黄志伟 作品数:18 被引量:43 H指数:3 供职机构: 山东大学 更多>> 发文基金: 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 山东省医药卫生科技发展计划项目 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
脐血巨核细胞体外扩增及其功能的研究 被引量:1 2007年 目的研究扩增后脐血巨核细胞的生物学特性和功能,为脐血巨核细胞的扩增和临床应用提供依据。方法收集足月妊娠健康新生儿的脐带血,免疫磁珠法分离出其中的 CD_(34)^+细胞。采用血小板生长因子(thrombopoietin,TPO)+干细胞因子(stem cell factor,SCF)+白细胞介素3(interleukin-3,IL-3)+IL-6和 TPO+SCF 两种细胞因子组合,将富集的脐血 CD_(34)^+接种于无血清无基质细胞的悬浮培养体系中,分别在3、7、10、14 d 收集扩增产物。运用流式细胞术检测巨核细胞的表型;血浆块法检测巨核细胞集落(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-MK)的形成;对巨核细胞进行 DNA 含量检测以评价其成熟程度;血小板体外活化实验及 SCID 小鼠体内移植实验评价扩增后巨核细胞的功能。结果不同细胞因子组合和培养时间扩增后,巨核细胞的数量和生物学特性不同。随着培养时间的延长,巨核细胞(CD_(41)^+)的数量逐渐增加,但培养至14 d 时增势减缓。因子组合TPO+SCF+IL-3+IL-6各时间段的扩增能力(分别扩增5.2、40.7、121.2、149.7倍)均比因子组合TPO+SCF(分别扩增3.8、27.4、85.9、106.5倍)强,但因子组合 TPO+SCF 的扩增能力仍能满足临床的需要。巨核祖细胞(CD_(34)^+CD_(41)^+)的数量在第7天时最多(分别增加43.4和36.2倍),这也被 CFU-Mk 所证实。DNA 含量检测发现,随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加。体外血小板活化实验证实,扩增的巨核细胞在体外可产生血小板,有正常巨核细胞功能。移植后两组小鼠的骨髓中均检测到人 CD_(45)^+和 CD_(41)^+细胞。小鼠外周血中人血小板在移植后3 d 就可测到,5 d 就可达到高水平(分别为20.7%和17.9%),维持20 d 以后才逐渐下降。结论通过对扩增后巨核细胞的生物学特性的研究,有助于寻找有效、简便、易于植入受者体内的扩增方法。体外扩增的脐血巨核细胞可植入骨髓并产生功能正常的血小� 鞠秀丽 时庆 黄志伟 侯怀水 孙念政 赵燕 沈柏均关键词:胎血 巨核细胞 细胞因子类 诱导大鼠胎血间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究 <正>目的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一群具有向成骨细胞、成软骨细胞、脂肪纽胞、骨髓基质、神经细胞等分化潜能的多能干细胞,最早从骨髓中分离获得。本实验主要研究大鼠胎血间充质干细... 黄志伟 鞠秀丽 候怀水 时庆文献传递 体外扩增脐血巨核细胞生物学特性的研究 2006年 目的:研究脐血巨核细胞的体外扩增及扩增后脐血巨核细胞的生物学特性和功能,为脐血巨核细胞的扩增和临床应用提供依据。方法:收集16份足月妊娠健康新生儿的脐带血,免疫磁珠法分离出其中的CD34+细胞。采用细胞因子组合(1)(TPO加SCF加IL-3加IL-6)、细胞因子组合(2)(TPO加SCF)2种细胞因子组合.将富集的脐血CD34+接种于无血清无基质细胞的悬浮培养体系中,分别在3、7、10、14 d收集扩增产物。运用流式细胞术检测巨核细胞的表型和黏附分子的表达;血浆块法检测巨核细胞集落(CFU-MK)的形成;对巨核细胞进行DNA含量检测以评价巨核细胞的成熟程度。结果:不同细胞因子组合和培养时间扩增后,巨核细胞的数量和生物学特性不同。随着培养时间的延长,巨核细胞(CD41+)的数量逐渐增加,但培养至14 d时增势减缓。因子组合(1)各时间段的扩增能力(分别扩增5.2、40.7、121.2、149.7倍)均比因子组合(2)(分别扩增3.8、27.4、85.9、106.5倍)强(P<0.05),但因子组合(2)的扩增能力仍能满足临床的需要。巨核祖细胞(CD34+/CD41+)的数量在7 d时最多,这也被CFU-MK所证实。DNA含量检测发现.随着培养天数的增加,多倍体细胞所占的百分比增加。扩增后巨核细胞黏附分子CD49d和CD11a的表达维持在高水平,而CD54降低(P<0.05)。结论:通过对扩增后巨核细胞的生物学特性研究,有助于寻找有效、简便、易于植入受者体内的扩增方法。 