徐涛
- 作品数：30 被引量：149H指数：7
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技厅新苗人才计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 祁连圆柏提取物诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡的作用及筛选研究
- 2012年
- 目的探讨祁连圆柏提取物体外对人肝癌细胞Bel-7402体外增殖抑制、凋亡作用机制并进行有效组分筛选研究。方法采用硅胶柱层析法提取祁连圆柏有效抗瘤组分,分光光度法测定含量。用克隆形成实验、台盼蓝拒染法及MTT显色法检测祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖的影响,流式细胞术检测其诱导细胞凋亡的细胞周期阻滞状况及凋亡率,免疫组化观察对Bcl-2与Bax蛋白的表达水平,光镜、电镜观察凋亡细胞的组织形态和超微结构变化。结果祁连圆柏提取物对Bel-7402细胞增殖有明显的抑制作用,其中C液-组分-3细胞的半数抑制浓度为2.47μg/ml。流式细胞检测结果 G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,其中10～50μg/ml的祁连圆柏C液-组分-3在G1期细胞前出现典型"凋亡峰";免疫组化SP法检测实验组细胞BCL-2基因蛋白表达降低,Bax基因蛋白表达增加。光镜与电镜下均见凋亡细胞明显增多。结论祁连圆柏C液-组分-3具有显著的抑制Bel-7402细胞增殖以及诱导该细胞系凋亡的作用,其诱导Bel-7402细胞凋亡的作用与其上调Bax、下调Bcl-2蛋白的表达,激活Bax凋亡基因蛋白及G0/G1期阻滞有关,是其重要的抗肿瘤作用机制。
- 王索安王小琦徐涛仇容沈健陈健刘丹丹张晓文
- 关键词：抗肿瘤细胞凋亡
- 复制缺陷型腺病毒PCA的构建及其对结肠癌细胞生长的影响被引量：1
- 2013年
- 通过同源重组方式,利用Adeasy系统成功构建携带p14ARF基因的复制缺陷型腺病毒,命名为AdpShuttle-CMV-p14ARF(PCA),并研究其对结肠癌细胞株SW480及HT-29的杀伤作用。PCR方法鉴定阳性重组子病毒;MTT法检测PCA对细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡形态学变化;结晶紫染色法定性分析PCA对两种结肠癌细胞的杀伤作用。结果显示:经目的病毒PCA作用,SW480及HT-29出现明显病变和生长抑制现象,并呈现出时间和浓度依赖性;Hoechst染色后观察到细胞内出现凋亡小体,并且数目随药物处理浓度的升高而增多。
- 黄越陈文铎周炜董淼高永许韶威徐涛唐斌
- 关键词：结肠癌MTT
- 10-羟基喜树碱衍生物的合成及其抗肿瘤活性的初步研究被引量：2
- 2013年
- 为提高10-羟基喜树碱在水中溶解性和稳定性,将其与丁二酸酐经酯化合成喜树碱衍生物—10,20(S)-O-二琥珀酰羟基喜树碱,所得衍生物经核磁共振氢谱表征,并用水浴搅拌法测定衍生物溶解度。采用MTT比色法检测衍生物对结肠癌细胞SW480的生长抑制,DNA片段化分析和Hoechst 33342染色检测其对结肠癌细胞株凋亡的影响。结果表明,衍生物在水中的溶解度(25℃)为2.3mg,比10-羟基喜树碱高21.8倍;肿瘤细胞的生长抑制作用呈剂量/时间依赖性,其半数抑制浓度(IC50值)为700nM;而琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状图谱,Hoechst 33342染色表明喜树碱类衍生物可诱导细胞凋亡。
- 陈文铎黄越董淼许韶威周炜唐斌徐涛
- 关键词：10-羟基喜树碱水溶解度凋亡
- 威灵仙茎叶(灵仙苗)中齐墩果酸的含量测定被引量：5
- 2005年
- 目的:建立薄层扫描法测定灵仙苗中齐墩果酸的含量。方法:采用薄层扫描法,扫描波长?S=530nm,?R=680nm。结果:含量测定加样回收率为99.4%,RSD为2.4%。结论:该方法准确、稳定、重现性好。
- 徐涛李承义万德光
- 关键词：薄层扫描齐墩果酸威灵仙茎叶RSD
- 降解组测序技术在植物miRNA研究中的应用被引量：14
- 2013年
- 目前,利用芯片技术和miRNA测序可快速、准确地检测到物种中所含有的miRNA。随着越来越多的miRNA被发现,miRNA靶基因的确定已成为研究miRNA生物学功能的关键。传统的miRNA靶基因的寻找主要依赖生物信息学预测、AGO蛋白免疫共沉淀和荧光素酶法等。随着高通量测序技术的持续革新,出现了一种新的miRNA靶基因的检测方法,即降解组测序(degradome sequencing)法,该方法拥有高通量测序技术、生物信息学分析和RACE验证三者的优势,并已成功应用于拟南芥(Arabidopsis thaliana)、水稻(Oryza sativa)和小立碗藓(Physcomitrella patens)等模式植物miRNA靶基因的检测。基于已发表的相关文献和联川生物降解组测序平台,该文对降解组测序技术应用于植物miRNA靶基因的研究进展及其实验原理进行了综述,同时对运用该技术可进行的更深入研究进行了讨论。
