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HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立及其应用被引量：10: 2017年; 为建立方便、可靠、重复性好的胰岛素抵抗细胞模型,研究胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白磷酸化与胰岛素抵抗的关系以及不同铬制剂对细胞葡萄糖代谢的作用。试验采用高胰岛素、高糖联合诱导Hep G2细胞建立胰岛素抵抗模型,通过葡萄糖氧化酶法及噻唑蓝比色法(MTT)分析受试物对细胞葡萄糖代谢及活性的影响,优化最佳造模条件;同时,利用蛋白免疫印迹法(WB)分析IRS-2的蛋白表达及其蛋白磷酸化,验证模型的胰岛素抵抗性。在此基础上,将模型应用于分析葡萄糖耐量因子(GTF)及其它铬制剂的降糖效果。结果表明,高胰岛素(10-6mol·L^(-1))和高糖培养基(25 mmol·L^(-1))处理细胞48h,细胞存活率达96%,与对照组相比,葡萄糖消耗量降低了5.7%,IRS-2含量减少31.02%,胰岛素抵抗效果显著,且该胰岛素抵抗模型可稳定维持48 h。相比于吡啶酸铬和三氯化铬,GTF对细胞葡萄糖代谢有显著的改善作用,其最佳作用浓度为1.0μg·m L-1。利用HepG2细胞建立体外胰岛素抵抗模型,方法简单可靠、重复性好,可广泛应用于天然活性物质的降糖功能研究。; 许乐逄晓阳芦晶张书文张瑞华刘鹭吕加平; 关键词：HEPG2细胞胰岛素抵抗葡萄糖消耗胰岛素受体底物

酵母源葡萄糖耐量因子的提取纯化研究: 2016年; 为探究葡萄糖耐量因子(GTF)分离纯化工艺,简化纯化步骤,以期得到GTF纯品,本实验在前人氨水提取基础上,采用有机溶剂沉淀除去杂蛋白,在有机溶剂的种类、溶剂的浓度、提取组分以及沉淀时间的确定等方面进行了试验,以有机铬含量(μg)与总蛋白含量(mg)的比值为纯化评价标准,高相液相色谱对纯化结果进行验证,同时将纯化前后的GTF作用于胰岛素抵抗型Hep-G2肝癌细胞,测定细胞葡萄糖消耗量,检测GTF纯化品对细胞葡萄糖代谢的调节活性。最终确定用30%低温乙醇沉淀20 min,10000×g离心取上清液分离纯化GTF,此方法相较于氨水直接提取,有机铬含量与总蛋白含量的比值提高了6倍多,GTF提取率和纯度都得到了显著提高,且纯化后的GTF对胰岛素抵抗型Hep-G2细胞葡萄糖代谢具有显著调节作用(P<0.01)。; 许乐刘鹭汪建明吕加平; 关键词：提取纯化凝胶层析

喷雾干燥温度对酪蛋白胶束粉理化性质及微观结构的影响被引量：1: 2019年; 研究了喷雾干燥温度对酪蛋白胶束粉(MCP)理化性质和微观结构的影响。分别采用不同的进、出口温度130℃/65℃,160℃/78℃,180℃/90℃对酪蛋白截留液进行喷雾干燥处理。结果表明:喷雾干燥温度为130℃/65℃时,得到的MCP分子表面平整,微观结构变化不明显,粉末流动性好。当温度从130℃/65℃上升至180℃/90℃时,MCP表面变得粗糙,粒径D50从14.13μm降到10.47μm,溶解度从84.14%降到60.44%,水分含量从4.07%降到3.20%,粉末的流动性指数从4.16减到1.27。综合来看,130℃/65℃是合适的喷雾干燥温度。; 张瑞华刘鹭逄晓阳芦晶杨洋赵璞许乐张书文吕加平; 关键词：理化性质微观结构

一种从含铬酵母中提取葡萄糖耐量因子的方法: 本发明公开了一种从含铬酵母中提取葡萄糖耐量因子的方法。该方法包括如下步骤：1)对含铬酵母粉进行氨水提取，得到氨水提取液；2)冰浴条件下，利用乙醇水溶液对所述氨水提取液进行提取，离心后收集上清液，去除乙醇即实现葡萄糖耐量因...; 刘鹭吕加平许乐; 文献传递

GTF对胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞活力和葡萄糖消耗的影响被引量：2: 2018年; 铬对于维持机体的糖、脂和蛋白质的正常代谢起着重要作用。以高铬酵母中纯化获得的葡萄糖耐量因子(GTF)为研究对象,以3T3-L1胰岛素抵抗型脂肪细胞为模式细胞,通过MTT法分析其对细胞活性的影响。通过葡萄糖氧化酶法测定胰岛素刺激和非胰岛素刺激下GTF对模式细胞葡萄糖消耗量的影响,分析其量效和时效变化规律。比较不同来源的铬对胰岛素抵抗型3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢的影响,结果表明GTF的有效剂量在0.5~1.5μg/mL范围,当GTF超过3 g/mL时,细胞活力显著受损(P<0.01)。GTF作用细胞12 h后,细胞的葡萄糖消耗量显著升高(P<0.05)。胰岛素刺激下,1μg/mL的GTF作用24 h,可使细胞葡萄糖消耗量提高2.5倍。相比于同等剂量的三氯化铬、吡啶酸铬,GTF促进细胞葡萄糖消耗的作用效果最显著。; 刘鹭许乐许乐张书文张书文芦晶逄晓阳; 关键词：胰岛素抵抗型脂肪细胞

超声处理对酪蛋白胶束粉加工特性的影响被引量：3: 2017年; 研究超声预处理对酪蛋白胶束粉(micellar casein concentrate,MCC)加工特性的影响。通过微滤生产的酪蛋白截留液经超声处理(超声功率600 W,超声时间0.0、0.5、1.0、2.0、5.0 min)后进行喷雾干燥,得到超声改性的MCC,并进行了加工特性的研究。结果表明,随着超声时间的延长,MCC溶液的电导率、溶解性、乳化性、凝胶性显著增加(P<0.05),pH值变化不显著(P>0.05)。超声对MCC粉体性质也有影响,随着超声时间的延长,MCC压缩性、流动指数明显减小(P<0.05);基本流动能在超声处理0.5 min达到最小值;特殊流动能在超声1 min达到最大值。超声处理可以改善MCC的加工特性,将会促进MCC在食品工业中的应用。; 张瑞华张书文刘鹭刘心伟逄晓阳许乐汪建明吕加平; 关键词：超声处理

一种从含铬酵母中提取葡萄糖耐量因子的方法: 本发明公开了一种从含铬酵母中提取葡萄糖耐量因子的方法。该方法包括如下步骤：1)对含铬酵母粉进行氨水提取，得到氨水提取液；2)冰浴条件下，利用乙醇水溶液对所述氨水提取液进行提取，离心后收集上清液，去除乙醇即实现葡萄糖耐量因...; 刘鹭吕加平许乐; 文献传递

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许乐