孙磊 作品数:32 被引量:106 H指数:5 供职机构: 中国医科大学附属盛京医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 沈阳市科学技术计划项目 辽宁省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
SHBG与胰岛素传导通路蛋白在GDM孕妇胎盘组织中的表达分析 被引量:4 2016年 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘组织中的性激素结合球蛋白(SHBG)与胰岛素受体底物(IRS)-1、IRS-2、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)p85的表达及相关性。方法选取2013年6月至2014年6月在中国医科大学附属盛京医院住院的妊娠37~42周行择期剖宫产的30例GDM孕妇(GDM组)和30例同期行剖宫产分娩的正常孕妇(对照组)。采用免疫组织化学染色的方法检测SHBG、IRS-1、IRS-2、PI3Kp85在两组胎盘组织中的表达情况。应用Pearson相关分析SHBG与IRS-1、IRS-2、PI3Kp85的相关性。结果在GDM组与对照组孕妇胎盘组织中SHBG、IRS-1、PI3Kp85表达量比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),而IRS-2表达量两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示,SHBG和IRS-1在胎盘组织中的表达呈正相关(P<0.01,R^2=0.542)。SHBG和PI3Kp85在胎盘组织中的表达呈正相关(P<0.05,R^2=0.520)。结论 SHBG在孕妇胎盘中表达量减少能够通过影响IRS-1/PI3Kp85信号传导通路而在GDM发病中发挥一定的作用。 息小雪 郑阳 金镇 孙磊 孙倩 练思宇 冯冲 王越 张宝关键词:性激素结合球蛋白 胰岛素受体底物 磷脂酰肌醇3激酶 蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔细胞核因子κB及血清炎症标志物水平的影响 被引量:4 2006年 目的:观察蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔组织细胞核因子κB、血清炎症标志物水平的影响。方法:实验于2004-12/2005-05在中国中医研究院西苑医院心血管实验室完成。50只健康雄性日本大耳白兔,随机取10只作为正常对照组,喂普通饲料,其余40只给予高脂饮食喂养4周后,再随机分为4组:①模型组10只,继续喂高脂饲料。②小剂量组10只,喂以高脂饲料和蒺藜总皂苷6.3mg/(kg·d)。③大剂量组10只,喂高脂饲料和蒺藜总皂苷12.6mg/(kg·d)。④阳性药物对照组10只,喂以高脂饲料和辛伐他汀2.35mg/(kg·d)。2周后,测定血脂、组织中细胞核因子κB及ELISA法测定血清炎症标志物血清C-反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1水平。结果:50只家兔均进入结果分析。①与正常对照组相比,模型组、小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油均升高[(1.03±0.50),(24.33±6.08),(17.10±1.94),(14.81±5.03),(16.81±2.73)mmol/L,P<0.01;(0.87±0.43),(5.27±0.06),(2.83±0.16),(1.84±0.40),(2.20±0.74)mmol/L,P<0.01];与模型组相比,小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油水平均明显降低(P<0.05)。②正常对照组细胞核因子κB呈现低表达状态,阳性表达出现在胞浆中;模型组细胞核因子κB活化,表达增强,阳性颗粒出现在胞浆及胞核中,小剂量、大剂量组、阳性药物对照组细胞核因子κB表达的活性较模型组低[(15.47±6.32)%,(8.54±2.67)%,(4.36±3.65)%,(4.70±3.69)%,P<0.05],胞核阳性表达减少。小剂量、大剂量组比较差异不显著。