张凌男
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 冻干保护剂中明胶浓度对布病疫苗活菌率的影响被引量：2
- 2016年
- 目的研究冻干保护剂中明胶浓度对布鲁杆菌活疫苗活菌率的影响,为布病疫苗保护剂中最佳明胶浓度的确定提供理论依据。方法将布鲁杆菌活疫苗接种到代肝琼脂培养基,转种,扩大培养,用含明胶浓度分别为0%、0.25%、0.5%、1%的4种保护剂收获。经浓度测定,调配浓度,冷冻干燥,封口等工序,制备1 000亿/m L和5亿/m L两种浓度的布鲁杆菌活疫苗,测定冻干后布病疫苗的活菌数。4℃保存样品冻干封口后2 d、2周、1个月、3个月测定活菌数。37℃保存样品冻干封口后2周,1个月测定活菌数。结果冻干后2 d含不同明胶浓度的1000亿/ml疫苗活菌率水平较接近,但冻干后3个月,含1.0%明胶保护剂疫苗活菌率降低比例明显高于其他明胶含量的疫苗。5亿/ml的低浓度疫苗,随着明胶浓度增高,其活菌率降低幅度明显增加,冻干后2 d不含明胶保护剂疫苗活菌率为65.24%,而含1.0%明胶保护剂疫苗活菌率仅为13.34%。含1.0%明胶保护剂疫苗稳定性也较差,冻干后4℃保存3个月的疫苗活菌率降低比例为60.94%,冻干后37℃保存2周的疫苗活菌率降低比例为78.41%。结论冻干保护剂中明胶的浓度愈高,布病疫苗的活菌率愈低,且稳定性越差。
- 张凌男陈成尤明强李天柱李恪梅王国治魏东董巧香
- 关键词：保护剂
- 布氏菌活疫苗滴鼻与皮下接种的免疫效果的比较
- 2016年
- 目的将布氏减毒活疫苗通过滴鼻和皮下注射两种方式免疫小鼠,比较两种方式的免疫效果。方法采用两种方法免疫动物,免疫4周后分离血清、脾脏淋巴细胞及制备肺泡灌洗液。ELISA法检测免疫动物血清中总IgG抗体;ELISA法检测免疫动物肺泡灌洗液中总IgG、IgA抗体;ELISPOT法检测分泌IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目,以及用ELISA方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌细胞因子水平;流式细胞术对T细胞亚群进行分类;用羊布氏菌弱毒株M5通过滴鼻和皮下注射两种方式攻击免疫动物,通过脾脏布氏菌计数评价并比较两种免疫方法的保护效果。结果 ELISA、ELISPOT和T淋巴细胞亚群分类结果显示,两种免疫途径均能诱导体液免疫、细胞免疫应答,两者间无显著差异。BALB/c小鼠滴鼻攻击试验结果显示滴鼻免疫组和皮下免疫组脾脏中布氏菌数量的对数值均为0,阴性组脾脏中布氏菌数量的对数值为6.24±0.07;皮下攻击试验显示滴鼻免疫组脾脏中布氏菌数量的对数值为1.69±0.07,皮下免疫组为3.03±0.03,阴性组为5.29±0.06。结论两种免疫途径均能诱导体液免疫、细胞免疫应答,滴鼻免疫组的免疫保护作用显著优于皮下注射组,提示滴鼻免疫是一种高效的免疫途径。
- 张凌男陈成李恪梅王国治魏东董巧香
- 关键词：细胞免疫接种
- 布氏菌活疫苗滴鼻免疫小鼠的免疫学评价被引量：1
- 2016年
- 目的评价布氏菌活疫苗滴鼻免疫小鼠后黏膜、体液及细胞免疫的效果。方法将60只小鼠随机分为低剂量组(5×107个/只)、高剂量组(3×108个/只)和阴性对照组(生理盐水),均于小鼠清醒状态下进行滴鼻免疫布氏菌活疫苗,剂量为10μl/只(5μl/鼻孔)。免疫30 d后,分离血清,制备脾脏淋巴细胞及肺泡灌洗液。间接ELISA法检测免疫小鼠血清中Ig G抗体效价、肺泡灌洗液中Ig G、Ig A抗体效价及体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFNγ、IL-4水平;ELISPOT法检测分泌IFNγ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目;流式细胞术检测T细胞亚群分类。用羊布氏菌弱毒株M5经皮下和滴鼻两种途径攻击免疫小鼠,通过脾脏细菌计数评价布氏菌活疫苗的免疫保护作用。结果低剂量组和高剂量组小鼠血清中Ig G抗体效价及小鼠肺泡灌洗液中的Ig G、Ig A差异无统计学意义(P>0.05);低剂量组和高剂量组小鼠在Br-PPD抗原和灭活菌体抗原刺激下,分泌IFNγ的脾脏淋巴细胞数、体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFNγ的水平及脾淋巴细胞中CD4^+IFNγ^+细胞比例均明显高于阴性对照组(P<0.05);攻毒试验结果表明,布氏菌活疫苗具有良好的保护力。结论布氏菌活疫苗经滴鼻免疫小鼠后可获得良好的免疫效果和保护力。
- 张凌男魏东陈成李恪梅王国治董巧香
- 关键词：黏膜免疫体液免疫细胞免疫
