丁安琪
- 作品数:6 被引量:21H指数:3
- 供职机构:福建农林大学园艺学院园艺产品贮藏保鲜研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 中国水仙NtFT2正义基因表达载体的构建与愈伤组织遗传转化体系的建立被引量:1
- 2016年
- 构建中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,为进一步研究Nt FT2基因对中国水仙芽休眠调控作用提供参考;建立中国水仙愈伤组织遗传转化体系,为中国水仙愈伤组织遗传转化提供技术平台。笔者以中国水仙主芽为材料,通过PCR扩增获得Nt FT2基因;通过PCR、双酶切、连接等方法将Nt FT2基因正向插入到p CAMBIA1301双GUS植物表达载体构建Nt FT2正义基因表达载体P1301-FT2,再通过冻融法将重组质粒P1301-FT2导入根癌农杆菌。采用根癌农杆菌介导法将Nt FT2正义基因转化中国水仙愈伤组织,采用GUS组织化学染色法检测中国水仙愈伤组织遗传转化效率。结果表明,试验成功构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体P1301-Nt FT2;中国水仙愈伤组织与0.5 mol/L甘露醇共培养6 h后,置于1.0 OD600的农杆菌重悬液中侵染20 min,在25℃、黑暗条件下,共培养6天,其GUS瞬时表达率达到64.28%。构建了中国水仙Nt FT2正义基因表达载体,建立了高效的中国水仙愈伤组织遗传转化体系。
- 冯莹朱里莹丁安琪潘东明
- 关键词:中国水仙愈伤组织
- 温度对中国水仙休眠进程相关生理和基因表达的影响
- 中国水仙(Narcissus tazzeta var. chinensis)是石蒜科水仙属多年生草本花卉,是中国十大名花之一。温度是影响中国水仙进入休眠的因素之一,本研究对中国水仙进行不同温度的处理,从细胞形态学、生理生...
- 丁安琪
- 关键词:基因表达细胞形态生理生化温度处理
- 水仙芽可溶性糖含量及NtTIM基因的表达分析被引量:9
- 2016年
- 以3年生水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)鳞茎主芽为材料,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性糖含量;采用PCR法从主芽中分离克隆NtTIM基因并对其序列进行生物信息学分析;采用qRT-PCR方法分析主芽不同生长发育时期和温度诱导下的表达变化。可溶性糖含量测定结果表明,水仙鳞茎膨大期,主芽可溶性糖含量逐渐降低;休眠期先升高后降低;花芽分化期其含量在均衡的水平(4%左右)。生物信息学分析表明:分离克隆到了1个NtTIM基因,该基因含有765 bp开放阅读框,编码254个氨基酸,属于TIM-phosphatebinding基因家族,推导的氨基酸序列与油菜、芜菁、拟南芥、甘蓝等植物具有85%以上的同源性;编码的蛋白为稳定的呈酸性的疏水蛋白,无信号肽位点但含有1个跨膜结构域、2个N-糖基化位点。qRT-PCR分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期主芽NtTIM基因表达量略升高;休眠期表达量呈阶段性降低;花芽分化期表达量略升高;20℃、25℃、30℃、35℃温度处理时,主芽NtTIM基因表达量随着温度升高而降低,且处理时间越长,其表达量越低。推测NtTIM基因参与调控水仙鳞茎主芽休眠。为进一步研究NtTIM基因的分子功能,以及深入研究水仙夏休眠的分子机制提供帮助。
- 冯莹丁安琪潘东明
- 关键词:水仙可溶性糖基因克隆
- 水仙温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL的克隆与表达分析被引量:2
- 2016年
- 采用PCR法,从水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)鳞茎主芽中分离克隆到1个温度诱导脂质运载蛋白基因NtTIL。该基因含有567 bp开放阅读框,编码188个氨基酸。该基因属于lipocalin-2superfamily基因家族;推导的氨基酸序列含有SCR1、SCR2和SCR3 3个植物lipocalin的典型结构域,与小麦、拟南芥等植物的同源性大于75%;编码的蛋白为稳定酸性亲水蛋白,不含有信号肽,进行N末端朝外由外到内的跨膜运动。qRT-PCR结果分析表明,水仙生长发育过程中鳞茎膨大期NtTIL表达量较低;休眠期表达量先升高后降低。推测NtTIL对水仙鳞茎主芽休眠具有一定调控作用。
- 丁安琪冯莹朱里莹徐世荣秦军潘东明
- 关键词:水仙克隆
- 植物芽休眠调控分子机制研究进展被引量:1
- 2015年
- 植物休眠是植物在面对不良生长环境时的保护性生存策略,这种策略对植物生长和发育都存在重要的意义,能帮助两年生或多年生植物躲避不利生长的外界环境,如高温、严寒或干旱等。本文从光照、温度和植物激素三个方面对国内外植物芽休眠调控的分子机制研究进行总结,并对今后的研究方向进行展望,旨在为植物芽休眠的进一步研究提供参考。
- 丁安琪冯莹潘腾飞郭志雄潘东明
- 关键词:芽休眠光照温度植物激素
- ‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中POD同工酶谱分析被引量:4
- 2016年
- 【目的】探讨‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中过氧化物酶(POD)的同工酶变化及赤霉素对其的影响。【方法】以赤霉素处理和未经赤霉素处理的‘红肉蜜柚’果实的近中柱和远中柱汁胞为材料,统计粒化指数后,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行可溶性和离子结合POD同工酶谱测定。【结果】发现‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化指数随着果实生长发育呈先平稳后急剧上升的趋势,有无赤霉素处理无明显变化;可溶性POD中存在酸性POD和碱性POD,有无赤霉素处理对近、远中柱POD出现的时期和组分基本没有影响;离子结合POD只存在碱性POD,近中柱POD同工酶谱分离出6条(5条为果实发育后期的特异性谱带)、远中柱POD分离出4条,两者出现的时期和组分差异较大,赤霉素处理使近中柱5条果实发育后期特异性谱带减为3条且时期提前,而赤霉素处理下的远中柱没有检测到谱带。【结论】粒化时期,离子结合POD出现的5个特异性碱性POD可能与汁胞粒化关系密切,赤霉素处理可明显减少POD谱带,但赤霉素对汁胞粒化的影响有待进一步研究。
- 徐世荣潘鹤立吴嘉玲丁安琪吕恃衡潘东明余磊张智伟李小婷
- 关键词:粒化POD同工酶谱