吴大洲
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：温州市科技局资助项目浙江省公益性技术应用研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 儿童急性阑尾炎临床诊治体会和病原学分析被引量：4
- 2021年
- 目的分析儿童急性阑尾炎的临床表现、辅助检查及病原学结果,并总结临床诊治体会。方法回顾性分析2019年2-12月杭州市儿童医院收治的阑尾炎患儿112例为研究对象。依据急性阑尾炎病理类型分为单纯性(11例)、化脓性(37例)及坏疽性(64例)3组,并对各组患儿血清学指标、影像学指标、病程、细菌培养及药敏试验等进行分析比较。结果临床症状中,呕吐、纳差等消化系统表现者占80.36%(90/112),发热表现者占66.07%(74/112);体格检查中,右下腹压痛者占83.93%,脐周压痛者占7.14%,全腹压痛者占9.82%。3种病理类型患儿白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)及C-反应蛋白水平(CRP)等血清学指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。腹部B超阳性结果者占83.04%,其中腹腔炎症者占75.89%、腹腔积液者占3.57%及管状回声者占3.57%。3种病理类型患儿病程比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后合并不良反应者占33.04%,3种病理类型患儿的延续性感染发病率[3.33%(1/33)、9.09%(3/33)及87.88%(29/33)]比较,差异有统计学意义(χ^(2)=13.789,P<0.05)。90例患儿培养病原菌阳性,共培育出菌株120株,其中G-菌者占81.67%,G+菌者占18.33%。G-菌中大肠埃希菌、铜绿假单胞菌各占70.41%、23.47%。美罗培南、亚胺培南对G-菌和G+菌均存在较高敏感性,呋布西林、替卡西林、头孢哌酮及头孢吡肟对G-菌存在较高敏感性。二联疗法的有效率为97.32%,三联疗法的有效率为99.11%。结论临床诊治过程中应将血清学指标和有效性指标作为辅助诊断参考。当确诊急性阑尾炎后,应尽早评估手术指征并行手术纠治,术后依据药敏试验结果和临床规范制定并调节抗菌治疗方案。重点关注致病菌耐药性的变化情况,确保抗生素使用的针对性和规范性。
- 杨泽斌冯召广吴大洲许晓强
- 关键词：儿童急性阑尾炎病原学分析诊治体会
- 慢病毒介导的稳定表达let-7a的睾丸卵黄囊瘤细胞株的建立
- 2018年
- 目的构建microRNAlet-7a重组慢病毒表达载体,建立稳定表达let-7a的睾丸卵黄囊瘤细胞株(TYST-1),并探索let-7a过表达后对睾丸卵黄囊瘤(TYST)细胞增殖的影响。方法根据miRBase数据库let-7a的序列,设计合适的引物序列,利用聚合酶链反应(PCR)钓取目的基因片段,经过扩增、酶切后,与慢病毒载体GV309连接。转化DH5α感受态细胞,阳性克隆进行PCR及测序鉴定。293T细胞中包装慢病毒,利用荧光法测定病毒滴度。将构建好的let-7a慢病毒载体感染睾丸卵黄囊瘤(TYST)细胞,经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株,建立稳定表达let-7a的TYST-1。用Quantitative real-time PCR(qRT-PCR)检测let-7a表达水平,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测let-7a过表达后对TYST细胞增殖的影响。结果构建的let-7a慢病毒载体经质粒酶切和测序鉴定正确;let-7a慢病毒感染组细胞内let-7a水平比阴性病毒对照组和空白对照组分别提高3.O倍和3.8倍(P
- 吴大洲周欢栋沈德雷郑娜李仲荣陈肖鸣张浩川
- 关键词：微RNAS内胚层窦瘤慢病毒载体
- 青春期前睾丸肿瘤48例临床分析
- 目的：探讨青春期前睾丸肿瘤的发病特征,为睾丸肿瘤的诊断和治疗提供帮助.方法：回顾性分析温州医科大学附属育英儿童医院2003-2013年收治的48例青春期前睾丸肿瘤患儿的临床资料.结果：48例患儿中,确诊年龄4月～10岁,...
