崔元 作品数:24 被引量:116 H指数:6 供职机构: 河北农业大学 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家质检总局科技计划项目 河北省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
禽腺病毒4型感染病理组织学观察 被引量:6 2017年 将30只1日龄SPF鸡随机分为2组,其中攻毒组20只,对照组10只。攻毒组按每只0.2mL腹腔注射禽腺病毒4型(FAV-4)病毒液,对照组不做处理,隔离饲养,临床观察2周。攻毒后第3天攻毒组开始出现死亡,将死亡鸡解剖观察各器官大体病变,经聚合酶链式反应(PCR)检测为FAV-4后,采集心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏制作石蜡切片,观察病理组织学变化。结果显示,攻毒组死亡鸡只无明显临床症状而突然倒地死亡;主要剖检病变为心包积液、肝脏肿大,个别可出现脾脏肿大、肺脏淤血、肾脏肿大;病理组织学变化为肝脏、肺脏、肾脏淤血,细胞变性坏死;而对照组无任何异常症状和病理组织学变化。 陈萍 朱佳佳 马晓勇 张姗 经美 崔元 董世山 陈立功 刘聚祥 孙继国 袁万哲关键词:病理组织学 BVDV一步法双重荧光RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:8 2018年 为实现对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的快速检测和分型,本试验根据OenBank已发表的BVDV1和BVDV25’UTR基因特异性保守区域设计特异性引物和探针,以体外转录病毒RNA作为模板,建立了BVDV1和BVDV2一步法双重荧光RT-PCR方法。结果显示,双重荧光RT—PCR对BVDV1和BVDV2的检测下限均为10^2拷贝;具有较强的特异性,对口蹄疫病毒、猪瘟病毒、Hobi样病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、施马伦贝格病毒等病毒核酸的扩增均为阴性;BVDV1和BVDV2的扩增均在10^2~10^7拷贝内呈现良好的线性关系,标准曲线的相关系数(R^2)分别为0.999和0.998;方法重复性好,BVDV1和BVDV2的变异系数(CV值)分别在0.68%~1.87%和1.25%~1.900A。本试验对665份样品进行检测,共检出BVDV阳性样品45份,其中BVDV1阳性样品39份,BVDV2阳性样品5份,BVDV1和BvDv2均阳性样品1份。结果表明,本试验建立的BVDV一步法双重荧光RT-PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可广泛应用于BVDV的快速检测、分型和流行病学调查。 王建昌 王金凤 崔元 刘立兵 袁万哲关键词:牛病毒性腹泻病毒 一步法 牛病毒性腹泻高效纳米PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:5 2018年 为建立快速、灵敏的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测方法,根据GenBank已发表的序列,在其5’端非结构蛋白区域设计了1对特异性引物,用来检测BVDV,PEDV,SRV,TGEV等,同时建立了牛病毒性腹泻纳米PCR检测方法,经优化找出最佳的NanoPCR反应条件。经过检测,纳米PCR的最小检出量为15.2×10^-4,PCR的最小检出量为15.2×10^-3;BVDV的敏感性试验表明纳米PCR方法的敏感性是普通PCR的10倍。该BVDV纳米PCR具有较高的敏感性和特异性,是一种高效的检测手段,可应用于流行病学调查,同时也为BVDV的及时检测、预防和治疗奠定基础。 李佳暖 李得鑫 崔元 袁万哲 孙继国禽腺病毒4型PCR检测方法的建立与应用 被引量:14 2016年 根据禽腺病毒4型(FAdV-4)Hexon基因核苷酸序列,设计用于扩增FAdV-4的PCR引物,建立了FAdV-4 PCR检测方法。特异性和敏感性实验结果表明,该方法可扩增出954 bp的特异性核酸片段,而对禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒与禽腺病毒11型的检测结果均为阴性,对FAdV-4的最低核酸检出量为12.9 pg。该方法可用于禽腺病毒4型的临床检测与流行病学调查。 袁万哲 张姗 陈萍 张超 经美 崔元 孙继国 刘聚祥关键词:PCR 牛病毒性腹泻病毒基因分型二重RT-PCR检测方法的建立 被引量:1 2017年 为了同步检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因1型和基因2型并能够加以区分,根据Gen Bank中已发表的BVDV基因1型和基因2型、牛蓝舌病病毒(BTV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的全基因序列,采用Primer Premier 5.0软件,针对BVDV的高度保守的5'端非编码区的核苷酸序列,设计了两对特异性引物,二重RT-PCR方法扩增目的片段的大小分别为222 bp和119 bp,经过对反应体系和条件的优化,本研究建立了在同一反应体系中鉴别检测BVDV基因1型和2型的RT-PCR方法,扩增出了与预期大小相符的目的片段。该方法便捷,特异性高,敏感性强,重复性好,可作为BVDV分型鉴定和快速诊断的有效方法。 崔元 王建昌 王金凤 袁万哲关键词:BVDV 凸隆病毒的研究进展 被引量:4 2017年 凸隆病毒(Torovirus)作为一种重要的人畜共患病毒,在世界范围内广泛分布,给人和动物带来了严重威胁。该病毒从属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae),以引起人和动物消化道、呼吸道疾病为主要特征。随着分子生物学技术的不断发展和各种相关研究的不断深入,人们对凸隆病毒的研究取得了新的进展。笔者概述了凸隆病毒的发现及分类、病原学、流行病学、病理变化、诊断技术和研究前景等,以为该病的深入研究提供相关的理论参考。 邹云婧 梁中银 崔元 陈萍 袁万哲 孙继国关键词:病原学 流行病学 猪皮炎肾病综合征的诊治与防控措施 被引量:6 2016年 猪皮炎肾病综合征(porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS)是一种常见的猪传染病。该病以猪只皮肤表面出现病变(红斑、丘疹、结痂或者坏死点)和肾脏严重肿大为主要特征。病猪生长缓慢,免疫功能受到抑制,易继发其他疾病,给养猪业造成严重的损失与危害。笔者主要针对猪皮炎肾病综合征的流行病学、临床症状、病理剖检、诊断和防治措施等方面进行概述,以为该病的诊治和防控提供参考。 邹云婧 崔元 经美 袁万哲 孙继国关键词:猪皮炎肾病综合症 诊治 仔猪白痢病原菌的分离鉴定及敏感药物筛选 仔猪白痢是由致病性溶血性大肠杆菌引起的1周龄以内初生仔猪的一种急性、高度致死性疾病.仔猪白痢潜伏期短、发病率高,尤其黄痢的死亡率高,给畜牧业超成重大损失.仔猪白痢多见于10~20日龄的仔猪,发病率较高,但致死率较低,病原... 李佳暖 崔元 陈萍 袁万哲 孙继国关键词:仔猪白痢 病原分离 菌株鉴定 药敏性 各类PCR技术的优缺点比较研究 自1985年人类发明聚合酶链式反应(PCR)技术以来,PCR技术已广泛应用于动植物基因工程、微生物和医学等领域中,并且随着技术的不断完善与革新,实时荧光定量PCR、数字PCR技术也相继兴起并在不同领域被广泛应用.实时荧光... 崔元 陈萍 李佳暖 袁万哲 孙继国关键词:分子生物学 荧光定量聚合酶链式反应 鸭细小病毒SD株分离与鉴定及基因组特征分析 “鸭短喙-侏儒综合征”(Beak atrophy and dwarfism syndrome,BADS)是一种以雏鸭发育不良、喙萎缩变形、舌外伸肿胀和骨质疏松为主要特征的传染病。自2014年11月以来,该病在我国东南多省... 崔元关键词:致病机制 全基因组测序 文献传递