李洪伟
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 幼年特发性关节炎患儿Notch信号通路相关基因表达的意义被引量：2
- 2017年
- 目的分析幼年特发性关节炎（JIA）患儿Notch信号通路与淋巴细胞及细胞因子水平的关系，探讨其在JIA发病机制中的作用。方法选择2015年11月至2016年2月在广州市妇女儿童医疗中心过敏免疫风湿科诊断的35例JIA患儿（JIA组），男20例，女15例；年龄（6．5±4．0）岁（0．83～15．00岁）。其中全身型组22例，关节型组13例（多关节型7例，少关节型6例）。健康对照组15例，男6例，女9例；年龄（5．0±2．9）岁（1．0～11．0岁）。采用实时荧光定量PCR检测JIA组和健康对照组外周血中Notch受体、配体及靶基因mR-NA的表达水平；ELISA法测定2组血浆中白细胞介素（IL）-1p、IL-10、IL-6、IL-17、转化生长因子-（TGF-B）及IL_4细胞因子水平。结果与健康对照组比较，JIA组外周血中Notch2（0．4±0．3比1．6±3．2）、Jaggedl（11．3±1．2比44．0±79．0）及HES1（0．1±0．1比0．4±0．3）mRNA均高表达，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。JIA组与健康对照组比较，血浆中IL-1B水平升高[（182．22±309．13）ng／L比（54．71±20．33）ng／L]，IL-10水平升高[（32．99±34．28）ng／L比（22．68±4．56）ng／L]，IL-6水平升高[（100．48±305．57）ng／L比（13．98±2．78）ng／L]，IL-17水平升高[（9．11±17．57）ng／L比（2．42±0．29）ng／L]，TGF—B水平升高[（14．37±9．33）ng／L比（5．49±4．49）ng／L]，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。全身型JIA患儿外周血中HESlmRNA表达量与STAT3mRNA表达量呈正相关（r=0．573，P〈0．05）；全身型组JIA患儿外周血中HESlmRNA水平与CD3^＋T淋巴细胞（r=0．528）、CD19^＋B淋巴细胞（r=0．480）、CD3^＋CD8^＋抑制T淋巴细胞（r=0．457）、CD16^＋CD56^＋NK细胞（r=0．598）数量呈正相关（均P〈0．05）；关节型组JIA患儿外周血中HESlmRNA水平与CD3^＋T淋巴细胞数量呈正相关（r=0．577，P〈0．05）。结论Notch�
- 陈挚程苏云李洪伟谢颖李丰曾萍孙广超陈香元曾华松
- 关键词：幼年特发性关节炎NOTCH信号通路淋巴细胞细胞因子
- NOD样受体312在幼年特发性关节炎外周血单核细胞中相关性分析被引量：2
- 2017年
- 目的探究炎症小体（NLRP3、NLRPl2）及相关信号蛋白在幼年特发性关节炎（JIA）PBMCs中的表达分析。方法分别采集在广州市妇女儿童医疗中心确诊的55例活动期JIA患儿（病例组：全身型组30例，关节型组25例）；健康对照组22名外周血标本，分离PBMCs及血清，提取并逆转录为cDNA；荧光定量PCR检烈NLRP3、NLRPl2,凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、capase．1组间表达差异，计算标准化后的2。An值，ELISA法检测血浆IL-1、IL-4、IL-10表达，组间比较用非参数检验（Kruskal．Wallis检验），NLRP3、NLRPl2与ASC,IL-1、IL4、IL-10，T细胞、B细胞NK细胞绝对计数用Pearson法进行相关性分析。结果NLRP3、NLRPl2、ASC、Capase-1在病例组（全身型组和关节型组）均较对照组高表达（P〈0．05），病例组组间表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。病例组（全身型组、关节型组）IL-1浓度较对照组高（U=1，P=O．001）（U=14，P=O．001）；病例组（全身型组、关节型组）IL．4浓度与对照组差异无统计学意义（U=662，P=0．13）（U：823，P=01535），全身型组IL-10浓度较对照组升高（U=750，P=0．