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王凯: 作品数：15 被引量：23H指数：3; 供职机构：宁夏医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生化学工程更多>>

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高同型半胱氨酸血症对急性ST段抬高型心肌梗死患者淋巴细胞KV1.3-CaN-NFAT信号通路的影响被引量：10: 2016年; 目的观察不同水平高同型半胱氨酸血症(Hhcy)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者淋巴细胞内电压门控性钾离子通道(KV1.3通道)-钙调神经磷酸酶(CaN)-活化T细胞核因子(NFAT)-炎性因子(IL-6、TNF-α)mRNA及蛋白表达水平的影响。方法入选STEMI患者90例,根据血浆Hcy水平分为3组:实验A组(STEMI组,Hcy<15μmol/L,n=30)、实验B组(STEMI+轻度Hhcy组,Hcy 15~30μmol/L,n=30)、实验C组(STEMI+中度Hhcy组,Hcy>30μmol/L,n=30),另选取健康体检者30例为对照组。抽取血标本后使用全自动生化仪测定血浆Hcy浓度,密度梯度离心法提取淋巴细胞,RT-PCR检测KV1.3、CnAα、NFAT1、IL-6、TNF-αmRNA的表达,Western blot检测KV1.3、CnAα、NFAT1蛋白的表达。结果各实验组较对照组KV1.3、CnAα和NFAT1的mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),各实验组间两两比较显示,实验B组较实验A组表达水平升高(P<0.05或P<0.01),实验C组较实验B组和实验A组表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。各实验组IL-6和TNF-α的mRNA表达水平高于对照组(P<0.01),各实验组间两两比较显示,实验B组较实验A组表达水平升高(P<0.01),实验C组较实验B组和实验A组表达水平升高(P<0.01)。实验组血浆Hcy水平与KV1.3mRNA和蛋白表达之间呈正相关,相关系数分别为r=0.503(P=0.000)、r=0.726(P=0.000)。结论血浆Hcy浓度水平越高,STEMI患者淋巴细胞内KV1.3-CnAα-NFAT1的mRNA和蛋白表达水平及炎性因子IL-6、TNF-α的mRNA表达水平越高,这一信号通路可能是Hcy加重STEMI炎症反应的机制之一。; 王玉岭贾绍斌侯建军丛广志杨绍兵崔莹王凯; 关键词：高同型半胱氨酸血症淋巴细胞信号通路

氧化铍致大鼠肺纤维化及相关指标的动态变化被引量：3: 2016年; [目的]探讨氧化铍(Be O)致SD大鼠肺纤维化过程中肺组织的病理变化及纤维化相关指标的动态变化。[方法]无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠64只,随机分为阴性对照组、Be O染毒组。染毒方法采用一次性非暴露式气管内灌注法,Be O染毒组灌注0.5 m L浓度为10 g/L的Be O悬浮液,阴性对照组灌注相同体积的质量分数为0.9%的生理盐水溶液。两组大鼠分别于染毒后的第20、40、60和80天4个时间点处死,每时间点每组各8只。取肺组织制作病理标本通过光学显微镜观察其肺组织病理变化并检测血清和肺组织匀浆中的胶原蛋白Ⅰ(COL-Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ(COL-Ⅲ)、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。[结果]Be O染毒组肺组织病理观察染毒早期主要病理改变为支气管、肺间质炎性细胞浸润,并以单核/巨噬细胞为主,肺泡隔增厚,染毒后期肺泡间隔明显增厚,肺泡腔缩小,部分肺泡结构消失,肺泡结构紊乱,局部可见纤维化结节,结节中央可见Be O粉尘,肺组织局部发生实变。肺组织匀浆中:染毒组中COL-Ⅰ表达高于同时间点的阴性对照组(P<0.05),染毒后60、80天COL-Ⅲ表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后80天α-SMA表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后60、80天TGF-β1表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05);与染毒后20天时比较,阴性对照组中各指标其他所有时间点与之差异均无统计学意义,染毒后40、60、80天COL-Ⅰ表达高于20天的(P<0.05),染毒后80天α-SMA、COL-Ⅲ、TGF-β1表达高于20天的(P<0.05)。血清中:染毒后60、80天COL-Ⅲ和TGF-β1表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后80天COL-Ⅰ表达高于同时间点的阴性对照组(P<0.05),染毒组中α-SMA表达均高于同时间点阴性对照组(P<0.05);与20天时比较,阴性对照组中各指标其他所有时间点与之差异均无统计学意义;染毒后60、80天COL-Ⅲ及染毒后80天CO; 王凯刘志宏王和静王瑶魏丛慧张娜周慈; 关键词：氧化铍肺纤维化 Α-平滑肌肌动蛋白转化生长因子Β1

