杨琨
- 作品数：21 被引量：114H指数：6
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- CIK细胞不同培养时间的生物学活性被引量：15
- 2013年
- 目的探讨CIK细胞培养时间与细胞毒活性的关系。方法抽取恶性肿瘤患者的外周血分离单个核细胞(PBMC),用细胞因子诱导培养CIK细胞,于培养第0、7、14、21、28、35、42天分别收取培养的CIK细胞。用流式细胞仪分析检测CIK细胞中CD3+、CD56+双阳性细胞的百分率及增值率,用MTT法测定其对肺癌细胞株A549杀伤活性。结果培养第21天细胞扩增倍数为(372±1.87)倍,培养第28天细胞扩增倍数为(410±6.52)倍,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);培养第35天CIK细胞扩增倍数为(414±5.16)倍,与培养第28天细胞扩增倍数比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。培养至第28天CIK细胞中CD3+、CD56+双阳性细胞的百分率为(35.6±2.30)%,达最高峰,其后逐渐降低。用MTT法检验不同培养时间的CIK细胞对肺癌细胞株A549的杀伤活性,当效靶比为10∶1时,培养21 d的CIK细胞杀瘤率是95%,达最高峰;当效靶比20∶1时培养21 d的CIK细胞杀瘤率已达100%;当效靶比40∶1时培养14 d的CIK细胞杀瘤率即可达到100%。结论培养时间的延长有利于增强CIK细胞的细胞毒活性,CIK细胞的最佳培养时间应为28 d左右。增加效应细胞的数量,会大大提升对肿瘤细胞的杀伤力。
- 杨琨赵艳敏高笑天张月李景圆董武荣阳荣根满易成建张剑刘晓华
- 关键词：CIK细胞细胞毒活性增殖率表型
- L-精氨酸对全血血小板膜GP2b/3a表达影响与临床检验学研究被引量：1
- 2016年
- 目的研究分析L-精氨酸对正常人血小板膜GP2b/3a表达的影响与临床意义。方法建立全血血小板膜GP2b/3a表达的流式细胞术(FCM)测定方法,观察L-精氨酸在静息和活化状态下对正常人血小板膜GP2b/3a表达的影响。结果 L-精氨酸对静息血小板膜GP2b/3a表达无明显影响;而显著抑制凝血酶、胶原活化的血小板膜GP2b/3a的上调表达,且该效应呈剂量和时间依赖性。结论 L-精氨酸可抑制血小板膜GP2b/3a的表达。
- 尚晓东刘晓华宋明慧崔乃凡杨琨
- 关键词：L-精氨酸流式细胞术
- 紫杉醇对人树突状细胞的生物活性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨常用化疗药物紫杉醇(TAX)对人树突状细胞(DC)生物活性的影响及作用机制,为化疗联合生物免疫治疗抗肿瘤提供理论基础。方法体外实验:分别在紫杉醇5 ng/mL(b组)、10 ng/mL(c组)、20 ng/mL(d组)、40 ng/mL(e组)的浓度下及不加紫杉醇的条件下(a组)培养DC细胞,检测各组DC细胞的存活率、细胞成熟标志物及细胞因子分泌量,探究紫杉醇对人树突状细胞生物活性的影响,同时通过乳酸脱氢酶释放法(LDH)测定与紫杉醇处理的树突细胞共培养的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对肺癌A549细胞株的杀伤作用,测定紫杉醇对树突细胞抗原呈递作用的影响。体内实验:采用人肺癌细胞株A549的肿瘤组织块,皮下接种于裸鼠腋下,建立裸鼠肺癌模型。2 d后将30只裸鼠随机分成5组,分别为A组(对照组):细胞株A549+盐水(NS);B组:细胞株A549+DC+CIK;C组:细胞株A549+CIK+TAX;D组:细胞株A549+TAX;E组:细胞株A549+TAX+DC+CIK。