钟瑾
- 作品数：21 被引量：102H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 肉制品发酵剂木糖葡萄球菌I2的研究被引量：7
- 2006年
- 木糖葡萄球菌I 2是通过筛选得到的肉制品优良发酵剂。文中研究了木糖葡萄球菌I 2的发酵条件、5L自控发酵罐的放大试验和不同保护剂对木糖葡萄球菌I 2存活的影响。结果表明,采用2#发酵培养基,培养温度30℃,用2mol/L的NaOH作为中和剂,控制发酵液的pH为7.3,发酵周期16h,发酵液中活菌数最高可达8.7×1010CFU/mL。冷干保护剂以海藻糖最好,冷干后活菌数达1011CFU/g。
- 贾士芳陈美玲钟瑾刘斌东秀珠还连栋李红伟张春晖
- 关键词：肉制品发酵剂木糖葡萄球菌发酵条件
- 羊毛硫细菌素bovicin HJ50修饰酶BovM双功能域单独催化活性鉴定被引量：2
- 2015年
- 【目的】体外重建羊毛硫细菌素bovicin HJ50修饰酶Bov M双功能域(脱水酶与环化酶功能域)各自的催化活性,为深入了解Bov M催化机制奠定基础。【方法】在大肠杆菌(Escherichia coli)中分别异源表达纯化Bov M含脱水功能域的N端与含环化功能域的C端重组蛋白,构建体外反应体系,分别对其前肽底物Bov A进行修饰,通过产物抑菌活性及MALDI-TOF MS分子量检测来鉴定两者的修饰活性;并通过体内体外两种方法检测双功能域蛋白之间的协同作用。【结果】Bov M的N端脱水功能域及C端环化功能域分别具有脱水与环化活性,但双功能域重组蛋白之间没有协同作用。【结论】Bov M双功能域均可独立行使各自的催化功能,但Bov M的完整结构对其正常的催化活性非常重要。
- 马宏初高涌赵方圆钟瑾
- 关键词：双功能酶脱水环化
- 肠道与微生物相互作用体外研究模型进展与应用被引量：3
- 2013年
- 肠道微生物对机体的营养代谢、能量代谢和免疫功能等具有十分重要的作用,而微生物黏附、定植以及同宿主肠上皮的相互作用在这些过程中至关重要,因而深入理解微生物和肠道之间的相互作用是阐明微生物如何参与机体营养、代谢和免疫过程的关键。本文综述了研究微生物与肠道相互作用的主要体外模型,以及应用这些模型取得的研究进展。
- 刘刚任文凯熊霞李铁军钟瑾印遇龙
- 关键词：肠道微生物细胞培养
- 肉制品发酵剂木糖葡萄球菌J23发酵条件的研究被引量：6
- 2006年
- 高质量的发酵肉专用发酵剂是工业化生产发酵肉的关键。本研究从金华火腿中分离鉴定了可作为发酵剂的木糖葡萄球菌J23,并对其发酵条件(包括5L罐放大试验)、冷冻干燥条件、浓缩培养、菌株安全性等方面进行了研究。结果说明:在最适培养温度30℃下,2#简单培养基为最佳培养基,用2 mol/l的NaOH作为中和剂控制发酵pH7.3,发酵周期为20h,木糖葡萄球菌J23活菌数可达到3.4×109CFU/mL。冷干保护剂以蔗糖效果最好,冷干后活菌数能达到4×1010CFU/g。发酵剂菌株经动物毒性试验表明属无毒级微生物。
- 贾士芳陈美玲钟瑾东秀珠刘斌李红伟张春晖还连栋
- 关键词：肉制品发酵剂
- 具有抗菌效应的聚羟基脂肪酸酯生物塑料的制备与功能表征被引量：3
- 2016年
- 聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHAs)作为一类新型的生物高分子材料,因其多样的材料性质与高度的生物可降解性日益受到关注。使用乳酸链球菌素(Nisin),一种被公认为安全的天然食品防腐剂,制备了具有高效、持久抗菌效应的PHA塑料。首先采用溶剂浇铸的方法将Nisin整合到正3-羟基丁酸-3羟基己酸共聚酯(PHBHHx),一种具备高度生物相容性的PHA中,从而获得了具有抗菌效应的PHBHHx薄膜。激光共聚焦显微镜观察表明Nisin在PHBHHx中呈颗粒状均匀分布。随后以条件致病菌藤黄微球菌Micrococcus luteus为测试菌株,通过琼脂扩散法,测定PHBHHx薄膜抗菌效应对Nisin含量的依赖关系;在液体培养条件下测量PHBHHx薄膜的Nisin释放效果与抗菌效应。结果表明Nisin可从PHBHHx薄膜顺利释放且Nisin的含量高于25μg/g时即表现出显著的抑菌效果且可长时间维持。该研究为工业化生产具有抗菌效应的PHA奠定了重要的技术基础,拓展了PHA在医学和食品领域的应用潜力。
- 娄秋莉马一鸣车雪梅钟瑾孙小霞张浩千
- 关键词：聚羟基脂肪酸酯乳酸链球菌素藤黄微球菌
- 乳链菌肽——从实验室走进百姓生活被引量：2
- 2014年
- 乳链菌肽(Nisin)是乳酸菌产生的一种含特殊氨基酸的羊毛硫细菌素,因其高抑菌活性及安全性,可用作天然食品防腐剂。20世纪80年代末,中国科学院微生物研究所率先在国内开展了对乳链菌肽的研究和开发工作。从菌种选育、发酵及后提取工艺优化、到技术转移转化,经过几代科学家的不断创新与自主研发,产学研成功结合,乳链菌肽最终从实验室走向了工业化生产,走向了市场,走进了寻常百姓家,为"微生物,高科技,大产业"做了很好的诠释。
