马燕琳 作品数:116 被引量:367 H指数:10 供职机构: 海南医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 海南省自然科学基金 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠主动脉内皮细胞增生与凋亡及一氧化氮合酶表达的影响 被引量:1 2011年 目的了解1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠(apoE^-/-)主动脉内皮细胞(EC)增生、凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法apoE^-/-鼠主动脉EC分离培养,MTT法观察1,25(OH)2D3影响apoE^-/-鼠EC生长,TUNEL检测细胞凋亡,RT—PCR检测Bcl-2、FasmRNA和eNOSmRNA表达。结果细胞对照组与无水乙醇对照组EC增生率差异无统计学意义[(0.162±0.031)粥.(0.158±0.006),P〉0.05],1,25(OH)2D3在10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8mol/L时Ec增生率高于对照组(P〈0.01),但不同浓度1,25(OH)2D3作用组之间差异无统计学意义[分别为(0.189±0.013)、(0.285±0.011)、(0.296±0.026)、(0.284±0.017)、(0.233±0.010),P〉0.05],选定10^-6mol/L1,25(OH)2D3为研究浓度,干预分离培养apoE^-/-鼠主动脉Ec.1,25(OH)2D3 10^-6mol/L组、细胞对照组、无水乙醇对照组凋亡指数分别为(15.14±3.19)、(18.94±4.22)、(19.27±4.58),Bcl-2mRNA分另0为(0.78±0.16)、(0.46±0.21)、(0.42±0.17),FasmRNA分另0为(0.43±0.12)、(0.79±O.21)、(0.81±0.20),eNOSmRNA分别为(0.56±0.16)、(0.39±0.13)、(0.35±0.11)。25(OH)2D3干预组EC凋亡指数、FasmRNA、eNOSmRNA降低,Bel-2mRNA增高(P均〈0.01),细胞对照组与无水乙醇对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。相关分析发现在1,25(OH)2D3干预组,eNOS表达量与凋亡指数、FasmRNA呈负相关(r=-0.676、-0.758),与Bel-2表达呈正相关(r=0.762),差异有统计学意义(P均〈0.01)。结论1,25(OH)2D3刺激apoE^-/-鼠主动脉EC增生、抑制主动脉EC凋亡,影响凋亡相关基因Bel-2、FasmRNA表达,上调eNOSmRNA表达。 向伟 何小解 马燕琳 易著文 曹艳 赵水平 杨进福 马志超 吴明 符生苗 马建林 王洁 郑维 康红关键词:一氧化氮 载脂蛋白E类 选择性单囊胚移植对瘢痕子宫患者辅助生殖治疗后妊娠结局的影响 被引量:3 2019年 目的评价应用选择性单囊胚移植(elective single embryo transfer, eSET)和双囊胚移植(double-embryo transfer,DET)对瘢痕子宫患者辅助生殖治疗(assisted reproductive treatment,ART)后妊娠结局的差异。方法选取2015年1月至2016年10月间于海南医学院第一附属医院收治的110例瘢痕子宫患者作为研究对象。随机数表法分为eSET组(55例)和DET组(55例),比较两组患者治疗后临床妊娠率、足月分娩率、活产率等妊娠结局,以及早产率、死胎率和多胎率等不良妊娠结局间的差异。应用多因素Logistic回归分析探究影响瘢痕子宫患者辅助生殖不良妊娠结局的危险因素。结果 eSET组和DET组的ART治疗方式(χ~2=1.502,P=0.472)、Gn总剂量(t=-1.215,P=0.227)、Gn治疗时间(t=-1.001,P=0.319)和排卵个数(t=1.055,P=0.294)等ART治疗情况间均无统计学差异。eSET组和DET组新鲜囊胚与累计的临床妊娠率(χ~2=0.042,0.146;P=0.838,0.703)、足月分娩率(χ~2=0.000,1.387;P=1.000,0.239)和活产率(χ~2=0.530,1.477;P=0.467,0.229)间均无统计学差异。eSET组和DET组新鲜囊胚与累计的早产率(χ~2=0.042,0.440;P=0.838,0.507)和死胎率(χ~2=0.213,0.176;P=0.644,0.675)均无统计学差异,eSET组的累积多胎率(χ~2=4.407,P=0.036)和不良妊娠结局发生率活产率(χ~2=3.911,P=0.048)均显著低于DET组。Logistic回归分析显示,DET、年龄>35岁、BMI>30 kg/m2是瘢痕子宫患者辅助生殖不良妊娠结局的独立危险因素。结论在瘢痕子宫患者辅助生殖治疗中应用eSET的临床妊娠率、足月分娩率和活产率与DET相似,但能够明显降低多胎妊娠风险;高龄、高BMI是瘢痕子宫患者辅助生殖不良妊娠结局的独立危险因素。 