每3天检测1次肿瘤大小、裸鼠存活时间。结果体外实验:在共培养6 d的前提下,b、c组第6天存活率与第0天存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05),d、e组第6天存活率与第0天存活率比较,差异有高度统计学意义(P<0.01),e组存活率仅为17.5%。c组和e组CD86、CD40、MHCⅡ的表达以及IL-12的分泌与正常组相比有显著增加(P<0.05),d组除了CD86,其他检测指标较正常组差异均有统计学意义,b组中只有MHCⅡ较正常组差异有统计学意义,经10 ng/mL紫杉醇处理的细胞在效靶比5:1和10:1的情况下,杀伤效果明显高于未经紫杉醇处理的细胞。其中紫杉醇处理组的细胞在效靶比为10:1的情况下,杀伤活性已经到达(91.37±5.24)%。体内实验:B、C、D、E组的平均存活时间分别为33.0、34.0、31.8、41.8 d,明显高于对照A组(23.8 d)(P<0.05)。E组平均存活时间大于41.8 d,明显高于B、C、D组(P<0.01),其中E组中,45 d仍有3只存活,D组在前25 d体现出较好的治疗效果
- 杨琨董武荣阳赵艳敏高笑天汪明张月刘瑞雪
- 关键词：紫杉醇人树突状细胞生物活性肺癌
- 视黄酸通过降低心转录因子Tbx20的表达抑制早期心的形成被引量：1
- 2011年
- 目的：研究过量视黄酸抑制爪蟾早期心形成的机制。方法：用过量视黄酸培养发育到第14期的胚胎。4h后，胚胎日MEMPHA固定进行转录因子Tbx20的胚胎整体原位杂交。取发育第14期胚胎形成心的组织，并分别加入视黄酸和骨彦成蛋白进行培养。4h时后，用MEMPHA固定并进行Tbx20的胚胎整体原位杂交。结果：视黄酸降低Tbx20在早期心且织中的表达；在早期心组织中骨形成蛋白阻止了视黄酸对Tbx20表达的抑制作用。结论：过量视黄酸通过降低Tbx20的表达，抑制了爪蟾心的形成。
- 赵勇周影杨琨秦书俭张东生
- 关键词：发育视黄酸爪蟾胚胎
- 幽门螺杆菌感染患者胃氨的变化被引量：8
- 1997年
- 目的探讨由Ｈｐ产生的氨在Ｈｐ致病机理中的作用．方法对１６例伴有Ｈｐ感染的消化性溃疡及慢性活动性胃炎患者，应用抗菌素对症治疗４周．分别在治疗前后用尿素酶试剂药盒检查Ｈｐ感染情况，并用Ｎｅｓｌｅｒ′ｓ显色法测定治疗前后的胃液氨浓度．结果治疗后有８例患者Ｈｐ阴转，胃氨浓度由治疗前的３０５７±１９６５μｍｏｌ／Ｌ降至１７６９±９７８μｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜００１），同时胃粘膜病变减轻或治愈．结论氨是Ｈｐ致病的重要因素之一．动态测定胃氨浓度可以间接反映Ｈｐ的感染情况，并可以作为判定治疗效果的一项指标．
- 朱晓玲刘瑞雪李光杨琨唐少琴
- 关键词：幽门螺杆菌感染胃液代谢
- 软骨脱细胞基质支架材料的软骨组织工程实验研究被引量：17
- 2008年
- 目的应用软骨脱细胞基质作为支架材料,按照组织工程的原理再生软骨,为修复软骨缺损探索新的途径。方法取新西兰大耳白兔1只,体重2.4kg,按改良Courtman法对兔耳软骨行脱细胞处理后用于实验。选用纯种6月龄新西兰大耳白兔18只,雌雄不限,体重2.4～2.6kg。每只耳形成2处1cm×1cm软骨缺损,按修复方式不同随机分为3组,每组24处缺损。A组,软骨脱细胞基质加软骨膜;B组,软骨脱细胞基质;C组软骨膜,作为对照。术后每日观察兔耳修复区的大体变化,并分别于4、12周每组处死3只动物,于修复区切取标本,行HE染色、藏红花红-奥尔新蓝染色、Ⅱ型胶原基因探针原位杂交实验。结果术后4周内A、B组大体形态无明显改变;术后12周可见修复区轻度增厚,触摸时质地较正常软骨稍硬。C组术后2周,2只2处修复区形成痂皮,术后5周痂皮脱落形成穿孔。