田玉华
- 作品数：23 被引量：77H指数：7
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金吉林省产业技术研究与开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 梅花鹿鹿茸顶端IGF-1基因的克隆、原核表达与纯化被引量：1
- 2012年
- 鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon)的第二性征,是在雄鹿额骨部长出的骨质性组织。鹿茸每年周期性地生长,这在哺乳动物中绝无仅有;鹿茸每天可长1~2 cm,速度之快也为其他任何哺乳动物组织所不及,人们推测其中存在特殊的促骨组织生长的活性物质。因此鹿茸成为研究组织器官再生的理想的生物模型。本研究旨在克隆梅花鹿胰岛素样生长因子1(Insulin-like
- 孟星宇李婷李沐刘宁田玉华胡薇
- 关键词：IGF-1CERVUS器官再生生物模型INSULIN雄鹿
- chTERT基因小干扰RNA对马立克氏病MDCC-MSB1细胞端粒酶活性的影响
- 2010年
- 本研究利用小干扰RNA技术探讨端粒酶催化亚单位对鸡马立克氏病MDCC-MSB1细胞端粒酶活性的影响。构建以chTERT基因为靶点的3个RNA干扰载体pRNAT-chTERT-siRNA,筛选并鉴定。利用脂质体转染MDCC-MSB1细胞48 h后,TRAP-PCR-ELISA法定量检测细胞端粒酶活性,并进一步筛选出最有效的小干扰RNA载体。结果显示:转染干扰载体的MDCC-MSB1细胞端粒酶活性逐渐降低,其中干扰载体pRNAT-chTERT-II转染后抑制效果最明显(<0.01)。
- 胡薇田玉华
- 关键词：端粒酶端粒酶催化亚基小干扰RNA
- 鹿花盘及其它鹿副产品的研究和开发利用被引量：12
- 2010年
- 鹿全身是宝,但是长期以来,人们只注意鹿茸的药用价值和其开发利用,却忽视了鹿其它副产品的食用与药用价值。文章着重介绍鹿花盘及部分鹿副产品的功能和研究现状,说明对鹿副产品研究和开发利用的必要性,从而有助于推进鹿产业的大力发展。
- 田玉华胡薇
- 人参鲨烯环氧酶基因的克隆与原核表达被引量：9
- 2012年
- 【目的】克隆人参皂苷生物合成途径中的鲨烯环氧酶(SQE)基因,并进行原核表达与纯化,初步探讨SQE活性与人参皂苷生成量之间的关系。【方法】以4年生人参根组织须根为材料,提取其总RNA,反转录为cD-NA。以合成的cDNA为模板,对SQE基因进行克隆,再将其插入原核表达载体pET-30a中,构建pET-30a-SQE重组质粒,经酶切和测序鉴定后,转入Rosetta大肠杆菌,经0.8mmol/L IPTG 37℃诱导表达4h后,进行SDS-PAGE电泳检测,采用Ni-Agarose亲和层析柱纯化目的蛋白,利用液相色谱-串联质谱联用技术(LC-MS)检测SQE的活性。【结果】获得了人参SQE基因1 611bp的全长编码区cDNA。酶切和测序结果表明,原核表达载体pET-30a-SQE构建成功;SDS-PAGE分析显示,在Rosetta大肠杆菌中成功诱导表达了SQE融合蛋白,且纯化后的目的蛋白纯度较高;LC-MS联用检测结果发现,随着SQE用量的增加,达玛烯二醇的生成量递增。【结论】克隆了人参SQE基因,获得了在体外具有生物学活性的SQE蛋白,并证实了其活性与人参皂苷生成量有很大的相关性。
- 胡薇刘宁田玉华李雨婷张连学
- 关键词：人参CDNA克隆原核表达
- 梅花鹿角脱盘多肽的分离纯化及对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响被引量：6