③与模型组比较,小、大剂量组及阳性药物对照组C反应蛋白、血管细胞黏附分子1水平显著降低[(57.09±8.03),(40.07±4.65),(42.04±8.57),(26.07±5.15)ng/L,P<0.01;(51.74±9.29),(43.38±4.09),(36.04±2.57),(35.09±2.49)ng/L,P<0.01],大剂量组血清单核细胞趋化蛋白-1明显降低[(38.77±8.30),(29.47±10.25)ng/L,P<0.05),小剂� 张波 孙磊 张明远腹腔镜多脏器联合手术71例分析 被引量:1 2008年 目的探讨腹腔镜多脏器联合手术的可行性。方法回顾性分析71例腹腔镜多脏器联合手术的临床资料。结果2例中转开腹,其余69例手术均顺利,发生术后并发症1例。术后患者排气时间1~6d,平均(3.5±0.9)d。术后住院时间为3~35d,平均(7.8±3.2)d。结论腹腔镜多脏器联合手术能有效地一次处理腹腔内多个病灶。 孙磊 张立魁 于浩 吴硕东关键词:腹腔镜 多脏器联合手术 CO_2气腹对大鼠肠道细菌易位的影响 被引量:3 2007年 目的观察CO_2气腹不同压力和不同持续时间对大鼠肠道细菌易位的影响。方法雄性Wistar大鼠130只,随机分成空白对照组10只、低气腹压组40只、中气腹压组40只和高气腹压组40只。闭合法建立CO_2气腹,气腹压力分别设定为5 mmHg,10 mmHg,15 mmHg,持续时间设定为0.5,1.0,2.0,4.0,24 h后处死动物,取大鼠门静脉血、回肠及肠系膜淋巴结,测定血中内毒素含量,并进行肠系膜淋巴结和门静脉血细菌培养,计算阳性率。结果高气腹压4.0 h组门静脉血中内毒素水平、淋巴结和门静脉血培养阳性率高于其他组别(P<0.01);中气腹压4.0 h组血中内毒素水平、淋巴结和门静脉血培养阳性率高于中气腹压2.0 h组(P<0.01);低气腹压4.0 h组血中内毒素水平高于低气腹压2.0 h组(P<0.01)。结论气腹压力越高、持续时间越长对肠道细菌易位的影响越重。 张明远 赵锦程 刘明远 张波 杨玉 孙磊关键词:气腹 细菌易位 内毒素 原发胆囊癌腔内跳跃式转移至胆总管二例 2009年 胆管癌转移途径中,胆管腔内播散最少见,仅占4%左右,发生在乳头状腺癌。2006年7月至2008年5月我科收治2例原发胆囊癌腔内跳跃式转移至胆总管患者,现报道如下。 范莹 吴硕东 田雨 孙磊 王洋关键词:胆总管 腔内 乳头状腺癌 胆管癌 SHBG基因敲除小鼠模型的建立及其表型分析 被引量:2 2017年 目的:建立性激素结合球蛋白(SHBG)基因条件敲除小鼠模型,为探讨胎盘组织中SHBG在体内的生理功能及其与妊娠期糖尿病发病关系提供实验手段。方法:首先运用生物信息学手段确定小鼠SHBG基因组序列,构建SHBG打靶载体,以电穿孔方法将其导入小鼠ES细胞,筛选培养阳性ES细胞并行PCR鉴定,并将正确同源重组的ES细胞注射进小鼠囊胚,移入受体小鼠子宫;将获得的嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配,筛选后获得Flox小鼠,该小鼠与EIIa-Cre转基因小鼠杂交,子代多次自交获得SHBG全身基因敲除(SHBG^(-/-))的小鼠。结果:运用同源重组及ES细胞技术建立了SHBG基因的Flox小鼠,并利用Cre/Loxp重组酶系统建立了SHBG基因全身敲除小鼠模型,PCR方法从基因水平证明了SHBG基因Flox小鼠及SHBG基因全身敲除小鼠模型建立成功。对基因敲除鼠进行初步表型分析发现:SHBG基因全身敲除小鼠的生长发育与野生型小鼠相比无明显肉眼所见异常,SHBG基因全身敲除雌雄小鼠均具有生殖能力。结论:成功建立SHBG基因全身敲除小鼠模型,通过对基因敲除鼠进行初步表型分析,发现SHBG基因全身敲除小鼠外观上发育正常,为进一步研究SHBG在妊娠期糖尿病中的作用奠定了基础。 孙一平 王越 金镇 王晓岩 孙磊 张璇 冯冲 周效华关键词:性激素结合球蛋白 妊娠期糖尿病 性激素结合球蛋白在妊娠期糖尿病胎盘组织中的变化及其意义 被引量:6 2011年 目的探讨性激素结合球蛋白(SHBG)在妊娠期糖尿病(GDM)胎盘组织中的表达变化及其意义。方法应用RT-PCR、Western blot及ELISA法分别检测GDM胎盘组织中SHBG mRNA、SHBG蛋白及SHBG浓度。