA/1小鼠尾根部多点皮下注射,并用百日咳毒素加强免疫。然后分别用α-半乳糖神经酰胺(α-Gal Cer)和CH2b对模型小鼠进行干预,监测各组小鼠体重变化和足踝关节肿胀变化情况,关节组织苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察炎细胞浸润情况,流式细胞技术(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)检测全血中i NKT细胞频率变化,微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric bead array,CBA)检测血清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-4、IFN-γ水平。结果:与GPI混合肽段诱导的模型组相比,α-Gal Cer和免疫调节剂CH2b均可显著改善模型小鼠的体重增长缓慢、关节肿胀情况(P<0.05);炎性细胞浸润减少;且二者均可以显著提高RA小鼠体内i NKT细胞的频率,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);α-Gal Cer、CH2b组可以降低模型小鼠炎症高峰期TNF-α、IL-6、IFN-γ水平,两组结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论:免疫调节剂CH2b通过激活i NKT细胞影响炎性细胞因子的分泌,缓解GPI混合肽段诱导的关节炎。
- 刘嘉琳张雪娇杨飞娄永富孟明陈冬志
- 关键词：Α-GALCER葡萄糖-6-磷酸异构酶INKT细胞
- 不同剂量链脲佐菌素诱导C57BL/6小鼠1型糖尿病模型的复制与iNKT细胞的检测被引量：5
- 2017年
- 目的腹腔注射不同剂量链脲佐菌素(STZ)于雌性C57BL/6小鼠,诱导建立与人类1型糖尿病相似的动物模型,研究最适链脲佐菌素(STZ)建模剂量。方法 35只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(n=5)和模型一、二、三组(STZ剂量分别为40、50和60 mg/kg),每组10只。模型组连续5 d腹腔注射不同剂量STZ,测定注射前、注射后1、2、3、4和5周的空腹血糖和体重,小鼠胰岛素自身抗体(IAA)阳性率,观察小鼠饮食、饮水和排尿情况。流式细胞技术(FACS)分析血和脾细胞悬液中恒定自然杀伤T细胞(i NKT)细胞比例;HE染色观察胰岛病理。结果与对照组比较,模型三组饮水量、进食量和排尿量增加,体重减轻。与对照组比较,模型三组血糖变化明显,注射STZ后第1周迅速升高,第4周达高峰,随后下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组3组胰岛萎缩,胰岛细胞不规则,数目减少。模型二组和模型三组IAA阳性率分别达到30%和90%。与对照组比较,模型三组外周血CD4+NK1.1+淋巴细胞和脾CD4+NK1.1+淋巴细胞比例减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论诱导建立雌性C57BL/6小鼠1型糖尿病模型的最适STZ剂量为60 mg/kg。
- 陈冬志尹晓琳娄永富杨飞王园园刘嘉琳孟明侯明辉
- 关键词：1型糖尿病链脲佐菌素C57BL/6小鼠
- T1D发病中的双刃剑——iNKT细胞
- 2016年
- 1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)是一种由遗传因素、环境因素和免疫调节因素共同参与的自身免疫性疾病。由于免疫系统的功能紊乱和调节异常,胰岛β细胞受损,导致胰岛素缺乏,糖代谢紊乱。恒定自然杀伤T(invariant nature killer T,i NKT)细胞是一种同时参与适应性免疫和固有免疫应答的特殊T细胞亚群。近年来发现i NKT细胞与T1 D的发病密切相关,虽然有关报道众多但结论不一。旨在对这一领域的最新研究进展进行综述。
- 刘绍川娄永富胡鸿鹏杨飞孟明
- 关键词：1型糖尿病IL-17
- 免疫调节剂CH2 b对RA患者iNKT关键蛋白的影响
- 2016年
- iNKT（invariantnaturekillerT）细胞是一群表达Vcd4-Jα18TCR，具有CD1d限制性的特殊T细胞，与类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）发生密切相关。RA的核心是免疫失衡和过度炎症反应，前期研究表明：活动期RA患者体内iNKT细胞频率及功能下降，缓解期有所恢复。噻唑烷酮类核苷免疫调节剂CH2b能促进RA患者iNKT细胞的体外增殖与活化；有效缓解RA小鼠的临床症状，并上调iNKT细胞亚群比率，推断CH2b对RA的作用可能与iNKT细胞有关。
- 孟明杨飞尹晓琳王园园侯明辉许鸣华陈丹刘嘉琳陈冬志
- 关键词：免疫调节剂关键蛋白过度炎症反应CD1D免疫失衡
