郭玉婉
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一种酸性真菌α-淀粉酶的异源表达与重组酶性质被引量：6
- 2013年
- 用PCR方法扩增扣囊复膜孢酵母CICIM Y1037菌株真菌α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入表达载体pPIC9K。重组质粒pPIC9K-SfA转化巴斯德毕赤酵母GS115,筛选获得淀粉酶活力相对最高的重组菌Pichia pastoris GS115/pPIC9K-SfAmy LZ08。SDS-PAGE电泳分析纯化获得的重组酶SfA,结果显示重组酶分子质量为61 kDa左右。SfA最适反应温度为45℃、最适pH为4.5,是一种酸性α-淀粉酶。Ca2+对SfA的热稳定性有促进作用,重组酶在含5 mmol/L Ca2+,pH 4.5的溶液中,55℃保温4 h酶活仍保留80%以上。SfA水解玉米淀粉获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽糖和麦芽三糖为主要产物,分别占水解物的37%和39%。重组酶SfA在麦芽三糖和麦芽寡糖糖浆生产中有一定的应用潜力。
- 沈微林丽珍黄雯雯郭玉婉陈献忠樊游王正祥
- 关键词：巴斯德毕赤酵母异源表达
- 扣囊复膜孢酵母α-淀粉酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达与重组酶性质被引量：5
- 2014年
- 通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的α因子信号肽下游,构建重组表达载体pKLAClSfA。重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799,筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平较高的重组菌。酶活检测和SDS-PAGE电泳检测均显示,重组菌分泌重组酶SfA到发酵液中。酶学性质研究表明:SfA最适温度为45℃,最适pH5.0,在pH4.5~5.5、50℃条件下保持稳定。Ca^(2+)等二价金属离子对SfA酶活有激活作用,EDTA强烈的抑制SfA活性。HPLC分析显示SfA水解糊精获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽三糖是主要产物,占水解产物总量的52%。
- 郭玉婉沈微王一恬樊游陈献忠王正祥
- 关键词：乳酸克鲁维酵母麦芽三糖