结果 GDM组与对照组比较:SHBG mRNA(1.839±0.827 vs 2.485±1.950)、SHBG蛋白(1.852±0.645 vs 2.522±0.842)及SHBG浓度(2.071±0.417 vs 2.495±0.529)都显著降低,有统计学差异(P<0.05)。结论 GDM时胎盘滋养细胞存在着SHBG,但其合成和分泌减少,在GDM发病过程中发挥重要作用。 金镇 孙磊 滕卫平 张亚南 艾婉婷 王娉婷关键词:性激素结合球蛋白 妊娠期糖尿病 胎盘 RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞凋亡的影响 被引量:3 2013年 目的探讨RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对滋养细胞凋亡的影响。方法在体外通过RNA干扰技术,将SHBGsiRNA转染至原代培养的人绒毛滋养层细胞中,双染流式细胞术检测绒毛滋养层细胞凋亡情况。结果成功原代培养人绒毛滋养层细胞。滋养细胞转染时分成6组:Ⅰ组为正常对照组(未经转染的细胞);Ⅱ组为空白对照组(只转染脂质体,无特异性siRNA);Ⅲ组为阴性对照组(转染Nonspecific siRNA);Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组为转染组(分别转染SHBGsiRNA-Ⅰ、SHBGsiRNA-Ⅱ、SHBGsiRNA-Ⅲ)。成功将SHBGsiRNA转染人绒毛滋养层细胞,结果显示与正常对照Ⅰ组、空白对照Ⅱ组和阴性对照Ⅲ组相比,各转染Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组的滋养层细胞凋亡率明显增加(分别为14.61±3.05、14.37±2.47、16.91±2.61、8.89±0.36、8.64±0.87和9.24±0.60,P<0.05)差异均有统计学意义。结论 siRNA可以有效干扰滋养层细胞SHBG基因的表达,可导致滋养层细胞过度凋亡。 孙倩 孙磊 金镇 范杰慧 息小雪关键词:性激素结合球蛋白 滋养层细胞 RNA干扰 细胞凋亡 NODAL基因在室间隔缺损胎儿心脏组织中的表达变化及作用机制的研究 2013年 目的探讨NODAL信号通路在室间隔缺损形成中的潜在作用。方法应用荧光定量逆转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹方法分别检测室间隔缺损胎儿心脏组织中NODAL基因的表达(以同胎龄胎儿心脏组织为对照组)。分别构建SMAD2、CITED2基因表达质粒及NODAL基因荧光素酶报告基因质粒,并通过荧光素酶报告基因系统和免疫共沉淀实验对SMAD2、CITED2与NODAL基因之间相互作用进行研究。结果室间隔缺损胎儿心脏组织中NODAL基因表达较正常对照组降低,差异有显著性意义(P<0.01)。荧光素酶报告分析表明SMAD2和CITED2分别能上调NODAL基因表达,CITED2和SMAD2同时表达时NODAL基因的启动子活性呈4.3倍上调。免疫共沉淀实验表明CITED2与SMAD2存在于同一转录复合物中,共同调控NODAL基因的表达。结论初步确定NODAL信号通路异常与室间隔缺损发生具有相关性,为先天性心脏病的诊断、治疗、预防、预后及风险预测提供理论依据。 孙磊 宋双 李辉 苏冬梅关键词:NODAL 室间隔缺损 SMAD2 小鼠性激素结合球蛋白条件基因打靶载体的构建 被引量:1 2015年 目的构建小鼠性激素结合球蛋白(Shbg)条件基因打靶载体。方法运用ET克隆的方法构建Shbg基因第4-7号外显子两侧插入loxp位点的条件性剔除载体。首先以BAC DNA为模板克隆出Shbg及其上、下游基因并打靶质粒载体(p BR322-MKAB),利用该质粒和BAC克隆,通过同源重组方式,获得套取质粒(p BR322-Shbg-Re);再分别以PL452及PL451为模板扩增出含Neo片段,经过再一轮的Red/ET重组成功实现条件性基因敲除打靶载体(p BR322-MK-SHBG-cko)的构建。结果经多个限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,构建的p BR322-MK-AB、p BR322-Shbg-Re、SHBG-Ln重组质粒和Shbg条件基因打靶载体(p BR322-MK-SHBG-cko)结构正确,与设计相符。结论成功构建了小鼠Shbg条件基因打靶载体,为后续Shbg基因条件敲除小鼠模型的构建奠定了基础。 王越 金镇 孙磊 郑晋华关键词:性激素结合球蛋白