吕卫东
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国科学院深圳先进技术研究院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人OX40胞外区基因的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的制备抗人OX40单克隆抗体,为进一步研究OX40/OX40L通路以及针对该通路进行疾病干预、疾病治疗和药物筛选奠定基础。方法 PCR扩增人OX40胞外区的基因序列,将其构建到原核表达载体pET-32a(+)中,利用大肠杆菌表达系统表达OX40胞外区蛋白,经Ni柱纯化后获得目的蛋白。以纯化的OX40胞外区蛋白为免疫原免疫小鼠,采用常规方法进行细胞融合,通过ELISA和多次克隆化培养,筛选出分泌特异性鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株;通过ELISA、Western blot和免疫荧光检测抗体的效价及特异性。结果成功构建人OX40原核表达质粒pET-32a(+)-OX40,并在BL21(DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定、Ni柱纯化、透析后获得OX40胞外区蛋白;以此纯化蛋白为免疫原,成功制备具有较强亲和力的单克隆抗体。结论克隆表达并纯化了人OX40蛋白,成功制备针对该蛋白的高亲和力单克隆抗体,为进一步研究OX40/OX40L的生物学功能奠定了实验基础。
- 吕卫东李俊鑫刘绿艳李欣崔璐璐万晓春
- 关键词：基因表达
- IL-17抗体对大鼠破骨细胞功能影响的体外研究被引量：7
- 2018年
- 目的体外研究IL-17抗体对大鼠破骨细胞功能的影响。方法分离并培养大鼠破骨细胞,体外检测IL-17抗体对大鼠破骨细胞功能的影响,利用Realtime-PCR、ELISA、Western-blot检测经IL-17刺激及IL-17抗体阻断后大鼠破骨细胞中cathepsin K、MMP9表达情况,所得数据经SPSS 13.0进行统计学分析。结果大鼠破骨细胞经IL-17刺激后,能够显著提高cathepsin K、MMP9的表达水平,经IL-17抗体阻断后cathepsin K、MMP9的水平均恢复到接近对照组水平。结论 IL-17通过上调cathepsin K、MMP9的表达量,从而增强破骨细胞降解骨基质的能力。
- 张国权范挽亭陈倩仪吕卫东赵琦黄盛兴
- 关键词：抗体白介素17骨质疏松
- miRNA在防治非小细胞肺癌中的研究进展被引量：5
- 2015年
- 微RNA(micro RNAs;mi RNA)是一类长度约为22核苷酸的非编码核苷酸,能在转录后水平抑制蛋白的翻译而调控靶向基因的表达。非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌比例的80%,确诊后一般为晚期,且具有早期确诊率低,治疗效果差,治疗后易复发,预后不良等特征。目前用于治疗NSCLC的方法主要是手术、放化疗、中医中药治疗以及生物免疫治疗,总体治疗效果不明显,死亡率高。近年来,大量研究表明mi RNA在癌症的发生发展、转移及复发中具有重要的作用,但目前尚未建立系统规范的使用mi RNA对NSCLC诊断、治疗、预后的标准化方案,临床实施难度大。本文就近几年来mi RNA在NSCLC诊断、治疗及预后功能上进行综述,期望有助于促进mi RNA在实际临床中发挥其应有的作用。
- 刘婕万晓春吕卫东李俊鑫赵琦
- 关键词：MICRORNA预后
- 人噬菌体抗体库的构建及人源性IL-17单链抗体的筛选
- 2016年
- 目的通过噬菌体展示技术构建人源单链抗体库,筛选抗IL-17的特异性抗体并鉴定。方法通过采集35位类风湿关节炎患者的外周血淋巴细胞,提取总RNA,逆转录合成c DNA,PCR扩增人H链和L链可变区抗体基因。利用SOE-PCR法将VH和VL片段拼接成Sc Fv片段并插入噬菌体载体p CANTAB5E中,构建人源噬菌体单链抗体库。通过固相化的抗原对抗体库进行3轮筛选后,挑取单克隆进行phage-ELISA鉴定,筛选与抗原具有较强结合性的噬菌体克隆。结果成功构建库容为3.5×10~8的噬菌体抗体库,从中筛选到5株阳性克隆,ELISA证实其对抗原IL-17具有较强的结合性及中和活性。结论成功构建了人源噬菌体单链抗体库,从中获得具有抗IL-17的人源Sc Fv抗体片段,为进一步的研究和应用提供实验基础。
- 钮敏红闫晓霏吕卫东万晓春
- 关键词：白细胞介素-17单链抗体类风湿关节炎
- 类风湿关节炎血清标本库的构建及意义
- 2015年
- 目的探讨类风湿关节炎血清标本库的创建及管理方法,合理利用标本资源,为临床及类风湿关节炎的防治研究提供平台。方法收集类风湿关节炎患者外周血标本,分离血清、血浆和血细胞,按照标本入库编号进行登记,-80℃低温冷冻保存;同时建立血清标本库的信息管理系统,以便于标本及临床资料数据的收集管理、查询及调用。结果已收集了类风湿关节炎患者不同分期的血清共326份,血浆261份,淋巴细胞213份。并对所收集标本的流行病学及临床资料整理后归档管理。结论初步建立了具有一定数量的类风湿关节炎血清标本库,为今后相关的类风湿关节炎研究提供服务平台。
- 钮敏红万晓春闫晓霏吕卫东
- 关键词：类风湿关节炎
