陈晓旭 作品数:7 被引量:10 H指数:1 供职机构: 西北农林科技大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 博士后科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 电子电信 更多>>
非编码RNA对哺乳动物精子发生过程的调控 被引量:8 2017年 精子发生始于精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs),SSCs一部分自我更新,另一部分首先分裂形成Asingle(As)型精原细胞,进而形成Aparied(Apr)型精原细胞和Aaligned(Aal)型精原细胞;随后,Aal型精原细胞再发育为A1-A4型精原细胞、中间型精原细胞以及B型精原细胞;B型精原细胞有丝分裂可形成初级精母细胞,经历前细线期、细线期、偶线期、粗线期,再经减数分裂形成次级精母细胞;当圆形精子细胞形成之后,则经细胞核浓缩等过程形成晚期的细长型成熟精子,随之最终变形成为精子。这一复杂的生理过程需要相关基因的适时表达,并受到转录和转录后水平的调控。研究表明,多种类型的非编码RNA(nc RNAs)在精子发生过程中发挥着重要作用。nc RNAs包括微小RNAs(mi RNAs)、与Piwi蛋白相互作用的RNAs(pi RNAs)、长链非编码RNAs(lnc RNAs)、环状RNAs(circ RNAs)以及内源性小干扰RNAs(endo-si RNAs)等。这些nc RNAs的表达具有细胞组织特异性和发育阶段特异性,可从时间和空间上精确调控精子发生的整个过程。mi RNAs是一类长约21—25 nt的内源性非编码单链RNA分子,广泛存在于各种生物中,其形成至少需要Drosha和Dicer等两种RNA酶的参与,可降解靶m RNA或抑制靶m RNA翻译,对SSCs干性的维持、自我更新和分化的调控以及生殖细胞减数分裂和精子发生过程具有重要的调控作用。此外,精子发生过程中,在生殖细胞不同阶段所表达的基因也可调控mi RNAs的生成加工过程。pi RNAs是2006年发现的一种新的小RNA,长度约24—32nt,其作用与Dicer酶无关,能够与生殖细胞特异性蛋白Piwi蛋白家族成员结合,进而行使生物学功能,其主要表现为:在表观遗传水平和转录后水平沉默转座子、反转座子等基因组移动遗传元件,维持生殖细胞自身基因组稳定性和完整性,调控生殖细胞增殖、减数分裂及精子发生过程。Lnc RNAs是一类长度大于200 nt的 陈瑞 于帅 陈晓旭 杜健 朱振东 潘传英 曾文先关键词:精子发生 猪支持细胞中tsRNAs表达特点及功能研究 引言支持细胞(Sertoli cells)位于曲细精管基底膜上并伸入管腔。不同阶段的生精细胞则嵌合在支持细胞表面。支持细胞不仅提供结构性支持,还参与调控SSCs的增殖分化,为精母细胞和精子细胞发育创造一个特异的免疫环境,... 国铭 李学亮 陈晓旭 郑以 曾文先精子发生中miRNAs调控功能研究进展 被引量:1 2017年 源源不断的精子发生过程是雄性繁殖机能的基础。精原干细胞(SSCs)持续不断地自我更新和分化又是精子发生的基础。精子发生起始于精原干细胞的分化,历经漫长的减数分裂后形成单倍体圆形精细胞。后者经过变态发育过程,最终形成精子并释放到曲细精管管腔中。研究表明,成千上万的基因参与了精子发生过程,然而如何实现对这些基因精确有效的调控还有待研究。 陈晓旭 曾文先关键词:精子发生过程 MIRNAS 精原干细胞 繁殖机能 自我更新 猪精子发生中miRNA差异表达研究 陈晓旭 张鹏飞 李学亮 曾文先猪精子发生中miRNA差异表达研究 <正>引言/目的:精子发生主要包括精原细胞的有丝分裂,精母细胞的减数分裂以及单倍体精子细胞的变态发育。近年来的研究表明,miRNA参与精子发生的调控。然而,有关猪精子发生过程中miRNA动态表达变化特点尚未见报道。因此,... 陈晓旭 张鹏飞 李学亮 曾文先文献传递 组蛋白甲基转移酶SETDB1调控精原干细胞存活 引言精原干细胞是睾丸中的一类成体干细胞,具有自我更新与分化潜力,在干细胞生物学、再生医学、转基因动物制作及男性不育治疗等领域具有重要的科学意义和应用价值。精原干细胞数量极为稀少,严重限制了相关研究进展。组蛋白甲基化酶SE... 李学亮 陈晓旭 刘营东 张鹏飞 郑以 曾文先猪Utx慢病毒过表达/干扰载体的构建和病毒包装 被引量:1 2017年 UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。 闫海龙 陈晓旭 朱晋生 张鹏飞 李爽 曾文先关键词:SHRNA 慢病毒