- 2014年
- 目的分离纯化梅花鹿鹿角脱盘多肽;以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘多肽对肿瘤细胞端粒酶活性的影响。方法采用酸提醇沉法提取鹿角脱盘多肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定的多肽蛋白质含量,TRAP-银染法分析MA782细胞端粒酶活性的变化,再利用相对荧光定量PCR技术检测MA782细胞端粒酶催化亚基TERT基因的表达水平。结果分离纯化出鹿角脱盘多肽粗提物,其蛋白质含量为91.800%;TRAP-银染法检测MA782细胞端粒酶的活性发现,与对照组细胞比较,多肽使细胞端粒酶活性有所下降,典型的重复序列条带数依次减少,多肽处理24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,MA782细胞中相对端粒酶活力分别为91.4、78.3、66.5、47.8、29.2、20.5,呈时间依赖性;相对荧光定量PCR法分析结果表明,与对照组比较,TERT基因的表达水平降低。结论鹿角脱盘多肽对乳腺癌细胞端粒酶活性有一定的抑制作用,可为深入研究鹿角脱盘多肽抗肿瘤活性提供依据。
- 胡薇田玉华孟星宇李沐李婷李子彬吴炎
- 关键词：多肽分离纯化端粒酶活性
- 鹿茸顶端组织IGF1R基因的部分cDNA克隆及差异表达被引量：1
- 2012年
- 鹿茸角作为一种哺乳动物器官,它具有两个独特的生长特性,即可再生和快速生长。鹿茸角在快速生长期,每天可生长1~2 cm,有研究表明,在鹿茸顶端非骨化部位存在大量受体IGF1R,可促进鹿茸细胞的增殖。本研究旨在通过对IGF1R基因的部分cDNA的克隆及在鹿茸顶端不同部位组织的差异表达分析。
- 李婷李沐孟星宇田玉华刘宁胡薇
- 关键词：CDNA克隆间充质真皮层
- 梅花鹿角脱盘化学成分的研究
- ＜正＞鹿角脱盘别名"鹿花盘"、"鹿角盘"、"珍珠盘",是雄性梅花鹿或马鹿经锯茸后,于次年脱落的骨化残角。其临床应用表明,鹿角脱盘具有补肝肾、益脾胃、强筋壮骨、镇痛散瘀、消除乳房痞块之功效。梅花鹿是我国东北地区的珍贵药用动...
- 田玉华胡薇
- 文献传递
- 梅花鹿角脱盘蛋白多肽的分离纯化及活性研究
- 鹿角脱盘是鹿科动物的角冠和残留的角根于翌年新茸萌发时自然脱落的部分,《中药大辞典》中把鹿角脱盘收录为中药材鹿角来源的一种,民间常用于治疗乳腺炎、恶疮、痈肿等。现代研究表明鹿角脱盘含有多种药理作用各异的活性成分,具有治疗乳...
- 田玉华
- 关键词：分离纯化活性研究
- 文献传递
- 梅花鹿IGF1全长cDNA的克隆及在鹿茸组织的表达被引量：1
- 2012年
- 鹿茸是鹿的第二性征,每年周期性的脱落与再生,是哺乳动物中唯一可以完全再生的器官。近年来,国内外学者相继在鹿茸中发现了各种细胞生长因子,有专家推测指出,鹿茸的周期性再生实际上是在大量细胞生长因子调控下进行的细胞生长和分化过程。胰岛素样生长因子(IGFs)是一类具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的单链多肽。
- 李沐李婷孟星宇田玉华刘宁胡薇
- 关键词：IGF1促有丝分裂间充质编码区
- 梅花鹿鹿茸顶端IGF-1基因的克隆、原核表达与纯化
- 鹿茸是梅花鹿(Cervus nippon)的第二性征,是在雄鹿额骨部长出的骨质性组织。鹿茸每年周期性地生长,这在哺乳动物中绝无仅有;鹿茸每天可长1～2 cm,速度之快也为其他任何哺乳动物组织所不及,人们推测其中存在特殊的...
- 孟星宇李婷李沐刘宁田玉华胡薇
- 文献传递
