张飞
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
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- 慢病毒载体介导的bFGF基因转染兔BMSCs的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的观察在体外培养条件下,慢病毒载体介导的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对兔骨髓基质干细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法采用密度梯度离心法及贴壁筛选法获取BMSCs;利用慢病毒载体将bFGF基因转染到BMSCs中,根据转染条件分为bFGF转染组、空病毒组、未转染组,转染后分别对3组细胞的形态、bFGF mRNA及蛋白表达、细胞增殖情况、细胞周期及碱性磷酸酶(ALP)活性进行观察。结果采用密度梯度离心法和贴壁筛选法,成功获得高纯度的BMSCs。载有bFGF基因的慢病毒转染BMSCs后,细胞形态无明显变化,而bFGF mRNA与蛋白表达均明显增强、细胞增殖曲线上移、增殖期细胞比例增大、ALP活性明显增高,与空病毒组及未转染组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论利用慢病毒载体将兔bFGF基因导入体外培养的BMSCs,目的基因获得稳定表达,并且自身过表达的bFGF可以促进BMSCs的增殖与成骨分化。
- 张槐彭吾训刘钢张健张飞王健波赵胤李青
- 关键词：干细胞成纤维细胞生长因子2骨髓基质干细胞慢病毒载体
- FGF-2基因转染rBMSCs构建组织工程骨移植修复兔股骨头缺血性坏死模型被引量：1
- 2018年
- [目的]评价FGF-2基因转染r BMSCs构建组织工程骨移植修复兔股骨头缺血性坏死的治疗效果。[方法]采用密度梯度离心联合贴壁法体外分离、培养rBMSCs,并检测与XACB的生物相容性。用FGF-2基因过表达慢病毒转染rBMSCs,并检测FGF-2基因在rBMSCs成功过表达后,与XACB复合培养构建组织工程骨。将成功建立的激素型兔股骨头缺血性坏死模型随机分为5组:A组(control)、B组(XACB)、C组(XACB+r BMSCs)、D组(XACB+rBMSCs+Lv-GFP)、E组(XACB+rBMSCs+Lv-FGF2/GFP),进行组织工程骨移植。术后3、6、12周分点取材,进行大体解剖观察、X线片检查、HE染色评估新骨形成面积,评价该组织工程骨修复兔股骨头缺血性坏死模型的治疗效果。[结果]采用密度梯度离心联合贴壁法可获取高度均一的rBMSCs,与XACB的生物相容性良好。FGF-2基因转染rBMSCs(MOI=100),其效率在95%以上,q PCR及Western Blot检测rBMSCs可稳定过表达FGF-2。组织工程骨植入术后6周,大体标本观察及X线片检查显示E组缺损区修复面积在80%以上,术后12周缺损区完全修复,其成骨作用明显强于其他各组,而且X线评分及新骨形成面积也均高于其他各组(P<0.05)。[结论]FGF-2基因过表达慢病毒转染rBMSCs与XACB复合培养构建的组织工程骨可有效促进兔股骨头缺血坏死的修复效果。
- 张飞彭吾训王蕾张健董文涛吴建华张槐王健波赵胤李青邓进
- 关键词：股骨头缺血性坏死组织工程骨骨髓基质干细胞
- XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2的制备及其对兔激素性股骨头缺血坏死的治疗效果观察
- 2018年
- 目的制备慢病毒介导成纤维细胞生长因子2(FGF-2)基因转染骨髓基质干细胞(MSCs)与异种脱抗原松质骨(XACB)的组织工程骨,探讨其对兔激素性股骨头缺血坏死的治疗作用及其机制。方法体外分离培养兔MSCs,利用慢病毒介导FGF-2基因转染MSCs并获得稳转细胞株,将其与XACB进行复合培养,获得组织工程骨XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2。采用内毒素与甲基强的松龙制备兔激素性股骨头缺血坏死模型60只,随机分为A^E组各12只,各组进行髓芯减压,A组不进行植骨,B组植入自体松质骨,C组植入XACB/MSCs,D组植入XACB/MSCs/Lv-GFP,E组植入XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2。术后3、6、12周各组随机处死4只,观察股骨头大体形态,采用免疫组化法检测股骨头组织TNF-α阳性表达率,Real-time PCR法检测股骨头组织TNF-αmRNA表达。结果术后3周,E组可见少量新骨形成,其余各组均未见新骨形成。术后6周,A组缺损区由肉芽组织填充,仍无明显新骨形成;B、C、D组缺损区仍清晰可见,边缘可见新骨形成;E组大部分缺损区已被新骨填充,移植骨已基本被吸收。术后12周,A组仅有少量新骨形成,B、C、D组均未完全修复,E组缺损区修复接近正常松质骨。术后3、6、12周,B、C、D、E组股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量均逐渐降低(P均<0.05)。术后3周,E组股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量均低于A、B、C、D组(P均<0.05);术后6、12周相同时间点,股骨头组织TNF-α阳性表达率及mRNA相对表达量A组>B组>C、D组>E组(P均<0.05)。结论成功制备了组织工程骨XACB/MSCs/Lv-GFP-FGF-2;其治疗兔激素性股骨头缺血坏死的效果较好,作用机制可能为抑制股骨头组织TNF-α表达。