术后4周,A、B组HE染色可见软骨脱细胞基质周边有轻度的炎性细胞浸润,以淋巴细胞为主,未形成包囊,藏红花红-奥尔新蓝染色均阴性;C组软骨缺损处的软骨膜塌陷,无细胞增殖现象;各组修复区均未见Ⅱ型胶原基因探针原位杂交显色。术后12周,A组HE染色示部分软骨脱细胞基质内有新生细胞,细胞排列不规律,ECM嗜碱性增强,藏红花红-奥尔新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原基因原位杂交显色示新生细胞内均有大片棕黄色阳性染色区域;B组HE染色示软骨脱细胞基质无吸收现象,周边无包囊,炎性细胞消失,藏红花红-奥尔新蓝染色呈阴性,未见Ⅱ型胶原基因原位杂交显色;C组HE染色示近软骨断端处可见部分形成新生组织,藏红花红-奥尔新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原基因原位杂交显色可见棕黄色阳性染色细胞。结论脱细胞软骨可诱导软骨膜细胞向其中生长而重建软骨,软骨膜和脱细胞软骨复合移植是软骨组织工程的另一种选择。
- 张晨景士兵杨琨徐燕莉聂军王燕妮文晓泉高景恒
- 关键词：组织工程软骨软骨膜
- 侧柏酮对人γδT细胞功能的影响被引量：12
- 2014年
- 目的：探讨侧柏酮对人WT细胞功能的影响。方法：异戊烯焦磷酸／isopentenyl pyrosphate（IPP）法体外扩增人外周血γδT细胞。各浓度侧柏酮作用人γδT细胞48h，CCK-8法检测其增殖力，流式细胞术测其表型、细胞周期、细胞凋亡及表达CD107a，穿孔素（perforin），粒酶B（granzyme B）的情况。结果：300～600μmol·L^-1侧柏酮明显抑制人γδT细胞生长（P〈0．05）；0．03625—150μmol·L^-1侧柏酮明显促进其生长（P〈0．05），9．4μmol·L^-1时达增殖最高峰（37．03±0．52）％，且穿孔素表达率明显升高（39．94±1．04）％（P〈0．05），余与空白组相比无显著差异。结论：9．4μmol·L^-1侧柏酮明显促进人γδT细胞增殖并上调其穿孔素的表达。
- 李颖董武陈复兴刘军权周燏杨琨白枫
- 关键词：穿孔素
- 表皮生长因子和雌激素对肝脏DNA合成的影响初步研究被引量：2
- 2001年
- 目的 通过比较EGF ,EGF -雌激素以及雌激素对原代培养肝细胞DNA合成的影响 ,探讨用EGF治疗肝细胞损伤的可能性。方法 用大鼠获得单个肝细胞悬液 ,随机分成EGF组、雌激素组、EGF -雌激素组及对照组进行细胞培养 ,3天后测量每组Tdk掺入量。结果 EGF组及EGF -雌激素的3H -Tdk掺入量分别为对照组的 2 .1倍及 3.4倍 (P <0 .0 1) ,雌激素亦有轻度促进DNA合成作用 (P <0 .0 5 )。
- 杨琨黄晓梅姜雷李亚男罗颖
- 关键词：表皮生长因子雌激素肝细胞损伤
- 表皮生长因子对肝损害动物的保护作用被引量：2
- 2000年
- 本实验通过建立急性肝损害动物模型 ,探讨表皮生长因子 (EGF)和雌激素的协同作用。结果表明 ,单用EGF和雌激素能改善肝脏功能 ,促进病损肝细胞的修复 ,但其作用较弱 ,而EGF在雌激素的协同下 ,能显著提高动物存活率 (P <0 .0 1) ,减轻肝组织病理损伤程度。
- 杨琨田红燕吕平
- 关键词：表皮生长因子雌激素肝损害
- 溶瘤病毒OncoVex^(GM-CSF)在恶性肿瘤中的应用及研究进展被引量：3
- 2014年
- OncoVexGM-CSF是一种通过基因工程构建的新型溶瘤病毒,能够选择性地在恶性肿瘤细胞中复制而不伤及其他正常细胞,其通过基因的缺失突变、插入免疫调控因子而实现肿瘤靶向治疗作用,具有复制速度快、免疫原性强、毒副作用少等优点。本文对溶瘤病毒OncoVexGM-CSF在恶性肿瘤中的应用及研究进展进行综述。
- 柯雪董武白枫杨琨
- 关键词：溶瘤病毒单纯疱疹病毒属黑色素瘤
