袁兰
- 作品数：9 被引量：86H指数：6
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- 中毒剂量谷氨酸引起大脑皮质神经细胞的钙振荡及其机制探讨被引量：4
- 1999年
- 目的和方法：本文观察中毒剂量谷氨酸对大鼠大脑皮质神经细胞内Ｃａ２＋ 含量变化的影响，并对其机制进行探讨。将１ ｍ ｍｏｌ／Ｌ谷氨酸加入大脑皮质神经细胞培养液中通过激光共聚焦扫描显微镜（ｌａｓｅｒ ｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ＬＣＳＭ） 观察细胞内Ｃａ２＋ 含量的变化。结果：①１ ｍ ｍｏｌ／Ｌ谷氨酸作用后在观察的８６ 个细胞中，７１ ％ 的细胞内游离Ｃａ２＋ 浓度发生钙振荡，发生钙振荡的波型均为尖峰型：②在抑制细胞内钙库释放后加入１ ｍ ｍｏｌ／Ｌ 谷氨酸，细胞内Ｃａ２＋ 浓度上升，但没有产生钙振荡；而抑制细胞外Ｃａ２ ＋ 内流后加入１ ｍｍｏｌ／Ｌ 谷氨酸，细胞内Ｃａ２ ＋ 发生钙振荡，但振荡幅度逐渐下降直至振荡消失。结论：中毒剂量谷氨酸引起神经细胞钙振荡形成的可能机制是：细胞内钙库的释放和摄取是Ｃａ２ ＋ 发生振荡的必要条件，而振荡的维持则依赖于细胞外Ｃａ２＋
- 邢虹何其华于桂芬袁兰徐家吴本
- 关键词：钙离子谷氨酸中毒剂量钙振荡大脑皮质
- 葡萄糖和镁离子在谷氨酸诱发的神经细胞损伤中的作用被引量：7
- 2000年
- 目的和方法 :以激光共聚焦扫描显微镜观察了无葡萄糖和无镁离子细胞外液对中毒剂量谷氨酸引起的大脑皮质神经细胞损伤作用的影响。结果 :无葡萄糖及无镁离子时均可使谷氨酸引起的神经细胞内钙振荡频率及幅度下降 ,但前者可使细胞内基础Ca2 +降低 ,后者可使细胞内基础Ca2 +增加。结论 :无镁可加重谷氨酸引起的细胞内Ca2 +超载 ,在一定条件下无葡萄糖可拮抗谷氨酸及无镁离子的损伤作用。
- 邢虹何其华袁兰徐家鸰吴本玠
- 关键词：谷氨酸盐类葡萄糖镁离子钙离子
- 脑缺血损伤时脑片细胞内Ca^(2+)及脂质过氧化物的测定被引量：3
- 2000年
- 用插线法制作局灶性脑缺血/再灌损伤模型 ,激光共聚焦扫描显微镜观察活体脑片细胞内Ca2 +的分布及脂质过氧化物水平的动态变化 ,结果表明 :缺血1h时只有纹状体Ca2 +含量增加 ,而缺血4h时梗塞侧皮质、纹状体区域的Ca2 +和脂质过氧化物含量均明显增加 ;在有缺血损伤的各组再灌后细胞内Ca2 +与脂质过氧化物含量均进一步增高 ,且与缺血时间相关 ,而与再灌持续时间无明显关系 ;轻度缺血/再灌损伤时细胞内脂质过氧化物增加的发生较增钙反应为早 ;纹状体对缺血/再灌损伤比皮质敏感。
- 邢虹何其华袁兰丁亚男徐家鸰吴本玠
- 关键词：局灶性脑缺血脂质过氧化物钙离子
- 对乳腺癌细胞形态定量分析中形状因子参数的研究被引量：12
- 2000年
- 杨建茹陈跃管增伟徐妙生李华江袁兰
- 关键词：乳腺癌细胞形态
- 局灶性脑缺血再灌损伤时神经细胞内Ca^(2+)时空动态变化的实验研究被引量：13
- 1999年
- 本文用插线法制作局灶性脑缺血／再灌损伤模型，利用激光共聚焦扫描显微镜观察活体脑片细胞内Ｃａ２＋的分布及动态变化，结果表明：（１）缺血／再灌时间不同，梗塞面积不同，缺血４小时梗塞面积占同侧半球的１６．３％，缺血４小时再灌２０小时梗塞面积增加到２５．９％，缺血２４小时梗塞面积占同侧半球的６０．４％。（２）本文首次观察到在缺血４小时纹状体区域的Ｃａ２＋变化明显高于皮层。
- 邢虹何其华袁兰徐家吴本
- 关键词：脑片局灶性脑缺血钙离子激光共聚焦扫描显微镜
- 凋亡细胞细胞膜和线粒体的动态变化被引量：33
- 2000年