麦扬青 黄炜 马燕琳关键词:瘢痕子宫 辅助生殖技术 体外受精 囊胚移植 血管内皮细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞后心肌移植对促进心肌缺血大鼠心功能恢复的效果评价 被引量:3 2006年 目的:观察血管内皮生长因子基因转染骨髓间充质干细胞后心肌移植对缺血性心脏病心功能的影响,并比较联合治疗与基因治疗、细胞治疗单独使用的疗效差别。方法:实验于2003-07/2004-08在中南大学湘雅二医院心胸外科实验室及中心实验室完成。以Wistar近交系大鼠建立心肌缺血模型。选取模型制备成功48只大鼠随机分为4组:联合组、细胞组、基因组、对照组,每组12只。联合组在心肌梗死模型建立2周后于心肌梗死区移植血管内皮细胞生长因子-骨髓间充质干细胞,细胞组移植等量的骨髓间充质干细胞,基因组注射脂质体-pcDNA3.1-hVEGF165DNA复合物,对照组注射等容积培养液。假手术组12只仅开胸而不缝扎,不作任何注射。4周后以Buxco系统有创在体检测心功能,测量心肌梗死面积,免疫组化检测Brdu、肌钙蛋白T双染评估移植细胞的存活与分化。结果:对照组有2只于移植后第2,3周死亡,最终进入结果分析为联合组12只、细胞组12只、基因组12只和对照组10只,假手术组12只。①移植治疗4周后,联合组心肌梗死面积为(27.8±3.0)%,低于细胞组(37.0±10.1)%(P=0.035)与基因组(37.1±5.2)%(P=0.033)。②Buxco检测心功能显示联合组左心室收缩压、左心室等容收缩期室内压最大上升速率高于细胞组与基因组[左心室收缩压:(104.5±9.1),(93.9±11.9),(93.6±13.9)mmHg,(P=0.026,0.022);左心室等容收缩期室内压最大上升速率:(4971.1±371.3),(4420.6±424.9),(4361.8±617.6)mmHg/s,(P=0.030,0.017)],左心室等容收缩期室内压最大下降速率低于细胞组与基因组[(4210.3±449.5),(3751.3±431.2),(3587.5±763.5)mmHg/s,(P=0.036,0.005)],左心室舒张末压有低于细胞组与基因组[(3.1±3.5),(6.5±4.9),(6.1±5.8)mmHg,(P=0.155,0.202)]的趋势。③Brdu、肌钙蛋白T双染示各治疗组心肌梗死区心肌细胞数量不同程度多于对照组,部分为双染阳性细胞。结论:血管内皮细胞生长因子转染 周文武 胡建国 杨进福 林玲 马燕琳 周新民 唐滔关键词:心肌缺血 基因疗法 育龄期女性体重指数对胚胎发育及助孕结局的影响 2023年 目的:探讨育龄期女性体重指数对胚胎发育及助孕结局的影响,旨在为不同体重指数的患者提供更好的助孕治疗,为临床诊疗提供参考。方法:回顾性收集2015年1月~2021年10月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心首次接受鲜胚移植且通过长方案促排的患者资料,共3783例。按照体重指数(body mass index,BMI)将患者分为:低体重组(BMI<18.5 kg/m^(2))、正常体重组(18.5≤BMI<24 kg/m^(2))、超重组(24≤BMI<28 kg/m^(2))和肥胖组(BMI≥28 kg/m^(2))。比较四组的基本情况、助孕过程、胚胎发育以及助孕结局。结果:分析患者基本情况发现,四组女性年龄无显著差异(P>0.05),但肥胖女性的不孕时间显著延长(P=0.007)。超重及肥胖组的基础内分泌水平低于正常组(P<0.05)。肥胖组基础卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、基础黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、基础雌二醇(estradiol,E2)、基础孕酮(progesterone,P)、抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)均低于正常体重组(P<0.05),肥胖组基础窦卵泡数(antral follicle counting,AFC)减少(P=0.011)。超重组仅表现为E2、P水平降低(P<0.05)。在助孕过程中,肥胖组促性腺激素(gonadotropin,Gn)用量最多,超重组次之,低体重组最少(P<0.001)。肥胖组的Gn天数延长(P<0.001)。超重、肥胖组扳机日LH、E2、P均低于正常体重组(P<0.05)。比较胚胎发育过程得出,肥胖组囊胚在原核消失(time of pronuclei disappearance,tPNf)、四细胞(time of four cells,t4)及囊胚形成(time of full blastocyst,tB)阶段均出现发育延迟(P<0.05)。肥胖组助孕结局较差,表现为临床妊娠率(P=0.044)及活产率(P=0.036)降低。行二分类Logistic回归分析后发现,肥胖是临床妊娠(OR=0.683,95%CI:0.479-0.973,P=0.035)及活产(OR=0.662,95%CI:0.459-0.954,P=0.027)的危险因素。年龄为生化妊娠、临床妊娠和活产的危险因素(P<0.05)。结论:女性肥胖延长不孕时间,引起内分泌紊乱,增加Gn� 王明昆 黄元华 马燕琳关键词:体重指数 辅助生殖技术 体外受精 卵胞浆内单精子注射 30例严重少精症、无精子症患者的遗传学分析 被引量:2 2006年 目的探讨严重少精症和无精子症与遗传因素的关系。