纪巍
- 作品数：9 被引量：28H指数：4
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素ApxⅠ对小鼠的致病性及免疫原性研究被引量：1
- 2009年
- 将血清10型胸膜肺炎放线杆菌接种于含0.02%NAD、5%犊牛血清、1mMCaCl2的LB液体培养基中培养12h,离心后的上清液经硫酸铵盐析、葡聚糖凝胶分子筛层析,分离纯化ApxⅠ。将纯化的ApxⅠ进行半数致死量测定,并对小鼠剖检后进行内脏器官病理变化观察。将纯化的ApxⅠ与弗氏佐剂按1：1的比例混合制备亚单位疫苗,免疫小鼠,初免2周后加强免疫1次,二免2周后用血清10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒,测定最佳免疫剂量。根据最佳免疫剂量于30日龄和45日龄免疫小鼠,60日龄时分别用血清1、3、5、7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒。结果该毒素对小鼠的LD50为80.9mg/kg,LD50的95%平均可信限为63.2～103.5mg/kg;ApxⅠ亚单位疫苗的最佳免疫剂量为40μg,对血清1、3、5、7型胸膜肺炎放线杆菌的攻击具有一定的免疫保护效果。
- 马艳芳刁有祥张鑫纪巍孙法良孙宁
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌免疫原性
- 鸭副粘病毒分离鉴定、F基因序列分析及生物学特性研究
- 鸭副粘病毒病/(Duck Paramyxo Virus Disease/)是由鸭副粘病毒/(Duck Paramyxo Virus/)引起的一种病毒性急性传染病。该病以气管环出血,肺脏弥漫性出血,脾脏肿大为主要特征。鸭副...
- 纪巍
- 关键词：病毒鉴定F基因生物学特性
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒变异株(793/B)M基因与2种截短M基因的原核表达及鉴定被引量：5
- 2010年
- 运用生物信息学技术推测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)变异株(793/B)M基因的抗原位点,应用DNAStar软件针对M基因及其抗原表位片段设计3对引物,PCR扩增并成功构建了M基因的pGEX6p-M和2种截短M基因的pGEX6p-M1,pGEX6p-M2原核表达质粒,SDS-PAGE检测分别在50000,32000,29000处有特异性表达条带,表明GST-M,GST-M1,GST-M2重组蛋白获得成功表达;Westernblotting检测显示,GST-M和GST-M1重组蛋白能被鼠抗IBV(793/B)血清识别,而GST-M2重组蛋白不能被识别。GST-M与GST-M1重组蛋白具有良好的抗原性,初步证实M蛋白存在抗原表位,这为进一步研究IBV(793/B)M蛋白的免疫原性和制备基因工程疫苗提供了重要依据。
- 孙宁李宏梅刁有祥孙法良王明亮马艳芳纪巍
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒原核表达
- 鸡传染性支气管炎病毒变异株(793/B)M基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2009年
- 根据GenBank已发表的传染性支气管炎病毒（IBV）全基因组序列设计引物，对793／B型IBV分离毒株TA03M基因进行克隆与序列分析。结果表明，793／B型IBV的M基因由669bp组成，与GenBank已发表的15株IBV的M基因相比较，793／B型IBV的M基因在第4-15位发生了3-12个核苷酸的缺失，对应1-4个氨基酸的缺失，共有30多处点突变。与其他各毒株M基因的核苷酸同源性为84.2％-93.6％，氨基酸同源性为82.1％-96.0％；进化分析显示TA03株与H52和IBN毒株之间的亲缘关系较近。该研究为进一步探讨793／B型IBVM基因（蛋白）在遗传变异和免疫等方面的作用奠定了理论基础。
- 孙宁刁有祥孙法良纪巍马艳芳王明亮
- 关键词：传染性支气管炎病毒M基因
- 猪圆环病毒2型感染性克隆的构建
- 2011年