023），而关节型组差异则无统计学意义（U=672，P=0．212）；全身型组与关节型组IL-1（U=658，P=0．408），IL．4（U=475，P=0．068），IL．10（U=475，P=0．195）差异无统计学意义。病例组NLRP3mRNA相对表达量与aSC（r=0．44，P=0．0134）、IL．1（r=0．58，P=0．001）、ESR（r=0．415，P=0．039）、CRP（r=0．438，P=0．046）呈正相关，病例组NLRPl2tuRNA相对表达量与ASC（r=0．5837，P=0．007）、CRP（r=0．46，P=0．0316）、ESR（r=0．003，P=0．56）、CD8＋T（r=0．414，P=0．036）呈正相关。结论JIAPBMCs炎症小体（NLRP3、NLRPl2）异常表达可能与幼年特发性关节炎急性炎症有关，炎症小体或许能成为JIA新的治疗靶标。
- 谢颖李洪伟程苏云陈挚李丰曾萍曾华松
- 关键词：关节炎幼年型类风湿单核细胞
- 幼年特发性关节炎患者外周血单个核细胞中miR-21miR-19a与JA刚STAT通路的表达与意义被引量：4
- 2016年
- 目的探讨miR-21、miR-19a在幼年特发性关节炎（JIA）发病中的作用及与JAK／STAT通路关键靶基因（SOCS3、STAT3）的相互关系。方法收集广州市妇女儿童医疗中心确诊的33例活动期JIA患儿（病例组，其中全身型组20例，关节型组13例）；健康对照组20名。Fieoll法分离PBMCs，提取和纯化miRNA，反转录为cDNA；通过Targetscan和RNA22共同预测靶基因，设计引物，miR-21、miR-19a以u6为内参，STAT3、SOCS3、IL-6、TNF-α mRNA以β肌动蛋白为内参，应用荧光定量PCR分别检测其组间表达，计算标准化后的2^-△△CT值表示miRNA的相对表达含量，非参数检验统计2组数据2^-△△CT的差异。结果病例组与对照组miR-21表达水平低于对照组，差异有统计学意义（Z=2．11，P=0．036）；其中，对照组miR-21相对表达量为全身型组的7．7（7～8．5）倍、关节型的6．49（6～7）倍，差异有统计学意义（Z=2．615，P=0．0149；Z=2．654，P=0．0291）；全身型组与关节型组间miR-21表达水平差异无统计学意义（Z=0．221，P=0．8271）。病例组与对照组miR-19a表达水平低于对照组，差异有统计学意义（Z=2．41，P=0．014）；其中，对照组miR-19a相对表达量为全身型组的11．3（10-12．1）倍、关节型的12．2（12～13．5）倍，差异有统计学意义（Z=2．334，P=0．0157；Z=2．414，P=0．0266）；全身型组与关节型组间miR-19a表达水平差异无统计学意义（Z=O．538，P=O．596）。软件预测显示与JAK／STAT通路相关的STAT3，SOCS3、TNF—α分别为miR．21、mill-19a的靶基因。荧光定量PCR示病例组（全身型组、关节型组）STAT3[6．24（2．81，7．54）与3．97（1．81，5．75），P=0．001，0．008j、TNF-α[3．03（2．07，3．80）与3．42（2．46，4．68），P=0．002，0．001]、IL-6[4．75（3．59，6．32）与3．52（2．31，7．51），P=0．006，0．036]、SOCS3p2．54（1．77，4．00）与3．57（1．95�
- 李洪伟陈挚曾华松
- 关键词：关节炎幼年型类风湿JAK/STAT
- 髓系来源抑制细胞在幼年特发性关节炎中的表达水平及临床意义
- 2017年
- 目的目前髓系来源抑制细胞（MDSC）在幼年特发性关节炎（JIA）中表达水平和功能还未被证实。本研究通过检测JIA外周血中MDSC的表达量，分析其与炎症细胞因子的相关性，为研究JIA中MDSC的生成和功能提供临床依据。方法JIA和对照组外周血中MDSC的表达量，信号转导与转录活化因子3（STAT3）、IL-17A mRNA的表达水平分别用流式细胞术和RT-qPCR检测；血浆中IL-1β、IL-6、IL-10和IL-17A细胞因子通过ELISA法测定，2组间比较和相关性分析分别采用Munn-Wwhntrey检验和Spearman分析法。