胸腺细胞分化抗原-1DNA甲基化在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞纤维化中作用研究被引量：5: 2016年; 目的通过观察硫酸铍刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)所致胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化改变情况,探讨Thy-1在硫酸铍致肺纤维化中的作用。方法建立离体MRC-5细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0和100.0μmol/L的硫酸铍染毒(设为低、中、高剂量组),对照组不作染毒处理;另设甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和10.0μmol/L AZC处理)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和0.5μmol/L TSA处理)。分别在染毒24、48和72 h后收集细胞,采用实时定量式聚合酶链式反应检测胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Thy-1的mRNA相对表达水平,巢式降落式甲基化特异性聚合酶链式反应检测Thy-1 DNA甲基化水平。结果在24 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白ⅢmRNA相对表达水平呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);在48和72 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-SMA的mRNA相对表达水平均呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);3个剂量组MRC-5细胞上述3个指标均呈随着染毒时间的增加而增加趋势(P<0.05)。3个剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P<0.05),高剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平低于低剂量组(P<0.05)。中、高剂量组Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),3个剂量组Thy-1 DNA甲基化水平呈随染毒剂量增加而增加趋势(P<0.05)。2个干预组MRC-5细胞Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),但与中剂量组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论硫酸铍刺激可导致MRC-5细胞纤维化的发生;该过程中Thy-1 DNA甲基化程度升高,Thy-1 mRNA表达水平降低,可能是硫酸铍致肺纤维化的重要机制之一。; 王瑶刘志宏魏丛慧龚爱红严青张庆锋王凯王和静; 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白肺纤维化 DNA甲基化人胚肺成纤维细胞

一种用于大鼠应激模型的束缚装置: 本实用新型公开了一种用于大鼠应激模型的束缚装置，包括底座，所述底座上设有对大鼠尾部进行夹持的束缚机构，所述束缚机构包括设置在底座上的L型定位架，所述L型定位架的顶部设有竖直向下的螺纹筒，所述螺纹筒内设有竖直的手动螺杆，所...; 关素珍王凯赵枫刘红娅陈小惠戚发秋付有娟

