江晓玲
- 作品数:11 被引量:68H指数:4
- 供职机构:中国人民解放军第一军医大学热带军队卫生学系更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 霍乱肠毒素B亚单位在转基因番茄果实中特异性表达及其免疫原性的研究被引量:10
- 2004年
- 利用番茄果实特异性启动子-E8启动子,将霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)用根癌农杆菌浸润法转入番茄植株,并使其在果实中特异表达,然后对试验小鼠进行口服免疫,研究转基因番茄果实的免疫原性。结果表明,ctb基因在14株番茄植物基因组中被证实有整合,并在其中2株的番茄果实中有特异性表达,最高表达量分别为455和385 ng·g-1FW,口服免疫后的小鼠血液和肠道粘膜中均检测到抗CTB抗体。表明获得了在番茄果实中特异、高效表达霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)的植物口服疫苗候选植株。
- 江晓玲贺竹梅陈清彭志强祁瑜俞守义
- 关键词:霍乱肠毒素B亚单位转基因番茄果实特异性表达免疫原性
- 荧光定量聚合酶链式反应检测恶性疟原虫的研究被引量:1
- 2001年
- 目的 评价荧光定量聚合酶链式反应 (FQ- PCR)检测恶性疟原虫的效果。 方法 以不同浓度梯度标准对照作为参照 ,对 12 7份疟区血样进行检测 ,并将所得结果与镜检、常规 PCR法比较。 结果 恶性疟原虫镜检、常规 PCR、FQ- PCR检出的阳性率分别为 33.1%、38.5 %和 40 .9% ;定量检测结果与镜检阳性率呈直线相关 ,相关系数为 0 .96 1。 结论 FQ- PCR检测方法有较高的灵敏度和特异度 。
- 江晓玲李明徐伟文毕惠祥程钢
- 关键词:恶性疟原虫荧光定量聚合酶链式反应
- 番茄子叶外植体转化系统的优化被引量:14
- 2004年
- 目的 :对番茄子叶外植体的转化进行优化 ,为进行转基因番茄的研究奠定基础。方法 :通过正交设计实验 ,以子叶外植体的存活天数为观察指标 ,分别对农杆菌稀释浓度、浸染时间和转化方式等条件进行优化。结果 :在子叶预培养 2d、活化农杆菌稀释倍数约 30倍、侵染时间为 1 0min、共培养时间为 2d的情况下 ,子叶存活时间最长 ,抗性芽产生频率达 2 5 %。结论 :获得了高效的番茄子叶外植体转化系统 。
- 江晓玲俞守义贺竹梅彭志强祁瑜
- 关键词:番茄子叶外植体农杆菌
- 疟原虫感染中CTL作用的现场研究——在疟疾疫苗研制中的应用
- 2001年
- 疟原虫感染中CTL介导的免疫受多种因素的影响,如虫种变异、宿主基因、其他感染和传播方式等。这些影响因素通过单个或相互联合,已在动物实验中得到了证实。对于自然感染患者,还存在有很复杂的“宿主-寄生虫-环境”的相互作用,弄清这种相互作用对于人类CTL介导的疫苗研究相当关键。
- 江晓玲
- 关键词:疟原虫感染细胞毒性淋巴细胞
- 恶性疟原虫荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立被引量:27
- 2000年
- 目的 建立恶性疟原虫荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测方法 ,为快速、准确地定量检测恶性疟原虫奠定基础。方法 根据恶性疟原虫SSUrRNA基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的恶性疟原虫SSUrRNA片段克隆入载体 ,重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定和样品检测。结果 应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 998。检测恶性疟血样 2 6份、间日疟血样 2 0份及混合感染血样 5份均阳性 ;正常血样 36份均阴性。结论 建立了检测恶性疟原虫的荧光定量PCR方法 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景和研究价值。
- 江晓玲李明徐伟文毕惠祥程钢李虎诸欣平
- 关键词:恶性疟原虫聚合酶链反应