- 王健波彭吾训张健张飞张槐赵胤李青邓进
- 关键词：股骨头缺血坏死组织工程骨
- 髋关节置换术在治疗老年股骨转子间骨折中的应用现状被引量：17
- 2016年
- 股骨转子间骨折是常见的髋部骨折．多见于老年患者，随着人口老龄化进程的加快，股骨转子间骨折的发病率也在逐年上升，且老年患者常合并较多的内科疾病，保守治疗病死率高达20％左右。现今老年股骨转子间骨折多采用手术治疗，保守治疗仅适用于有严重内科疾病不能耐受手术的患者。手术治疗主要有内固定和髋关节置换术。老年股骨转子间骨折多伴有骨质疏松，其发生率达92．9％。
- 张飞彭吾训
- 关键词：老年股骨转子间骨折髋关节置换术保守治疗老年患者内科疾病人口老龄化
- 低浓度过氧化氢预处理增强骨髓间充质干细胞抗氧化应激损伤的能力被引量：4
- 2019年
- 背景:骨髓间充质干细胞移植促进骨坏死区血管再生和骨重建,取得了一定疗效,但是骨坏死区氧化应激微环境极大地限制了移植后骨髓间充质干细胞的存活、增殖和成骨分化能力,降低了对骨坏死区的修复作用。目的:探讨低浓度过氧化氢预处理对骨髓间充质干细胞抗氧化应激损伤的影响。方法:取生长良好的第3代兔骨髓间充质干细胞,实验分为3组:空白对照组,高浓度过氧化氢持续处理组(500μmol/L过氧化氢处理24 h),低浓度过氧化氢预处理组(50μmol/L过氧化氢预处理8 h,恢复12 h,再用500μmol/L过氧化氢处理24 h)。根据实验分组条件进行过氧化氢处理,采用DCFH-DA荧光染料检测细胞活性氧水平,ELISA法检测各组细胞超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力,比色法检测各组细胞丙二醛水平,JC-1法检测细胞线粒体膜电位,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪和TUNEL/DAPI双染法检测细胞凋亡。结果与结论:①与高浓度过氧化氢持续处理组相比,低浓度过氧化氢预处理组可有效减少骨髓间充质干细胞内活性氧产生(P <0.05);同时,低浓度过氧化氢预处理组超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活力明显升高(P <0.05),丙二醛水平明显降低(P <0.05),线粒体膜电位损伤减轻(P <0.05),细胞存活率提高(P <0.05),细胞凋亡减少(P <0.05);②结果表明低浓度过氧化氢预处理可显著增强骨髓间充质干细胞抗氧化应激损伤能力。
- 袁大江彭吾训张飞王贞文郑应刚
- 关键词：骨髓间充质干细胞线粒体膜电位骨髓间质干细胞
- OPG和RANKL在XACB/LV-bFGF/MSCs移植修复兔股骨头缺损坏死模型中的表达被引量：3
- 2018年
- 目的观察移植慢病毒转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓基制干细胞复合培养的组织工程骨(XACB/LV-b FGF/MSCs)治疗的兔股骨头缺损坏死模型中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(receptoractivator of NF-кB ligand,RANKL)的表达变化情况,探讨组织工程骨对股骨头坏死的治疗效果。方法 6~7个月龄新西兰大白兔60只,运用地塞米松联合马血清注射法制作股骨头坏死模型,应用组织工程骨修复股骨头坏死模型。根据修复方法不同分为5组,A组为空白对照组,B组植入XACB,C组植入XACB+MSCs,D组为XACB+MSCs+空病毒,E组植入XACB+LV-b FGF+MSCs。术后分别于3、6、12周3个时间点取股骨头松质骨,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测OPG和RANKL的蛋白表达。结果 OPG蛋白表达:各时间点E组大于A组、B组、C组、D组,E组与A、B、C、D组比较差异均有统计学意义(P<0.05),C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RANKL蛋白表达:E组大于A组、B组、C组、D组,E组与A、B、C、D组比较差异均有统计学意义(P<0.05),C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过运用组织工程骨修复的兔股骨头坏死组中OPG蛋白表达上调,修复效果较其他组更优,表明XACB/LV-b FGF/MSCs有望作为一种有效的组织工程材料用于股骨头坏死修复中。
- 赵胤彭吾训张健董文涛吴建华张飞张槐王健波叶川李青邓进
- 关键词：骨保护素骨髓基质干细胞
- FAR591介导骨微血管内皮细胞凋亡在激素性股骨头坏死发病过程中的作用和机制
- 目的:激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH)的具体发病机制,仍不完全清楚,目前尚无确切有效的早期治愈手段。深入研究SONFH的发...
- 张飞
- 关键词：股骨头坏死长链非编码RNA
