王正文 作品数:9 被引量:9 H指数:2 供职机构: 济宁医学院 更多>> 发文基金: 山东省自然科学基金 山东省高等学校科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
胆囊收缩素Ⅱ型受体研究进展 被引量:5 2018年 胆囊收缩素受体属于G蛋白偶联受体,具有两种亚型,广泛分布于神经系统和消化系统。胆囊收缩素Ⅱ型受体不仅参与神经内分泌类肿瘤、胰腺癌、胃癌、结肠癌的发生发展,在恐慌、镇痛、学习记忆及焦虑等也发挥重要的调节作用。本文就胆囊收缩素Ⅱ型受体研究进展作一综述。 姜云璐 王正文 陈京 白波关键词:恐慌 焦虑 镇痛 癌症 孤啡肽受体信号转导及功能研究进展 被引量:2 2017年 孤啡肽受体是阿片受体的家族成员,属于G蛋白偶联受体中A类视紫红质样受体,其天然的内源性配体被称为痛敏肽。孤啡肽受体分布广泛,对神经系统疾病有着重要的作用。本文就孤啡肽配体-受体系统生物学作用做简单综述,从而为孤啡肽受体参与相关疾病的发病机制提供理论依据。 王正文 姜云璐 李胜 白波 陈京关键词:孤啡肽受体 APJ-CFP/Venus重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达 目的:构建带有黄色/青色荧光蛋白标签的人Apelin受体(putative receptor protein related to the angiotensin receptor ATJ,APJ)真核表达载体,用于研究... 姜云璐 王正文 陈京 白波关键词:荧光蛋白 食欲素1受体与胆囊收缩素2受体在细胞内的相互作用分析 被引量:1 2017年 食欲素1受体(orexin 1 receptor,OX1R)与胆囊收缩素2受体(cholecystokinin receptor,CCK2R)在结肠癌细胞中高表达,且异常表达的OX1R、CCK2R与其配体诱导的结肠癌细胞增殖密切相关,但具体机制尚不清楚。以前的研究证实,OX1R与CCK1R在HT-29细胞中能以二聚体的形式发挥作用。本文利用多种(荧光)共振能量转移技术(FRET)结合免疫共沉淀(Co-IP),进一步研究活细胞中OX1R与CCK2R是否发生相互作用。生物发光能量共振转移(BRET)结果显示,在控制供体(OX1R-Rluc)量不变,而逐渐增加受体(CCK2R-e YFP)转染量时,与无刺激的(对照)细胞比较,食欲素或胃泌素刺激HEK293T细胞5 min,BRET信号伴随受体表达量的增加而增加,并达到最大值。采用荧光共振能量转移技术在HEK293T细胞中,能够检测到OX1R-e YFP与CCK2Re CFP明显的FRET信号。同时,受体漂白FRET(ap FRET)结果揭示,在同时表达OX1R-e YFP和CCK2R-e CFP的细胞膜特定区域,进行受体蛋白(OX1R-e YFP)完全光漂白、破坏了受体-供体之间的相互作用和能量传递后,由于供体(CCK2R-e CFP)荧光强度比漂白前明显增强,其荧光共振能量转移效率(FREPe)明显增加,是对照转染细胞的3.7倍(P<0.05)。此外,基因转染结合Co-IP结果显示,仅有在共转染HA-OX1R与Myc-CCK2R的HEK293T细胞提取液的免疫沉淀物中,可同时检出HA-OX1R、Myc-CCK2R融合蛋白,而在未转染或单转Myc-CCK2R的细胞提取液沉淀物中,却不能同时检出两种融合蛋白。以上结果表明,在活细胞生理条件下,OX1R可与CCK2R相互作用,这为进一步探讨二者相互作用在结肠癌细胞增殖中的作用及相关信号通路提供了新的线索。 姜云璐 王正文 程葆华 白波 陈京关键词:胆囊收缩素受体 荧光共振能量转移 免疫共沉淀 Apelin与血管加压素在水平衡中的研究 被引量:1 2019年 Apelin受体与血管加压素Ⅱ型受体均属于G蛋白偶联受体,Apelin与血管加压素均由下丘脑大细胞AVP神经元分泌,Apelin受体与血管加压素Ⅱ型受体均在肾脏表达,本文就Apelin与血管加压素的分布及参与水平衡调节做简单的综述,为其参与水代谢疾病的发病机制提供理论依据。 吕志瞳 姜云璐 王正文 张如敏 陈京关键词:APELIN 血管加压素 FRET技术研究Apelin受体与G蛋白的相互作用 2017年 目的探讨Apelin受体与G蛋白之间的相互作用。方法在HEK293T细胞中建立Apelin受体与各亚型G蛋白的过表达体系,利用荧光共振能量转移技术(fluorescence resonance energy transfer technology,FRET)实时、动态、连续的监测Apelin受体与G蛋白偶联的机制。结果加入激动剂Apelin-13刺激后,Apelin受体与Gαi1亚基的FRET值没有发生明显的变化(P>0.05),Apelin受体与Gαi2、Gαi3亚基的FRET信号显著增加(P<0.05),而Apelin受体与Gαo、Gαq亚基的FRET信号相对于刺激前显著降低(P<0.05)。结论 Apelin受体在其激动剂Apelin-13作用下,能够激活G蛋白的Gαi2、Gαi3、Gαo、Gαq亚基,并引起Gαi2、Gαi3亚基构象重排进而与Gγ亚基相互靠近,Gαo、Gαq亚基远离Gγ2亚基,而不与Gαi1亚基发生相互作用。 姜云璐 田艳君 王正文 吕志瞳 白波 陈京关键词:信号转导 G蛋白偶联受体 G蛋白偶联受体二聚化研究进展 目的:G蛋白偶联受体(GPC Rs)是目前已知的哺乳动物类最大的膜蛋白超家族,占目前药物治疗靶点的30%.以往对于GPCRs的基础研究往往停留在单体上,认为GPCRs是以单体为单位起作用.然而,近年来大量证据表明GPCR... 王正文 李胜 陈京 白波关键词:G蛋白偶联受体 信号转导 荧光共振能量转移技术检测Apelin受体与G蛋白的相互作用 目的:研究Apelin受体与G蛋白偶联的可能机制.
方法:以HEK293T细胞为研究对象,在此细胞系内建立过表达体系,利用荧光共振能量转移技术实时、动态、连续的监测Apelin受体与不同亚型的G蛋白相互作用.
... 姜云璐 李胜 王春梅 王正文 陈京 白渡关键词:G蛋白偶联受体 荧光共振能量转移 信号通路 环糊精修饰在医药应用中的研究进展 环糊精是由葡萄糖结合构成的形状类似于角锥的口宽底窄,里面中空的筒状结构,具有优良的的性质,在医药、化工、纳米载体、手性分离等很多方面都得到了大范围的应用.环糊精是一类重要的药用高分子材料,通过与药物形成包合物结构而实现提... 王正文 姜云璐 陈京 白波关键词:环糊精 稳定性 生物利用度