田迪
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中南民族大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 水稻细胞色素P450基因家族成员CYP81A6基因RNAi载体构建被引量：1
- 2016年
- 水稻P450基因家族成员CYP81A6参与稻瘟病抗性反应,为了深入研究该基因的功能,本研究利用3次克隆的策略构建了该基因的RNAi载体。首先设计带有酶切位点的基因特异性引物,以c DNA为模板扩增3'非翻译区的特异片断,将目的产物连接到T载体上,经菌落PCR和酶切鉴定后进行测序。测序结果表示,目的片断已正确克隆到T载体上。然后利用双酶切通过2次亚克隆将目的片断以反向重复克隆到RNAi载体ds1301,通过分子检测表明,CYP81A6的RNAi载体构建成功,有助于后续的基因功能和作用机理的研究。
- 田迪刘早利陈亚红王春台刘新琼
- 关键词：水稻RNA干涉基因克隆
- SLC2A6基因敲减诱导A549肺癌细胞G2/M期阻滞研究
- 2020年
- SLC2A6是促进性糖转运蛋白家族中的一员,它编码GLUT6蛋白。SLC2A6基因的表达在许多癌症中都有上调,但在正常组织中没有得到广泛表达。为了阐明SLC2A6控制癌细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制,利用CRISPR/Cas9技术筛选了两株敲减SLC2A6基因的肺腺癌A549细胞系,以阐明SLC2A6在生物学过程中的影响。与野生型A549细胞相比,KD1和KD2细胞中SLC2A6的蛋白水平的表达分别下降74%和83%,RNA水平的表达分别下降70.6%±2.0%和76.9%±4.1%。MTT实验的结果表明KD细胞增殖速度较慢,第5天的细胞数目的改变倍数由WT细胞的22.1±1.0下降到KD1细胞的13.5±0.9和KD2细胞的12.2±1.0(P<0.001)。流式细胞术细胞周期分析表明,SLC2A6基因敲减(KD)细胞发生了G2/M期阻滞。G2期细胞占比由A549野生型(WT)细胞的16.0%±1.0%升高到KD1细胞的23.0%±1.1%或KD2细胞的27.4%±0.4%(P<0.05)。细胞周期调节因子的mRNA表达的结果表明,G2/M阻滞与APC、Rad9a、CDK1、cdc25和p21 Waf1/Cip1的表达调控有关,揭示了SLC2A6在调控癌细胞生长方面的新作用,这表明SLC2A6可能是一个可行的抗癌药物靶点。
- 田迪陈春发刘佳黄钊赵平
- 关键词：A549细胞细胞增殖细胞周期
- 槐属二氢黄酮G促进L6细胞内GLUT4的表达和转运
- 2019年
- 利用细胞葡萄糖摄取检测试剂盒检测苦参中槐属二氢黄酮G(Sophoraflavanone G,SFG)对L6细胞葡萄糖摄取的影响,发现SFG能够增加大鼠成肌细胞(L6)的葡萄糖摄取;之后,使用Western blot检测发现SFG对L6细胞内GLUT4的表达有显著的促进作用;同时.在可稳定表达IRAP-mOrange荧光蛋目的L6细胞内,使用激光共聚焦显微镜监测SFG作用下葡萄糖转位蛋白4(glucose transporter 4.GLUT4)的转位,发现SFG对GLUT4的转位有显著的促进作用,而且SFG对GLUT4转位的促进呈浓度依赖性;另外,免疫荧光实验结果也显示SFG增强L6细胞中GLUT4与细胞膜的融合.这些结果显示利用SFG处理L6细胞后丄6细胞内GLUT4的表达、转运及与细胞膜的融合继而促进葡萄糖的摄取显著增强,说明SFG可能具备开发成一种新的降血糖药物的潜力.
- 宋冠军田迪赵平杨新洲