- 应用拓扑异构酶抑制剂VP-16及化学毒物叠氮钠分别诱导HL-60细胞凋亡及坏死,在0、2、4、8、16及24h各时间点,应用Hoechst33258染色,荧光显微镜及透射电镜对核形态进行观察,通过流式细胞术检测二乙酸荧光素(FDA)、罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)荧光强度的变化,观察细胞凋亡及坏死过程中细胞膜通透性和线粒体膜电位的动态变化。结果显示:HL-60细胞在VP-16处理4h时核形态开始变化,有核浓缩的细胞比例在8h达高峰,然后下降;核碎裂细胞的比例在24h达高峰,约占80%,表明核浓缩发生在核碎裂之前。线粒体跨膜电位在8h后渐渐降低,16h可见明显降低。坏死细胞的线粒体膜电位在4h降低50%,细胞膜通透性也在8h之后出现变化。随处理的时间延长,FDA荧光强度进一步降低,对PI的摄取渐渐升高。结果提示,细胞凋亡过程中细胞膜通透性逐渐增高,线粒体膜电位降低。这两个指标能反映细胞凋亡及其程度,结合对细胞核形态观察,能更准确、可靠地反映细胞凋亡的发展变化。
- 管增伟王盛兰李勇杨业鹏袁兰杨建如马士良王起恩
- 关键词：细胞凋亡流式细胞术细胞膜线粒体
- 大鼠脑局灶缺血再灌注后NMDA受体的改变被引量：6
- 2000年
- 目的 研究大鼠脑局灶性缺血再灌注模型中N 甲基 D天冬氨酸 (NMDA)受体随时间的变化。方法 采用线栓法阻断大鼠大脑中动脉 ,产生局灶性脑缺血再灌注模型 ,快速取脑 ,冰冻切片。以3H MK 80 1作为放射性配基 ,将恒温保温后的标本在室温下氚片上进行放射自显影 ,勾划脑左右两侧感兴趣区 (ROI) ,采用LETCAQ 5 5 0IWL图像分析系统测定并比较缺血侧与对侧ROI内NMDA受体的密度。在受体结合法中 ,分离出缺血区中段皮层 ,匀浆、离心后与放射性配基进行受体结合反应 ,将液闪测得的数值作Scatchard图 ,求出NMDA受体的亲和力 (Kd)及最大结合容量 (Bmax)并进行比较。结果 根据放射自显影图 ,缺血 2h组以及缺血 2h再灌 2h组同假手术组相比 ,相应的NMDA受体密度比值明显升高 ,表明NMDA受体通道大量开放。这主要是兴奋性氨基酸升高所致。再灌注2 4h组及再灌注 72h组相应ROI中NMDA受体开放明显降低 ,且两组无明显差异。各实验组中缺血及再灌注区Kd 值都未发生明显变化 ,表明缺血再灌注前后受体亲和力未发生改变。缺血 2h组及再灌注 2h组Bmax值明显升高 ,再灌 2 4h及 72h组的Bmax明显降低。结论 大鼠脑局灶缺血及再灌注过程中 ,兴奋性氨基酸明显上升并维持数小时 ;NMDA受体在 4h内被大量激活 ,通道开放 ,引起缺血损伤。
- 徐乐焱王世真左萍萍郭玉璞刘士民袁兰陈越杨剑茹
- 关键词：受体NMDA放射自显影脑梗塞局灶性脑缺血
- T细胞亚群CD4测定方法的研究被引量：2
- 2000年
- 为比较外周血T淋巴细胞亚群CD4不同测定方法的差别 ,以流式细胞术为定量手段 ,测定了猴外周血中三种不同方法处理后CD4的表达 .结果表明 :先标后溶法———先用异硫氰荧光素标记的单克隆抗体 (FITC CD4McAb)标记后 ,再加入红细胞溶解液溶掉红细胞的处理方法 ,结果基本等同于传统的淋巴细胞分离法 ,但样本用量仅为传统方法的 1/ 5 ,且操作简单 .激光共焦显微术的形态学研究也证实 :先标后溶法与淋巴细胞分离法相似 ,其细胞膜表面荧光标记清晰 。
- 韩梅吕平何其华袁兰马士良陶家平
- 关键词：T淋巴细胞CD4流式细胞术
- 白细胞介素6与血小板活化因子对中性粒细胞凋亡的抑制作用被引量：7
- 2000年
- 应用血浆 Percoll梯度分离技术分离健康供血者的中性粒细胞 (PMN)并以 2× 10 7PMN/ml培养2 4h,实验分白细胞介素 6 (IL- 6 )、血小板活化因子 (PAF)单独处理组。 PAF受体拮抗剂 BN5 2 0 2 1预处理后再以 PAF、IL - 6分别处理组。吖啶橙和溴乙啶染色 ,荧光显微镜下观察细胞形态并记数进行细胞凋亡的定性定量分析。结果表明 ,IL- 6和 PAF均有抑制 PMN凋亡的作用。PAF受体拮抗剂 BN5 2 0 2 1能消除 IL- 6和PAF抑制 PMN凋亡的作用。提示 IL - 6抑制 PMN凋亡的机制可能是通过 PAF而实现的。从而从一个侧面说明了 IL- 6和 PAF介导的损伤后炎症反应及继发性器官功能衰竭可能与抑制中性粒细胞凋亡加剧炎症反应有关。
- 管增伟李勇王盛兰杨建如马仕良袁兰
- 关键词：白细胞介素6血小板活化因子中性粒细胞炎症