- 卡介苗D2株分泌蛋白基因植物表达载体的构建被引量:3
- 2004年
- 目的 克隆卡介苗 (BCG)D2株 32 -kDa分泌蛋白基因 (fbpA基因 ) ,构建重组植物表达载体 pBI12 1-fbpA ,为研制转基因植物口服疫苗奠定基础。 方法 采用PCR法从BCGD2株基因组DNA中分离fbpA基因 ,构建重组克隆载体 pUCm -T -fbpA ,经过单菌落PCR法、BamHⅠ、SacⅠ和HindⅢ单 /双酶切、DNA序列分析鉴定后 ,将fb pA基因亚克隆入植物表达载体 pBI 12 1,得到重组载体pBI 12 1-fbpA ,并转化根癌农杆菌株EHA10 5 ,用PCR法对其进行鉴定。结果 重组载体 pUCm -T -fbpA测序后证实fbpA基因由 10 4 1bp组成 ,包括 1个 10 14bp的开放阅读框。DNA序列上游由编码一段信号肽的 12 9bp组成 ,并对 32 -kDa蛋白的分泌起决定作用。相应的编码成熟蛋白的序列由 885个碱基组成。fbpA基因与来源于BCG1173P2株的同一基因序列完全一致。此外 ,构建的重组植物表达载体 pBI12 1-fbpA成功转入根癌农杆菌株EHA10 5。结论 编码BCGD2株 32 -kDa分泌蛋白的fbpA基因分离成功 ,DNA序列分析证实fbpA基因在分枝杆菌中高度保守 ,为进一步深入分析fbpA基因以及研制抗结核病转基因植物疫苗奠定了基础。
- 刘凤娟俞守义聂军陈清朱丽芮勇宇李建栋江晓玲吴敏李志锋
- 关键词:卡介苗克隆DNA序列分析植物表达载体
- 转基因植物口服疫苗的安全性问题所引发的思考被引量:2
- 2004年
- 江晓玲贺竹梅俞守义彭志强
- 关键词:安全性蔬菜果实
- 卡介苗(BCG)D2株分泌型抗原85A基因的克隆与序列分析(英文)被引量:1
- 2004年
- 目的 分离BCGD2株分泌型抗原 85A基因并测定DNA序列 ,为研制抗结核病新型疫苗奠定基础。方法 PCR法从BCGD2株基因组DNA中分离Ag85A基因 ,PCR产物连接入 pUCm -T载体 ,重组克隆用单菌落PCR法、BamHⅠ和SacⅠ双酶切以及DNA测序进行鉴定。结果 分泌型Ag85A基因经过分离和测序后发现 ,它有 10 4 1bp组成 ,与LukDeWit等人测定的来自于BCG1173P2株的同一基因的DNA序列是一致的 ,表明Ag85A基因在分枝杆菌中是高度保守的。 结论 BCGD2株分泌型抗原 85A基因的成功克隆与序列分析将会促进对Ag85A基因深入的研究 。
- 刘凤娟陈清聂军李建栋江晓玲吴敏朱利俞守义
- 关键词:BCG克隆DNA测序
- 间日疟原虫荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立被引量:2
- 2002年
- 目的 建立间日疟原虫荧光定量聚合酶链式反应 (FQ -PCR)检测方法 ,为快速、准确定量检测间日疟原虫奠定基础。方法 根据间日疟原虫SSURNA基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针 ,将PCR扩增的间日疟原虫SSURNA基因片段克隆入载体 ,对重组质粒进行筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的判定和样品检测。结果 应用重组质粒制作的定量曲线 ,循环阈值与模板浓度具有良好的线形关系 ,12 7份疟区血样和 30份正常血样的检测 ,显示此法有较高的灵敏度和特异度 ,定量检测结果与镜检感染率呈直线相关 ,相关系数为 0 95 9。
- 江晓玲李明徐伟文毕惠祥程钢
- 关键词:荧光定量PCR间日疟原虫聚合酶链反应疟疾
- 聚合酶链反应检测疟疾的研究被引量:10
- 2001年
- 目的 建立能鉴别诊断恶性疟原虫间和日疟原虫的PCR检测方法。方法 根据红内期疟原虫SSUrRNA基因序列,设计合成两对引物,采用PCR技术,检测89份门诊“四热”病人血样,并与镜检法进行比较研究。结果 恶性疟原虫血样能扩增出205hp的特异带.间日疟原虫血样能扩增出120bp的特异带,PCR检测的阳性率为74.16%,镜检法为68.54%,PCH法与镜检法的符合率为94.38%。结论PCR检测的敏感性和特异性均优于镜检法.
- 吴英松江晓玲李明毕惠祥李英杰
- 关键词:聚合酶链反应恶性疟原虫间日疟原虫疟疾