- 董淼黄越陈文铎徐涛郎秋蕾
- 关键词：高通量测序MIRNA靶基因
- 槲皮素-3-氧-酰基酯的合成及其生物活性
- 2018年
- 槲皮素是一种具有多种生物活性的黄酮类化合物。以槲皮素为先导物,选择性地对C环3位羟基进行结构修饰。以廉价的芦丁为原料,经苄基化保护、酸水解得到中间体1(7,3',4'-氧-三苄基槲皮素),中间体1与羧酸发生Steglich酯化反应,再经Pd/C催化加氢脱苄基得到7种槲皮素-3-氧-酰基酯,目标产物结构经红外光谱(IR)、1H核磁共振(NMR)、13C NMR、电喷雾-质谱(ESI-MS)确证。采用邻二氮菲法和DPPH法考查7种目标化合物的抗氧化活性,结果显示,槲皮素3位羟基以2~3个碳原子的羧酸取代能提高其抗氧化活性。采用MTT法初步评价了7种目标化合物对人食管癌细胞(EC109)、人食管鳞癌细胞(EC9706)、人胃癌细胞(MGC-803)和人前列腺癌细胞(PC-3)的抑制作用。结果表明,槲皮素3位羟基以7个碳原子以上羧酸取代能显著提高其对MGC-803细胞的抑制作用。
- 汪雷马琛高海立徐涛
- 关键词：槲皮素抗氧化活性抗肿瘤活性
- 甘肃省半夏种质资源遗传多样性分析被引量：10
- 2007年
- 运用荧光标记引物的扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记技术,对50份甘肃半夏样品进行了DNA指纹图谱构建和遗传差异分析。选出的8对AFLP引物共扩增出517条带,其中396条具有多态性,多态性位点百分率为75．8％,平均每对引物扩增出64．6条带和49．5个多态性条带。系统聚类分析结果表明所有半夏AFLP指纹均不相同,来源地相同的半夏表现出相对密切的亲缘关系,甘肃省西和县的半夏同天水市的半夏遗传差异明显。聚类分析结果获得了Bootstrap校验的支持。甘肃省半夏遗传多样性十分丰富,AFLP分子标记可有效应用于半夏种质资源鉴别和遗传多样性分析。
- 张杰徐涛张冬梅杨永建陈集双
- 关键词：半夏扩增片段长度多态性DNA指纹图谱
- 三叶半夏凝集素C端结构域的可溶表达及其活性研究被引量：2
- 2014年
- 利用pET-32-SUMO表达载体在大肠杆菌中可溶表达三叶半夏凝集素C端结构域(P-D2),并研究其凝血活性、糖结合特异性以及肿瘤抑制活性。实验结果表明,P-D2蛋白的产量为5mg/L。该蛋白具有凝集小鼠红细胞的活性,可以被D-甘露聚糖抑制,但不能被D-乳糖、D-葡萄糖、D-麦芽糖抑制。P-D2蛋白的体外抗肿瘤活性实验表明其对肝癌细胞Bel-7404以及结肠癌细胞SW-620都有良好的抑制作用。凋亡现象观察实验发现P-D2蛋白可以诱导癌细胞Bel-7404的凋亡。这是首次在大肠杆菌表达系统中表达了可溶的半夏凝集素C端结构域,为其他凝集素的可溶表达提供了新的选择。
- 许韶威刘冰颖周炜高永杨支力吕正兵徐涛
- 关键词：凝血活性SUMO抗肿瘤活性
- 祁连圆柏对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用及其有效部位筛选被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨祁连圆柏对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用并进行有效部位的筛选。方法:选用硅胶柱层析法,提取有效的抗瘤组分。采用台盼蓝拒染法及MTT显色法,检测不同浓度祁连圆柏提取物作用不同时间后对HL-60细胞增殖的影响,光镜结合电镜观察凋亡细胞的形态特点,流式细胞术(FCM)检测其诱导细胞凋亡的细胞周期阻滞点,免疫组化SP法对细胞周期蛋白P27及P16的表达水平进行检测。结果:祁连圆柏各提取物对HL-60细胞增殖有明显的抑制作用,C液作用最明显,C液-3组分作用显著。光镜与电镜下均见凋亡细胞明显增多。流式细胞术检测G0/G1期细胞增多,G2/M期细胞减少,细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.07μg/ml。实验组细胞周期蛋白P27及P16表达水平明显升高。结论:祁连圆柏对白血病HL-60增殖有明显的抑制作用,其中醇提乙酸萃取物组分-3作用最为显著,其作用机制与诱导细胞凋亡,改变细胞周期,上调P27、P16蛋白水平有关。
- 王索安徐涛包金风仇容沈健陈健刘丹丹
- 关键词：祁连圆柏药物作用体外研究
- 铁皮石斛悬浮培养条件筛选及生产多糖被引量：2
- 2012年
- 利用野生铁皮石斛茎尖、种子作外植体,比较所形成的愈伤组织性状、长势,筛选野生铁皮石斛茎尖为最佳诱导愈伤组织的外植体;选用水提醇沉法提取铁皮石斛多糖,并采用改良的硫酸苯酚法测定多糖含量。设计正交试验,筛选得到铁皮石斛愈伤组织生长快速且多糖含量高的培养条件,实验结果 MS+1.0 mg/mL萘乙酸+1.0 mg/mL 6-苄基氨基嘌呤+0.5 mg/mL 2,4-二氯苯氧乙酸,19 d为既能使铁皮石斛愈伤组织生长快且多糖含量高的激素配比。
- 金晓锋杨永健朱莲莲吴程雨周子铃周慧霞马旖旎徐涛
- 关键词：铁皮石斛愈伤组织多糖
