方华 作品数:6 被引量:26 H指数:3 供职机构: 武汉理工大学光纤传感技术研究中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 更多>>
缓冲体系和金属离子对漆酶催化活性的影响 被引量:9 2009年 探讨了3种不同的缓冲体系和6种常见的金属离子对漆酶催化活性的影响。结果表明:不同的缓冲体系对漆酶催化活性的影响较大。在pH为2.0的磷酸氢二钾-柠檬酸缓冲体系(0.1 mol/L)中漆酶的催化活性最大。金属离子对漆酶催化活性的影响与金属离子的种类和浓度有关,在浓度低于0.1 mmol/L时,Pb2+、Ag+、Hg2+对漆酶的催化活性起激活作用,高于0.1 mmol/L时起抑制作用。在浓度低于20 mmol/L时,Mg2+、Zn2+、Cu2+对漆酶的催化活性起激活作用,高于20 mmol/L时起抑制作用。 方华 黄俊 陈曌 丁莉芸关键词:漆酶 金属离子 杂色云芝菌漆酶分离纯化及部分酶学性质研究 被引量:1 2009年 对杂色云芝菌产生的漆酶粗酶液通过超滤浓缩、DEAE-Sephrose Fast Flow层析和Sephadex G-100离子交换层析进行纯化。利用SDS-PAGE电泳证明该酶的分子量大约为64.4 kD。漆酶催化ABTS反应的最适温度为55℃,最适pH值为2.0,此酶催化氧化ABTS的Km值为7.78μM。 陈曌 黄俊 方华关键词:漆酶 纯化 酶学性质 磁性壳聚糖微球固定化漆酶催化肾上腺素 被引量:3 2006年 用交联法制备磁性壳聚糖微球,对微球的形貌和结构进行表征和分析,结果表明:微球呈规则的球形,分散比较均匀,粒径在3μm左右。磁性粒子矫顽力为210.6 A/m,接近超顺磁性。以戊二醛为交联剂,将漆酶固定在此磁性壳聚糖微球表面,分别研究了该固定化漆酶和游离漆酶催化肾上腺素的性质。结果表明:固定化漆酶催化肾上腺素的最适温度为55℃,比游离酶升高了10℃,最佳pH值为5.2,游离酶为5.0。在60℃下保温300 min后,固定化酶的催化活性仍保持为原来的75%以上,而在相同条件下游离酶仅保持为原来的10%。固定化酶连续催化肾上腺素10次以后,催化活性仍保持为原来的85%。 李斌 马奔 方华 王军涛 黄俊关键词:壳聚糖 固定化漆酶 肾上腺素 培养条件对Coriolus Versicolor菌分泌漆酶的影响 被引量:1 2008年 采用云芝菌(coriolus versicolor)摇瓶发酵生产漆酶,对主要的影响因素进行了优化。讨论了碳源、氮源、铜离子浓度、诱导剂、表面活性剂等各种因素对杂色云芝菌分泌漆酶能力的影响,获得了优化的培养基组成:土豆汁20%,葡萄糖20 g/L,蛋白胨4 g/L,CuSO40.5 mmol/L,KH2PO43 g/L,MgSO41.5 g/L,ZnSO450 mg/L,MnSO450 mg/L。结果表明,表面活性剂Tween-80的加入能显著提高漆酶的分泌,最佳诱导剂为ABTS。在最优条件下发酵13 d,漆酶活力可高达92.2 U/mL。 方华 黄俊 陈曌 张德庆 丁莉芸关键词:漆酶 酶活 金属酞菁催化ABTS氧化的研究 被引量:1 2008年 研究了4种金属酞菁MPc(M=MnⅡ,CoⅡ,CuⅡ,NiⅡ)对2,2'-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)的催化作用及反应最适条件。采用分光光度计在420 nm下测定吸光度的变化来衡量其催化能力。催化反应符合一级反应动力学。4种MPc的催化活性随着M的不同而不同,其中MnPc最为显著。在磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中,4种MPc催化ABTS氧化的最佳pH值均为3.0,最适催化温度均为40℃。结果表明:4种模拟酶催化性能良好,MnPc最佳。 汤雁 黄丹婷 方华 陈曌 黄俊关键词:金属酞菁 催化 模拟酶 ABTS 白腐菌分泌漆酶的培养条件研究 被引量:11 2008年 采用液体摇瓶培养方法,探讨了金属离子、pH值、培养温度、碳源、氮源、表面活性剂、诱导剂等各种因素对白腐菌(Pleurotus ostreatus)分泌漆酶能力的影响,采用正交实验对主要的影响因素进行了优化。结果表明,Cu2+、Mn2+的加入能促进白腐菌分泌漆酶,Ag+、Fe2+严重抑制白腐菌分泌漆酶,最佳碳源为葡萄糖、最佳氮源为蛋白胨,表面活性剂Tween-80和诱导剂的加入能显著提高漆酶的分泌。优化的培养条件为:土豆汁20%,葡萄糖20 g.L-1,蛋白胨4 g.L-1,CuSO40.5 mmol.L-1,KH2PO43 g.L-1,MgSO41.5 g.L-1,ZnSO450 mg.L-1,MnSO450 mg.L-1,维生素B12.0 mg.L-1,Tween-80 0.5 g.L-1,ABTS或XYL 1 mmol.L-1,pH值为4,28℃下摇瓶培养9 d,此时,漆酶酶活可达21 300 U.L-1。 方华 黄俊 陈瞾 丁莉芸关键词:白腐菌 漆酶 酶活