孙海兵
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学附属省立医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TRAIL逆转人胃腺癌SGC7901/ADR细胞多药耐药的机制探讨被引量：4
- 2017年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人胃腺癌阿霉素耐药细胞(SGC7901/ADR细胞)多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax表达的影响,以明确TRAIL逆转胃癌多药耐药的可能机制。方法 MTT法检测SGC7901/ADR细胞和其亲本细胞SGC7901对阿霉素、长春新碱、顺铂的药物敏感性。实时荧光定量PCR法检测SGC7901/ADR细胞和SGC7901细胞MDR1、MRP1、Bcl-2、Bax mRNA表达。不同浓度(10、50、100 ng/m L)TRAIL处理SGC7901/ADR细胞后,使用实时荧光定量PCR法、蛋白印迹法检测各处理细胞和空白对照(未加TRAIL)细胞MDR1、MRP、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白的表达。结果药物敏感试验显示,与亲本细胞SGC7901相比,长春新碱、阿霉素、顺铂对SGC7901/ADR细胞的IC50明显提高(P<0.01或<0.05)。SGC7901/ADR细胞中MDR1、MRP1、Bcl-2的mRNA表达量与亲本细胞SGC7901相比上升,Bax mRNA表达量降低(P均<0.01)。TRAIL处理细胞后,下调了SGC7901/ADR细胞的MDR1、MRP1、Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量,提高了Bax mRNA相对表达量,与空白对照相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 TRAIL可能通过下调MDR1、MRP1、Bcl-2和上调Bax的表达促进胃癌耐药细胞的凋亡,进而部分逆转胃癌的多药耐药。
- 孙海兵张开光李琴刘应玲陈思
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体多药耐药
- siRNA抑制Mcl-1基因表达对TRAIL诱导的人胃腺癌SGC7901/ADR细胞凋亡的影响
- 2016年
- 目的 :研究沉默髓样细胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因表达对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人胃腺癌耐多柔比星(adriamycin,ADR)SGC7901/ADR细胞凋亡的影响,并探讨胃癌耐药细胞株耐T RAI L凋亡效应的可能机制。方法 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)处理SGC7901/ADR细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞活力和细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表达水平。采用脂质体转染法将Mcl-1-si RNA转染至SGC7901/ADR细胞,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Mcl-1-si RNA对Mcl-1 m RNA及蛋白表达水平的影响。采用TRAIL(50 ng/m L)处理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR细胞,MTT法和FCM法分别检测Mcl-1基因沉默后TRAIL对细胞增殖及凋亡率的影响,并进一步用蛋白质印迹法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)的表达水平以及凋亡相关蛋白caspase 3和caspase 9的激活情况。结果 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)均能抑制人胃腺癌耐药株SGC7901/ADR细胞的增殖,并诱导其凋亡(P值均<0.05),但敏感性较低;TRAIL能明显提高SGC7901/ADR细胞中Mcl-1m RNA(P值均<0.001)和蛋白(P值均<0.05)的表达水平。Mcl-1-si RNA转染后,SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白表达均明显下调(P值均<0.001)。与阴性对照组(转染阴性对照-siR NA+TRAIL)相比,Mcl-1-siR NA转染后联合应用TRAIL组SGC7901/ADR细胞的增殖能力明显下降(P<0.001),细胞凋亡率明显增加(P<0.001),Cyt C、active-caspase 3和active-caspase 9蛋白的表达水平均明显增加(P值均<0.001)。结论 :TRAIL能上调胃癌耐药细胞株中抗凋亡蛋白Mcl-1表达,siR NA抑制Mcl-1表达可增强TRAIL对SGC7901/ADR细胞的致凋亡作用,提示胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR耐TRAIL致凋亡效应可能与Mcl-1高表达有关。
- 李琴张开光朱邢超孙海兵陈思王巧民
- 关键词：TNF相关凋亡诱导配体细胞凋亡
