张蓓
- 作品数：10 被引量：3H指数：1
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- SET蛋白对精母细胞株(GC-2 spd)增殖和组蛋白乙酰化的影响
- 2017年
- 目的:观察SET蛋白对GC-2 spd精母细胞株增殖和组蛋白乙酰化的影响,探讨SET蛋白调节精子形成的作用。方法:体外培养GC-2 spd细胞,通过精母细胞标志物乳酸脱氢酶C(LDHC)和睾丸特异激酶1(TESK1)鉴定。琼脂糖珠免疫共沉淀试剂盒检测SET蛋白与组蛋白H4的结合。分别转染空载腺病毒(Ad H1-si RNA/NS,对照组)和SET干涉腺病毒(Ad H1-si RNA/SET,干涉组),比较细胞增殖情况,荧光显微镜观察GC-2spd细胞中SET蛋白的表达;用实时定量逆转录聚合酶链反应(Real time RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测m RNA以及蛋白的表达。结果:免疫荧光显示精母细胞株GC-2 spd阳性表达LDHC和TESK1;SET蛋白表达于GC-2细胞的胞核和胞质中,免疫共沉淀提示SET蛋白与组蛋白H4结合。转染SET干涉腺病毒后,核内和胞质中SET蛋白表达明显降低(P<0.01)。与对照组相比,干涉组细胞增殖明显降低,组蛋白H4乙酰化水平明显增高(P<0.05);但组蛋白乙酰化酶(HATs)和去乙酰化酶(HDACs)m RNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:精母细胞核内和胞浆中均表达SET蛋白;SET蛋白降调,则抑制GC-2spd细胞增殖。SET蛋白可能通过与组蛋白H4相互作用调节其乙酰化,参与调节精子形成。
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- 关键词：精子发生精母细胞组蛋白类组蛋白乙酰化
- Genistein对人宫颈癌Hela细胞的增殖及凋亡的影响及其作为放疗增敏剂的初步探讨
- 目的探讨Genistein对人宫颈癌Hela细胞的抑制及诱导凋亡的作用及其作为放疗增敏剂的可能性及机理。方法应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测小同剂量及时间Genistein对入宫颈癌Hela细胞体外生长抑制作用。流式细胞技术...
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- 文献传递
- SET蛋白调节睾丸支持细胞雄激素合成酶的表达
- 目的：SET蛋白是细胞内多任务因子,参与多种生物过程,包括细胞周期、细胞凋亡、核DNA复制、基因转录以及表观遗传调节、肿瘤生成和转移等。课题组前期研究发现,SET蛋白在睾丸间质细胞胞浆中表达,可能参与调节雄激素合成。本文...
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- 关键词：睾酮间质细胞STAR
- SET蛋白对精母细胞株(GC-2 spd)增殖和组蛋白乙酰化的影响
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- Calretinin increases androgen production in testicular Leydig cells
- 崔毓桂徐文丹张蓓朱倩高超高莉
- 蛋白质乙酰化与精子DNA稳定性和精子活力被引量：1
- 2016年
- 表观遗传学参与调节精子发生和精子形成,其中组蛋白及非组蛋白乙酰化对生精细胞染色质结构重建以及精子活力起关键作用。环磷酸腺苷(cAMP)反应元件连接蛋白(CREB)的结合蛋白(CREBbinding protein,CBP)和p300是两个乙酰化酶,能使核心组蛋白发生乙酰化,其乙酰化作用能被乙酰化酶抑制剂(INHAT)所抑制。睾丸特异的布罗莫结构域(BRDT)蛋白为保守的核蛋白,能够识别乙酰化和非乙酰化的组蛋白。在精子发生早期,BRDT调节基因转录;在精子形成阶段,BRDT识别高度乙酰化组蛋白,接着组蛋白被鱼精蛋白替代,从而使精子形成致密的染色质。非组蛋白α微管蛋白(α-Tubulin)去乙酰化则降低精子活力,在少弱精患者精子中乙酰化α微管蛋白(acetylatedα-tubulin,Ac-α-Tu)明显下降。
- 张蓓崔毓桂
- 关键词：精子发生组蛋白类微管蛋白
- SET蛋白对精原细胞株GC-1 spg增殖和凋亡的影响
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- LV-calb2和LV-siRNA-calb2慢病毒载体的构建及其在睾丸间质细胞的表达被引量：1
- 2016年
- 目的:构建钙视网膜蛋白(CALB2)基因超表达及小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体,观察CALB2对睾丸间质细胞雄激素合成的调节作用。方法:合成超表达及干涉的质粒,转入制备好的细菌感受态细胞,聚合酶链反应(PCR)鉴定阳性重组子后测序验证,确认构建成功的超表达及干涉慢病毒载体。用上述慢病毒载体分别感染MLTC-1及R2C间质细胞,观察感染效率,而后用放射免疫法检测睾酮和孕酮的合成。结果:PCR和基因测序证实LV-calb2和LV-si RNA-calb2慢病毒载体构建成功,并可高效感染MLTC-1及R2C细胞。超表达CALB2后,MLTC-1细胞睾酮生成显著增加(P<0.001);干涉CALB2表达后,R2C间质细胞孕酮生成显著减少(P<0.05)。结论:成功构建了calb2基因超表达及干涉慢病毒载体,并可体外转染睾丸间质细胞系。初步结果表明,CALB2可促进间质细胞类固醇激素生成。
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- 关键词：慢病毒属睾丸莱迪希细胞雄激素类
- SET蛋白对精原细胞株GC-1spg增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨SET蛋白对精原细胞株GC-1spg增殖和凋亡的影响。方法使用含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基在37℃、5%CO2条件下培养GC-1spg细胞,分对照组(转染无关序列腺病毒)和实验组[转染SET干涉腺病毒(AdH1-siRNA/SET)];GC-1spg接种于96孔板或者6孔板,转染腺病毒48h、72h后收集细胞,免疫荧光和共聚焦激光扫描显微镜检测SET蛋白在GC-1spg细胞中的表达与定位;提取细胞总蛋白,Western Blot检测转染前后SET蛋白的表达;细胞计数试剂盒-8(CCK8)和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法检测细胞的数目和增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 SET蛋白表达于GC-1spg细胞的胞核和胞浆中,且胞浆分布多于胞核;转染SET干涉腺病毒后,干涉组GC-1spg细胞中的SET蛋白相对表达量为(0.217±0.044)显著低于对照组的(0.629±0.170)(P<0.05),同时GC-1spg细胞的数目减少,增殖减慢,且细胞凋亡率显著增加[干涉组(21.663±1.287)%,对照组(8.813±0.671)%](P均<0.01)。结论SET蛋白在精原细胞GC-1spg胞核和胞浆中均有表达,且胞浆分布多于胞核;GC-1spg细胞中SET蛋白表达降低,能够抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,提示SET蛋白可能参与调节精子发生的过程。
- 朱倩徐文丹张蓓许波群高超高莉刘嘉茵崔毓桂
- 关键词：精子发生精原细胞细胞增殖细胞凋亡
- SET蛋白调节睾丸间质细胞MLTC-1的睾酮合成
- 张蓓朱倩徐文丹刘嘉茵崔毓桂