结果与对照组比较，JIA外周血中MDSC的表达量升高[（6.2±4.2）%与（1.2±1.6）%，Z=-5.258，P〈0.01]，血浆中细胞因子IL-1β[（175±306）pg/ml与（66±29）pg/ml，Z=-2.246，P=0.034]、IL-6[（86.6±257.2）pg/ml与（14.0±2.6）pg/ml，Z=-3.123，P=0.002]、IL-10[（44±36）pg/ml与（24±6）pg/ml，Z=-2.166，P=0.03]，IL-17A[（9.1±17.6）pg/ml与（2.7±0.4）pg/ml，Z=-3.965，P〈0.01）]水平升高，差异具有统计学意义；然而STAT3 mRNA的水平变化差异无统计学意义（P〉0.05）。经Spearman相关性分析显示，JIA中MDSC的数量与疾病活动（DAS28评分、ESR）指标呈正相关（r=0.447，P=0.037；r=0.456，P=0.033）；与STAT3 mRNA的表达水平呈负相关（r=-0.522，P=0.041）；与细胞因子IL-1β、IL-10表达水平呈正相关（r=0.496，P=0.044；r=0.498，P=0.035）；然而与T/B/NK绝对计数和炎症因子IL-6、IL-17A的表达水平无相关性（P〉0.05）。结论JIA中MDSC的数量升高且与疾病严重程度有关，其表达量可作为JIA炎症反应活动的临床指标之一，然而关于其在JIA中的功能需要进一步的研究。
- 程苏云陈挚李洪伟曾华松
- 关键词：髓系来源抑制细胞幼年特发性关节炎
- 胶原诱导关节炎模型中髓系来源抑制细胞通过白细胞介素-1β促进Th17细胞分化的作用被引量：8
- 2018年
- 目的通过胶原诱导关节炎模型探讨MDSCs对Th17细胞分化的作用及可能的机制,为阐明自身免疫性关节炎发病机制和寻找新的治疗靶点提供研究依据。方法 SPF级雄性DBA1/J小鼠20只随机分为胶原诱导关节炎(CIA)组和正常对照组,每组10只。采用CIA法制备自身免疫性关节炎小鼠模型。收集各组小鼠脾脏中骨髓来源抑制细胞(MDSCs)和Th17细胞的频率,分别采用流式细胞术和ELISA法测定小鼠血浆中炎性因子白细胞介素(IL)-β、IL-17及抑炎因子IL-10水平,采用实时荧光定量PCR技术测定细胞中Th17分化相关因子STAT3 mRNA、视黄酸相关孤儿受体(ROR)αmRNA、RORγt mRNA相对表达量。采用在Th17细胞分化培养条件下[添加IL-6+转化生长因子β(TGF-β)] MDSCs与小鼠幼稚CD4+T细胞共培养评估CIA小鼠中MDSCs对Th17细胞分化的影响,在培养过程中采用IL-1β中和抗体(IL-1βm Ab)和拮抗剂(IL-1ra)阻断IL-1β信号的方法以观察MDSCs对Th17细胞分化影响。结果与正常对照组小鼠比较,CIA组小鼠MDSCs比例明显升高[(20. 1±2. 6)%vs.(2. 6±1. 7)%],血浆炎症因子IL-17水平明显升高[(1. 3±0. 2)%vs.(0. 3±0. 1)%], CIA组血浆IL-β水平明显升高,抑炎因子IL-10水平明显降低,RORγtmRNA相对表达量明显增加,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。CIA组小鼠MDSCs比例及Th17细胞比例变化呈明显正相关。CIA小鼠中MDSCs抑制CD4+T细胞增生并减少细胞分泌的γ干扰素(IFN-γ),但体外MDSCs和CD4+T细胞共培养结果显示MDSCs促进T17细胞分化,且使细胞上清液中IL-17A质量浓度升高,STAT3和RORγtmRNA相对表达量上调,培养液中IL-1β质量浓度升高。阻断IL-1β信号可以减少MDSCs对Th17细胞分化的作用。结论自身免疫性关节炎小鼠MDSCs具有促炎症反应的作用,MDSCs依靠IL-1β上调RORγt的作用而促进Th17细胞分化,这可能是自身免疫性关节炎发病过程中的一个关键因素。
- 程苏云陈香元李洪伟谢颖李丰曾华松
- 关键词：髓系来源抑制细胞胶原诱导关节炎白细胞介素-1Β
- MiRNA调控JAK/STAT信号通路在幼年特发性关节炎发病中的作用及机制研究
- 1.背景 幼年特发性关节炎是儿童时期常见的慢性结缔组织疾病以慢性关节滑膜炎为主要特征,可伴有全身多器官功能损害是造成小儿致残和失明的重要原因。JIA的起病多较隐匿，目前诊断主要依靠临床和影像学表现，缺乏特异和敏感的生物...
- 李洪伟
- 关键词：幼年特发性关节炎小分子RNA白介素-6信号通路