- 吴大洲
- 关键词：生殖细胞肿瘤畸胎瘤卵黄囊瘤
- MicroRNA let-7a对睾丸卵黄囊瘤细胞增殖和凋亡的影响
- 目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长度为203个核苷酸的内源性非编码小RNA,其序列在物种间高度保守。MicroRNA参与调节细胞生长、发育和凋亡等过程,其失调与人类很多疾病相关,包括肿瘤。Let-7...
- 吴大洲张浩川陈肖鸣
- 文献传递
- 雷帕霉素对睾丸卵黄囊瘤细胞生长及凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的研究雷帕霉素对睾丸卵黄囊瘤细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法用不同浓度的雷帕霉素(1、10、50、100nmol/L)处理睾丸卵黄囊瘤细胞,设空白组和阴性对照组。采用CCK-8法测定不同浓度雷帕霉素对细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测不同浓度雷帕霉素对细胞周期及凋亡的影响。结果雷帕霉素可以抑制睾丸卵黄囊瘤细胞生长,呈浓度依赖性和时间依赖性,除1nmol/L浓度组外,其余浓度组各时间点的细胞生长抑制率与阴性对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。雷帕霉素可以诱导睾丸卵黄囊瘤细胞凋亡,使细胞停留在G0/G1期,除1nmol/L浓度组外,其余浓度组G0/G1期细胞比例及细胞凋亡率显著高于阴性对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论雷帕霉素能够抑制睾丸卵黄囊瘤细胞的生长,促进细胞凋亡。
- 林孝坤王永飚赵一鸣姚贤明蔡祖仁吴大洲
- 关键词：卵黄囊瘤雷帕霉素细胞生长细胞凋亡
- 红花对大鼠单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸生精功能的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨红花对青春期前大鼠单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织在青春期前后的组织学改变以及精子生成情况。方法:42只健康雄性青春期前SD大鼠随机均分为假手术对照组(A组,n=14)、睾丸扭转复位组(B组,n=14)和睾丸扭转复位+红花组(C组,n=14)。按Turner法建立左侧睾丸扭转模型,三组大鼠分别于术后1周及8周时处死7只,即刻采集各组大鼠右侧睾丸标本行组织病理学观察,术后8周时同时取附睾尾部行精子计数及活动率测定。结果与B组相比,术后1周时C组平均曲细精管直径(MSTD)增大,睾丸结构评分降低;术后8周时C组生精上皮层数增多,平均曲细精管直径增大,睾丸组织结构评分降低,同时附睾精子密度与活动率明显升高,两组间有显著性差异(P<0.05)。结论红花能够减轻青春期前大鼠单侧睾丸扭转复位后对侧睾丸组织损伤,使附睾精子生成显著增多。
- 林孝坤吴大洲姚贤明武鹏沈德雷冯召广秦乐陈肖鸣
- 关键词：睾丸扭转精子生成青春期前
- TGFβR3基因3’UTR双荧光素酶报告载体的构建及其与miR-let-7a靶向关系的验证被引量：1
- 2017年
- 目的:构建Ⅲ型转化生长因子β受体(TGFβR3)基因3’非编码区(3’UTR)双荧光素酶报告载体,并分析其与miR-let-7a的靶向关系。方法:根据micro RNA靶基因预测软件targetscan获取miR-let-7a与TGFβR3基因3’UTR潜在的互补结合位点;PCR扩增出TGFβR3基因3’UTR序列并克隆至pGEM-T载体,定点突变潜在互补结合位点后双酶切pGEM-T载体获取目的片段并插入至双荧光素酶报告载体获得野生型和突变型重组双荧光素酶报告载体,测序鉴定;将2种载体分别与miR-let-7a mimics或miR-let-7a NC共同转染HEK293T细胞,收集细胞后通过双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性。结果:经测序鉴定成功构建野生型和突变型重组荧光素酶报告载体。双荧光素酶报告系统检测显示,共转染miR-let-7a mimics和野生型双荧光素酶报告载体的荧光素酶活性比miR-let-7a NC组明显降低(P<0.05),而共转染突变型双荧光素酶报告载体后其荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建TGFβR3基因3’UTR双荧光素酶报告载体,并证实TGFβR3基因是新发现的miR-let-7a直接靶向调控基因。
- 周欢栋顾睿吴大洲陈肖鸣
- MicroRNA let-7a对睾丸卵黄囊瘤细胞增殖和凋亡的影响
- 背景: 微小RNA(microRNA, miRNA)是一类长度为20～23个核苷酸的内源性非编码小RNA，其序列在物种间高度保守。MicroRNA参与调节细胞生长、发育和凋亡等过程，其失调与人类很多疾病相关，包括肿瘤。...