鞠秀丽 时庆 黄志伟 侯怀水 赵燕 沈柏均关键词:巨核细胞 脐血 扩增 细胞因子 间充质干细胞的多向分化及其应用研究新进展 被引量:1 2006年 间充质干细胞是存在于骨髓、脐血、胎盘、外周血、肌肉、血管等具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞群体,在体外不同诱导条件下或体内可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等中胚层组织;也可跨胚层分化为神经细胞、肝细胞、胰岛细胞等。间充质干细胞具有自我增殖、多向分化等优点,作为种子细胞在组织修复、细胞工程、免疫治疗等临床应用研究中已逐渐深入,并已显示出广阔的应用前景。 黄志伟 鞠秀丽关键词:骨髓祖代细胞 胎血间充质干细胞移植对脑缺血大鼠治疗作用研究 目的:间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是不同于造血基质细胞的干细胞群,具有多分化潜能,是骨髓基质、骨、软骨、肌肉、腱、脂肪和结缔组织细胞的前体细胞。已有报道,MSCs存在于骨髓、外周... 黄志伟关键词:胎血 间充质干细胞 脑缺血 文献传递 脐血间充质干细胞体外诱导分化潜能的研究 被引量:9 2005年 鞠秀丽 黄志伟 时庆 侯怀水 段春红关键词:分化潜能 MSCS 神经元样细胞 中胚层 分化能力 大鼠胎血间充质干细胞的体外扩增及诱导分化为神经元样细胞的研究 被引量:1 2005年 目的:研究大鼠胎血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分离、扩增及向神经元样细胞分化的可能性,为进一步的动物实验研究打下基础。方法:无菌条件下采集15只孕20 d大鼠的胎血,Ficoll-hypague分离液分离出单个核细胞(mononuclear cells, MNCs)后,置于含10%胎牛血清的DMEM/LG培养传代。细胞化学染色法检测MSCs的细胞化学特征,流式细胞仪检测其免疫表型。取扩增第5代的MSCs向神经元样细胞定向诱导,免疫细胞化学法鉴定其特异性标志。结果:大鼠胎血MSCs可大量扩增,细胞化学染色示其α-丁酸萘酚酯酶(NBE)阳性,碱性磷酸酶(ALP)阴性,流式细胞仪检测显示其表达CD44、CD54,不表达CD11b、CD45。诱导后MSCs形态学观察类似于神经元,免疫细胞化学检测发现其巢蛋白(Nestin)和特异性烯醇化酶(NSE)阳性,胶原纤维酸性蛋白(GFAP)阴性。结论:大鼠胎血能够分离、扩增培养出MSCs,在适当条件下可向神经元样细胞定向诱导分化,大鼠胎血可作为MSCs的来源进一步做动物实验。 黄志伟 鞠秀丽 侯怀水 时庆关键词:胎血 间充质干细胞 神经元样细胞 胎血间充质干细胞移植对脑卒中大鼠的治疗作用 2006年 间充质干细胞(MSCs)是可从人骨髓、外周血、肌肉、胎肝、脐带血中分离获得的非造血干细胞,能分化成脂肪细胞、成骨细胞、神经元和肝细胞等多胚层组织细胞。本研究试图经尾静脉注射胎血MSCs给大脑中动脉栓塞模型(MCAO)大鼠,探讨其在脑内存活、迁徙、分化情况及其对神经功能改善的可能作用。报告如下; 黄志伟 鞠秀丽 魏欣冰 侯怀水 时庆 李栋关键词:间充质干细胞移植 胎血 脑卒中 神经功能改善 造血干细胞 大鼠胎血与骨髓非造血成体干细胞体外分化能力的比较 被引量:1 2006年 为了比较大鼠胎血和骨髓中非造血成体干细胞(non-hematopoieticadultstemcells,NASC)体外培养过程中的生长特性及体外诱导两者向神经元样细胞分化的异同,在无菌条件下采集孕大鼠的胎血和成年大鼠的骨髓,用Ficoll-hypague分离液分离出单个核细胞(MNC)后,种植于含10%胎牛血清的DMEM/LG培养液内。收获的NASC传代培养,用流式细胞仪检测细胞的免疫表型。β-巯基乙醇(β-ME)、二甲亚砜(DMSO)和叔丁基对羟基茴香醚(BHA)诱导NASC向神经元分化,用免疫细胞化学染色检测其特异性标志巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果发现传代培养后的两种NASC的形态相似,皆呈均一的梭形;流式细胞仪检测结果示两种NASC的免疫表型无明显差异,表达CD44、CD54,不表达CD11b、CD45;定向诱导的两种NASC具典型神经元形态,免疫细胞化学染色显示nestin和NSE为阳性,但GFAP为阴性。结论大鼠胎血和骨髓非造血成体干细胞的细胞形态、生物学特性无明显差别;两者都可被诱导分化为神经元样细胞;胎血应是NASC的又一来源。 鞠秀丽 黄志伟 侯怀水 时庆 段春红 沈柏均关键词:成体干细胞 胎血 骨髓 神经元样细胞 儿童急性淋巴细胞白血病诱导期合并中枢神经系统感染3例并文献复习 2024年 1 病例资料病例1:女,3岁8个月,因“反复发热半月,发现面黄1周”于2023年5月入院。入院前查血常规示三系异常,入院后根据MICM分型诊断急性淋巴细胞白血病(ALL):骨髓形态示ALL;免疫分型示Pre B-ALL;染色体核型59,XX,+X,+X,+4,+5,+6,+8,+10,+10,+13,+17,+18,+21,+22^([2]);融合基因阴性。初评入低危组,按照CCCG-ALL-2020方案予诱导缓解化疗。 杜立安 杨晓梅 郭庆伟 黄志伟 王亚屏 李府关键词:中枢神经系统感染 儿童急性淋巴细胞白血病 面黄 病例资料 MICM分型 诱导期