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丁志山
作品数:
1
被引量:6
H指数:1
供职机构:
实验动物中心
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发文基金:
浙江省自然科学基金
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
方永明
浙江大学医学院附属第二医院
耿礼义
浙江大学医学院附属第二医院
陈民利
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赵可佳
浙江大学医学院附属邵逸夫医院
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浙江大学医学院附属邵逸夫医院
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2004
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表达人乳头瘤病毒6b和11型E6/E7基因的小鼠肿瘤细胞株的建立
被引量:6
2004年
目的构建含有人乳头瘤病毒(HPV)6b和11型E6/E7基因的表达质粒和建立这些基因的转染细胞株。方法分别将HPV6bE6、HPV6bE7、HPV11E6和HPV11E7克隆于含绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.1,经脂质体介导转染B16细胞,以G418筛选阳性克隆,荧光显微镜观察,RT-PCR鉴定mRNA转录。结果通过酶切鉴定和基因测序证实,构建质粒中目的基因片段序列完全正确。转染后荧光显微镜下可观测到B16细胞发出绿色荧光。以G418筛选的抗性细胞克隆提取RNA并经RT-PCR扩增出与目的基因大小一致的基因片段。结论建立的小鼠肿瘤细胞B16表达HPV6bE6、HPV6bE7、HPV11E6和HPV11E7基因。提示转染的细胞株可移植于小鼠,利于体内研究这些基因的生物学作用和免疫学机制。
赵可佳
程浩
陈民利
丁志山
耿礼义
方永明
关键词:
人乳头瘤病毒11型
E6基因
E7基因
小鼠
基因转染
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