- 钟瑾
- 关键词：乳链菌肽乳酸菌食品防腐剂
- 鸡β-防御素7在大肠杆菌中的表达及活性分析被引量：3
- 2012年
- 【目的】根据鸡β-防御素7(Gal-7)的成熟肽基因序列合成基因,构建表达Gal-7的大肠杆菌工程菌,研究重组鸡防御素Gal-7成熟肽的体外生物活性。【方法】将合成的gal-7基因克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-6p-1中,得到重组质粒pGEX-6p-gal7,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达得到含GST标签的融合蛋白GST-Gal7;之后用Prescission蛋白酶将GST标签切除,并对成熟肽进行质谱分析;再利用琼脂打孔扩散法检测Gal-7成熟肽的体外抑菌活性,用2倍稀释法测定对指示菌的最低抑菌浓度。【结果】成功构建Gal-7大肠杆菌异源表达工程菌,表达纯化的重组Gal-7成熟肽质谱鉴定分子量为5 516 Da,其对黄色微球菌(NCIB 8166)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、粪肠球菌(ATCC 29212)、大肠杆菌(CMCC 44102)均有抑菌活性,最低抑菌浓度分别为16.875、67.5、67.5、135 mg/L。【结论】获得表达鸡Gal-7成熟肽的大肠杆菌工程菌,并且切除GST标签的Gal-7成熟肽具有生物活性。
- 李民欢祁克宗涂健钟瑾
- 关键词：Β-防御素异源表达抗菌活性
- 乳链菌肽(nisin)抗性机制的研究进展被引量：21
- 2010年
- 乳链菌肽（nisin）是某些乳酸乳球菌产生的一种羊毛硫细菌素。其对包括食品腐败菌和致病菌在内的许多革兰氏阳性菌具有强烈的抑制作用,是目前世界上唯一被允许用作食品添加剂的细菌素。nisin的广泛使用虽未引发大范围的抗性,但在自然界或实验室的选择压力下,某些非nisin产生菌也获得了抵御nisin攻击的抗性机制。nisin抗性机制通常涉及两种方式,即非特异性的生理适应机制和特异性蛋白酶介导的主动防御机制。本文综述了近年来nisin抗性机制的研究进展。
- 初晓东林宇恒孙志增还连栋钟瑾
- 关键词：乳链菌肽抗性
- 基于冰核蛋白的乳酸菌表面展示系统的构建被引量：4
- 2013年
- 【目的】验证来源于丁香假单胞菌的冰核蛋白在乳酸乳球菌表面展示外源蛋白的可能性。【方法】以绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,GFP)基因gfp为报告基因,以冰核蛋白基因的N末端和NC端作为展示单元,构建乳酸菌表面展示载体pHZ101和pHZ102,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)MG1363。【结果】荧光显微镜观察显示重组大肠杆菌和乳酸乳球菌均能检测到绿色荧光。Western blot结果表明GFP蛋白在重组大肠杆菌和乳酸乳球菌中均得到表达,并且INPN-GFP蛋白多数滞留于乳酸乳球菌细胞质内,而INPNC-GFP蛋白则大部分定位于乳酸乳球菌的细胞膜上。【结论】以上结果表明丁香假单胞菌的冰核蛋白能引导外源蛋白定位于乳酸乳球菌的细胞膜上,为乳酸菌表面展示系统的构建提供了新的方向。
- 张秋香侯慧丽芦颖陈卫钟瑾
- 关键词：乳酸菌绿色荧光蛋白
- 猪链球菌口服疫苗的制备及小鼠血清免疫效果的评价被引量：5
- 2013年
- 为构建猪链球菌(Streptococcus suis)新型疫苗,给猪链球菌病的防治提供新思路,首先在大肠杆菌中表达猪链球菌毒力因子EF和MRP,以His-tag柱纯化重组蛋白,并制备EF和MRP鼠源多克隆抗体。随后将ef和mrp基因置于组成型启动子P59和信号肽Usp45下,克隆到乳酸菌表达载体pMG36e上,电击转化到干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)ATCC27092中进行表达。Western blot检测显示EF和MRP蛋白均能在乳酸菌中成功表达,且EF蛋白的表达量随着重组菌生长时间的增长而增大,而MRP蛋白的表达量在重组菌生长到OD600为0.8时达到最高,随后慢慢下降。用含有表达EF和MRP蛋白的重组干酪乳杆菌喂饲C57BL/6J小鼠,发现重组菌可在小鼠体内存活2d左右,并可有效刺激小鼠产生EF和MRP特异性抗体,为研制乳酸菌口服疫苗防治猪链球菌病的可行性进行了有益的探索。
- 张秋香侯慧丽芦颖陈卫钟瑾
- 关键词：猪链球菌干酪乳杆菌乳酸菌疫苗