- 利用PCR方法从临床疑似PMWS症状猪的脏器中扩增出1株猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 767bp),命名为SDZQ-1,对其基因进行克隆测序并与GenBank中收录的21个PCV-2毒株的全基因组序列进行比较,同源性结果为95.0%～99.7%。将2个SDZQ-1的全基因组序列正向串联连接入PUC19载体质粒中,成功构建了PCV-2双拷贝质粒。体外转染PK-15细胞,盲传5代后,用PCR和间接免疫荧光方法检测,结果构建的PCV-2克隆具有感染性。
- 王明亮刁有祥纪巍孔义波高继明
- 关键词：猪圆环病毒感染性克隆同源性转染
- 小鹅瘟病毒山东株的分离鉴定及VP3基因序列分析
- 2009年
- 从山东某患病鹅群中分离到一株病毒。根据小鹅瘟病毒（GPV）VP3基因全序列，设计了一对特异性引物，提取病毒DNA进行PCR反应，成功扩增出372bp的特异条带。将PCR产物纯化后，与pMD18-T载体连接，连接产物转化大肠杆菌感受态细胞TOP10，经Amp和蓝白斑筛选和PCR鉴定后，对阳性克隆进行测序。测序结果表明该小鹅瘟病毒毒株的VP3基因片段与GenBank已公布的GPV相应序列的同源性在94．1％～98．4％之间。
- 靖吉强武世珍李舫刁有祥纪巍
- 关键词：小鹅瘟病毒VP3基因PCR测序
- 鸡肉中氟苯尼考ELISA检测方法的建立及应用被引量：8
- 2009年
- 【目的】制备抗氟苯尼考(FFC)的高亲和力特异性抗体,建立检测氟苯尼考的间接竞争ELISA新方法。【方法】氟苯尼考分别与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)经混合酸酐法偶联,得到免疫抗原和包被抗原,其偶联比分别为14.4和14.7。用免疫原FFC-HS-BSA免疫新西兰大白兔获得了效价较高的特异性抗体。建立并优化了间接竞争ELISA检测方法。【结果】抗血清效价为1:102400。最佳包被抗原浓度为0.5μg·ml-1,最佳抗体工作浓度为1:6400,酶标二抗的工作浓度为1:20000。回归方程Y=-0.1516X+0.788(R2=0.9859),检测范围为0.18～500ng·ml-1,检出限为0.18ng·ml-1,批内和批间平均变异系数分别为4.86%和7.77%。交叉反应试验中,抗血清与FFC结构相似的氯霉素和甲砜霉素交叉反应率分别为0.094%和0.098%,与其它药物交叉反应率均小于0.01%,表明该方法具有很强的特异性。FFC以浓度0.18～500ng·g-1在鸡肉中添加,回收率为84.14%～106.1%,变异系数为2.1%～5.6%。【结论】成功获得了高效价、高特异性的抗FFC抗体,建立了鸡肉中氟苯尼考残留检测的ELISA方法。结果表明,所建立的检测方法具有灵敏、准确、简便、快速的特点。
- 孙法良刁有祥孙宁马艳芳纪巍
- 关键词：氟苯尼考ELISA鸡肉食品安全
- 鼻气管鸟杆菌病的研究现状被引量：4
- 2008年
- 鼻气管鸟杆菌病是近年来新发现的一种感染家禽和野鸟的呼吸道细菌病,主要表现为鸡和火鸡生长迟缓,产蛋率下降、高死亡率、单侧或双侧纤维素性化脓性肺炎、胸膜炎、气囊炎。也常合并、继发新城疫病毒、大肠埃希菌和副鸡嗜血杆菌感染,从而引起急性死亡,危害很大,给养禽业造成严重的经济损失,是一种值得重视的新病。文章对该病的病原、流行病学、症状与病变、诊断方法及预防措施等进行了综述。
- 王明亮刁有祥纪巍张瑞平杜爱庆马艳芳
- 关键词：鼻气管鸟杆菌流行病学预防措施
- 一株经鸭胚传递的鸭副黏病毒的分离鉴定及生物学特性被引量：7
- 2010年
- 从表现疑似副黏病毒症状的1日龄雏鸭和死亡鸭胚中分离到1株病毒,经HA、HI和病毒中和反应鉴定为副黏病毒,命名为SDFCH株。按常规方法测得SDFCH株的生物学毒力指标MDT、ICPI和IVPI分别为56.6 h、1.78和2.59,鸭胚半数致死量LD50为10^-8.5,表明SDFCH株为副黏病毒强毒株。用分离病毒对11日龄鸭胚和7日龄雏鸭攻毒,孵化出的雏鸭和攻毒的雏鸭均出现明显的剖检变化。根据GenBank中NDV F基因序列设计合成了3对引物,通过RT-PCR扩增出了鸭源Ⅰ型禽副黏病毒（APMV-1）SDFCH株的F基因。与已发表副黏病毒F基因相关序列对比结果表明：SDFCH株与鸭、鹅源副黏病毒的同源性较高,核苷酸和氨基酸的同源性均在96.4%-98.0%之间,而与Lasota株同源性较低,核苷酸和氨基酸同源性仅为84.4%和87.9%。表明该毒株相对于传统的Lasota株已经发生了较大的变异。
- 纪巍刁有祥王明亮马艳芳孙宁孙法良吴焕荣
- 关键词：F基因
