周玉
- 作品数:6 被引量:14H指数:3
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- siRNA介导的IBP表达抑制对T细胞凋亡的影响被引量:6
- 2007年
- 目的研究IBP表达抑制后对T细胞凋亡产生的影响。方法构建IBP siRNA稳定表达及阴性对照载体,脂质体法转染Jurkat T细胞,G418筛选稳定转染细胞株,用anti-CD3和CD28 mAb刺激介导的TCR信号方式作用于稳定转染细胞后,以3H-TdR掺入实验检测细胞增殖,Annexin-v/PI双参数法经流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TCR信号刺激下,阴性对照组细胞的3H-TdR掺入量在24 h时下降为未刺激对照组的67%,随时间延长其下降更显著,且24 h发生明显凋亡,凋亡率为21.96%;IBP siRNA表达载体转染细胞在不同时相点的增殖均不受影响,24 h凋亡率仅为2.12%,比阴性对照组细胞显著降低。结论IBP缺失能使TCR信号刺激下的细胞激活后凋亡受到抑制,提示IBP可能参与T细胞免疫自稳状态的调节。
- 周玉李鹏李淑慧高利宏陈梅红杨明珍张阳胡川闽
- 关键词:SIRNA稳定转染细胞凋亡
- 烟草节杆菌02181肌酸酶的基因克隆
- 2011年
- 目的在已知烟草节杆菌02181肌酸酶基因部分序列的基础上,从烟草节杆菌02181基因组DNA中克隆得到肌酸酶全基因。方法根据已得到的肌酸酶部分序列,利用基因组步移技术,分另q克隆得到肌酸酶基因已知部分序列的上、下游序列,再将3段序列拼接,得到肌酸酶全基因,并在NCBI上检索证实。结果得到的烟草节杆菌02181肌酸酶基因的全长序列,在NCBI上检索后证实为一新基因,该基因全长1254bp(舍终止密码子TAA),为一完整的开放读码框架(ORF),编码417个氨基酸,理论分子量为46377Da,并与多种不同来源的肌酸酶有着较高的同源性。其中,与Arthrobactersp.FB24来源的肌酸酶氨基酸序列的一致性达到了80%(332/417),同源性则达到了87%(365/417)。结论成功地克隆了烟草节杆菌02181肌酸酶基因,为今后的基因表达奠定了基础,也为肌酐测定试剂的国产化迈出了坚实的一步。
- 智强胡川闵易维京周玉侯小平
- 关键词:肌酸酶基因克隆基因组步移
- 一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白多克隆抗体制备被引量:4
- 2008年
- 目的获得一个新的高保守自身免疫反应相关分子IRF-4结合蛋白(IRF-4-binding protein,IBP)的高效价特异性多克隆抗体。方法通过生物信息学分析选择IBP特异片段(1228~1893bp),目的片段cDNA插入pET32a和pGEX-KG原核表达载体,分别转化BL21感受态细菌,IPTG诱导表达后组合应用阴离子交换层析、His、GST亲和层析技术获得免疫原(pET32a/IBP融合蛋白)及检测原(pGEX-KG/IBP融合蛋白)。HPLC鉴定纯度。利用改良快速免疫法获得兔抗IBP多克隆抗血清,并经蛋白A柱纯化,非特异性抗体吸收。间接ELISA检测抗体滴度、Western blot和免疫组化实验检测抗体特异性。结果表达并纯化的pET32a/IBP融合蛋白纯度达92%,pGEX-KG/IBP融合蛋白纯度达87%。IBP多克隆抗体滴度达1:51200,能特异地和内源性IBP结合。结论成功表达并纯化了IBP融合蛋白,制备了高滴度、高特异性的抗IBP多克隆抗体。
- 张竹君周玉李鹏易维京杨明珍李淑慧胡川闽
- 关键词:IRF-4结合蛋白蛋白纯化多克隆抗体
- IRF-4结合蛋白(IBP)对T细胞凋亡的影响及其作用机制的初步研究
- IRF-4结合蛋白IBP是新近发现与免疫突触形成、T淋巴细胞激活及Th1/Th2极化关系密切的一个新分子。通过对IBP缺失小鼠的观察,发现动物出现SLE样自身免疫反应,特征为血清IgG水平明显升高、自身抗体产生、效应T细...
- 周玉
- 关键词:IRF-4结合蛋白细胞凋亡自身免疫病T细胞凋亡
- 文献传递
- 利用简并PCR克隆烟草节杆菌02181肌酸酶基因被引量:4
- 2007年
- 目的用简并PCR从烟草节杆菌02181中扩增出肌酸酶部分序列,以期获得其全长编码基因。方法从NCBI查询已发表的肌酸酶蛋白质序列,将其递交到Block Maker服务器,利用工具软件CODEHOP设计简并引物,以烟草节杆菌02181基因组DNA为模板做PCR。结果将所得目的片段(414bp)在NCBI上BLASTx,结果表明,所得序列与不同菌种来源的肌酸酶高度同源,其中与节杆菌属肌酸酶基因的同源性最高,一致性达到了71%。结论从烟草节杆菌02181中成功克隆出了肌酸酶基因的部分序列。
- 智强李淑慧高利宏李鹏周玉易维京王源胡川闽
- 关键词:肌酸酶简并PCRMAKERCODEHOP
- IRF-4结合蛋白——一个新的Th2极性分化相关分子被引量:2
- 2006年
- Th细胞的极性分化在免疫反应调控中具有重要作用,Th细胞极化失调所致Th1/Th2失衡与多种疾病的发生相关。对于细胞因子、抗原信号,转录因子等影响Th1/Th2分化倾向的相关调控因素的研究已比较深入,但分化的具体分子机制尚未完全阐明。IRF-4结合蛋白(IBP)是一个新发现的与Th活化及Th2极性分化相关的分子,它的发现为Th极化的分子机制的研究提供了新的线索。本文就IBP的发现及其在Th细胞极化中的作用做一综述。
- 周玉胡川闽
- 关键词:THTH2