- 吴大洲
- 关键词：睾丸卵黄囊瘤细胞增殖微小核糖核酸
- 神经生长因子改善糖尿病大鼠随意皮瓣缺血坏死的机制
- 2024年
- 目的:探讨神经生长因子(NGF)改善糖尿病大鼠随意皮瓣缺血坏死的分子机制。方法:①建立Wistar大鼠I型糖尿病模型,将这些大鼠随机分为模型组(DM组)和实验组(DM+NGF组)两组,设计9 cm×3 cm的改良McFarlane皮瓣并进行皮瓣移植,观察两组皮瓣的存活情况并统计存活面积。采集大鼠皮瓣组织,利用HE染色和免疫组化染色研究皮瓣存活与血管生成的关系,通过Western blot实验研究两组CD31、VEGF血管指标蛋白表达差异以及AGE-RAGE/MAPK-ERK1/2信号通路的变化。②利用建立的高糖人脐静脉内皮细胞(HUVEC)模型,将细胞实验分为细胞模型组(DM组)和细胞实验组(DM+NGF)组两组,通过CCK-8增殖实验、MCM2+细胞免疫荧光实验、细胞划痕实验、Transwell实验和血管成管实验,分析在高糖环境下NGF对HUVEC细胞的增殖、迁移和血管形成的影响。利用STRING数据库探讨NGF对VEGF、SDF1α、HIF-1α、PDGFA、TGF-β1等常见血管生成相关因子的互作情况以及功能富极化分析;通过RT-qPCR和Western blot验证NGF对其表达的影响。通过RNA-seq测序和Western blot分析NGF对HUVEC的影响机制。结果:动物实验方面:DM+NGF组比DM组皮瓣存活面积多(P<0.01);CD31免疫组化染色发现DM+NGF组CD31阳性微血管密度比DM组高(P<0.01),且DM+NGF组CD31和VEGF表达均较DM组高(P<0.05);而皮瓣组织AGE-RAGE/MAPK-ERK1/2信号通路的RAGE下降(P<0.05),而p-ERK1/2上调(P<0.05)。细胞实验方面:成功建立了25 mmol/L高糖模型,100 ng/mL NGF能促进HUVEC的增殖(P<0.01);与DM组比,DM+NGF组的细胞迁移和细胞血管生成能力明显加强(P<0.01),且DM+NGF组的VEGF、PDGFA、HIF-1α、Arg-1和bFGF相对表达量更高(P<0.05),而KEGG和GO功能富集化富集结果主要与血管形成和AGE-RAGE/MAPK-ERK1/2信号通路途径等相关。结论:NGF可能通过影响AGE-RAGE/MAPK-ERK1/2信号通路促进糖尿病大鼠内皮细胞血管生成,从而改善随意皮瓣的缺血坏死。
- 王晓武朱仙懂王永强吴志炫温知楷吴大洲陈吉彩
- 关键词：缺血皮瓣转录组学神经生长因子