煤尘致人胚肺成纤维细胞纤维化中胸腺分化抗原-1 DNA甲基化的变化被引量：2: 2016年; [目的]观察煤尘通过单核细胞源性巨噬细胞致人胚肺成纤维细胞MRC-5纤维化改变过程中,胸腺分化抗原-1(Thy-1)表达及其DNA甲基化变化。[方法]用含500 nmol/L佛波酯的1640培养液培养人单核细胞,24 h诱导分化后成巨噬细胞;收集100μg/m L煤尘刺激巨噬细胞24 h的培养上清,再刺激MRC-5 24、48、72 h,对照组分别为正常巨噬细胞和正常人胚肺成纤维细胞。酶联免疫分析法测定巨噬细胞上清液中IL-6、TGF-β1蛋白表达水平和MRC-5中TGF-β1蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法检测胶原蛋白-I、胶原蛋白-III、α-SMA、Thy-1、DNA甲基化转移酶(DNMTs)1、3a、3b m RNA的表达,巢式降落式特异性PCR检测Thy-1DNA甲基化。[结果]煤尘组巨噬细胞上清中IL-6、TGF-β1蛋白表达水平与对照组比较明显增加[(5.542±0.953)ng/m Lvs(2.498±0.456)ng/m L,(462.435±56.620)ng/L vs(329.971±17.911)ng/L](P<0.05);巨噬细胞染尘后上清刺激MRC-5 24、48、72 h,TGF-β1蛋白表达[(223.813±5.723),(263.757±17.254),(326.720±11.263)ng/L]和胶原蛋白I m RNA表达(3.38±0.37,3.87±0.28,4.40±0.10)、胶原蛋白III m RNA表达(1.65±0.12,2.37±0.19,2.66±0.28)、α-SMA m RNA表达(2.41±0.47,4.76±0.10,4.23±0.63)均升高;且均存在时间效应关系,r值分别为0.965,0.876,0.899,0.667(P<0.05);煤尘组MRC-5中Thy-1m RNA表达均低于对照组,随着巨噬上清液作用时间的增加,其表达逐渐降低(0.634±0.014,0.448±0.055,0.352±0.044),呈负相关(r=-0.945,P<0.05);煤尘组MRC-5中DNMTs m RNA表达均较对照组升高(DNMT1:1.57±0.12,2.51±0.33,7.00±0.71;DNMT3a:0.74±0.09,2.89±0.52,3.31±0.53;DNMT3b:1.46±0.18,2.25±0.44,5.33±0.16),且均存在时间效应关系,r值分别为0.924,0.890,0.937(P<0.05);煤尘组Thy-1 DNA甲基化水平较对照组升高(0.506±0.014,0.536±0.017,0.570±0.032),存在时间效应关系(r=0.682,P<0.05)。[结论]煤尘通过单核细胞源性巨噬细胞致人胚肺成纤维细胞纤维化发生,在此过程中Thy-1 DNA发生甲基�; 魏丛慧王瑶王凯王和静张庆锋刘志宏; 关键词：煤尘人胚肺成纤维细胞纤维化 DNA甲基化

一种用于大鼠应激模型的摇晃装置: 本实用新型公开了一种用于大鼠应激模型的摇晃装置，包括固定底座,所述固定底座上设有连接杆，所述连接杆之间设有摇晃板，所述摇晃板通过滚轴与连接杆转动连接；所述固定底座上安装有摇晃机构，所述摇晃机构包括固定在固定底座上的电机，...; 关素珍刘红娅陈小惠戚发秋付有娟赵枫王凯; 文献传递

5-Aza-CdR在煤工尘肺纤维化中的作用: <正>目的:尘肺病是我国最严重的职业病,而煤工尘肺是其重要部分。本研究通过煤尘染毒SD大鼠复制煤工尘肺模型,探讨DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR在煤工尘肺纤维化中的作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为3组:阴性对照组、...; 张娜刘志宏刘科良王凯朱玲勤杨惠芳; 文献传递

一种用于职业人群心理健康的放松椅: 本实用新型公开了一种用于职业人群心理健康的放松椅，包括带有椅背的座椅主体，所述椅背上设有安装口，所述安装口内安装有背部按摩机构，所述背部按摩机构包括嵌设在安装口内的定位块，所述定位块的前侧设有旋转盘，所述旋转盘上设有多个...; 关素珍王凯; 文献传递

肝X受体α在同型半胱氨酸促进动脉粥样硬化中的作用机制研究: 目的：　　探讨肝X受体a（Liver X receptor a,LXRα）在同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）促进泡沫细胞形成及动脉粥样硬化中的作用。　　方法：　　培养ApoE-/-及C57BL/6J小鼠，...; 王凯; 关键词：动脉粥样硬化同型半胱氨酸泡沫细胞; 文献传递

氧化铍致大鼠肺纤维化的实验研究: 目的：　　本研究以BeO为染毒物质，复制大鼠肺纤维化动物模型，通过检测实验动物染毒Thy-1、TGFβ-smad2/3信号通路蛋白的表达，探讨Thy-1、TGFβ1-smad2/3信号通路在铍致肺纤维化中的意义，为后续研...; 王凯; 关键词：肺纤维化氧化铍转化生长因子-Β 动物实验

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