方法260例染色体G带分析;116例Y染色体AZF区18个微缺失位点进行多重PCR基因扩增检测分析。结果30例严重少精症和无精子症患者发现遗传异常,其中26例染色体异常,4例AZF基因有微缺失。结论严重少精症和无精子症与遗传密切相关,但严重少精症和无精子症的染色体分析与Y染色体AZF微缺失位点检测无相关性。 陈雪银 李崎 马燕琳 金应霞 麦扬青 黎明红关键词:严重少精症 无精子症 无精子因子 Y染色体微缺失 利用CRISPR/Cas9技术构建定点突变小鼠品系 被引量:6 2015年 CRISPR/Cas9技术是新近发展起来的对细胞和动物模型进行基因编辑的重要方法。本文利用DNA双链断裂(Double-strand breaks,DSBs)引起的同源重组(Homologous recombination,HR)依赖与非依赖的修复机制,建立基于CRISPR/Cas9核酸酶技术构建定点突变小鼠品系的技术体系。针对赖氨酸特异脱甲基化酶2b(Lysine(K)-specific demethylase 2b,Kdm2b)酶活关键位点对应的基因组DNA序列设计单一导向RNA(Single-guide RNA,sg RNA),通过与Cas9 m RNA共显微注射,分别得到Kdm2b基因发生移码突变的基因失活品系及关键位点氨基酸缺失的酶活突变型小鼠品系。此外,利用HR介导的修复机理,将黄素单加氧酶3(Flavin containing monooxygenases3,Fmo3)基因的sg RNA序列及对应的点突变单链寡脱氧核苷(Single strand oligonucleotides,ss ODN)修复模板共注射到小鼠受精卵雄原核。对F0小鼠基因测序分析显示,成功构建了Fmo3基因移码突变的基因敲除和单碱基定点突变的基因敲入小鼠,这些突变能够稳定遗传给子代。本研究利用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组依赖与非依赖两种DNA损伤修复方式,成功构建了特定位点突变的小鼠品系。 白敏 李崎 邵艳姣 黄元华 李大力 马燕琳关键词:基因敲除 基因敲入 同源重组 高脂饮食对载脂蛋白E缺乏鼠维生素D受体表达及一氧化氮合酶活性影响研究 目的 了解高脂饮食对载脂蛋白(apoE)缺乏鼠(apoE-/-)维生素D受体(VDR)表达及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性影响,探讨维生素D在动脉粥样硬化发生发展中的意义及其可能机制.方法 apoE-/-小鼠与作为对... 向伟 符生苗 马建林 王洁 郑维 康红 何小解 马燕琳 易著文 曹艳 赵水平 杨进福 马志超 吴明环孢素A调节自噬对人滋养细胞氧化应激损伤的影响 被引量:1 2020年 目的探讨环孢素A(CsA)调节自噬对人滋养细胞氧化应激损伤的保护作用。方法将细胞分为对照组、氧化应激组、低剂量CsA(2μmol/L)组和高剂量CsA(4μmol/L)组。流式细胞仪检测HTR-8/SVneo滋养细胞凋亡,硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA),化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD),化学荧光法检测活性氧(ROS),Western blot检测蛋白表达。结果对照组、氧化应激组、低剂量CsA组和高剂量CsA组HTR-8/SVneo细胞凋亡率分别为4.24%±0.72%、38.15%±4.63%、27.24%±3.16%、18.45%±2.28%,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。CsA组细胞MDA和ROS显著低于氧化应激组(P<0.01),且高剂量CsA组低于低剂量CsA组(P<0.01);CsA组细胞SOD显著高于氧化应激组(P<0.01),且高剂量CsA组高于低剂量CsA组(P<0.01)。对照组、氧化应激组、低剂量CsA组和高剂量CsA组HTR-8/SVneo细胞自噬蛋白LC3Ⅱ表达的相对灰度值分别为0.23±0.05、0.11±0.02、0.38±0.07、0.75±0.13,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论CsA可以增强滋养细胞自噬,对氧化应激损伤诱发的滋养细胞凋亡起到抑制作用。 徐秋霞 马燕琳关键词:环孢素A 滋养细胞 氧化应激 凋亡 自噬 基于网络药理学和分子对接探讨黄芪治疗早发性卵巢功能不全的机制研究 2024年 目的:基于网络药理学和分子对接方法探讨黄芪对早发性卵巢功能不全治疗作用的分子机制。方法:在中药系统药理学数据库TCMSP中筛选黄芪有效成分及药物作用靶点;在Genecards数据库中筛选早发性卵巢功能不全疾病靶点;运用Venny在线工具筛选两者的交互基因;通过Cytoscape3.7.2软件构建“药物-成分-靶点-疾病”网络关系图;采用String数据库获得蛋白互作(PPI)信息,进一步通过CytoNCA插件构建蛋白质相互作用网络,筛核心靶点蛋白;利用DAVID数据库对交互基因进行GO富集和KEGG通路富集;使用分子对接技术进一步明确其发挥治疗作用的分子;最后,采用血清饥饿法建立POI细胞模型,给予黄芪中的有效化合物槲皮素进行干预,通过Tunel染色、蛋白质印迹实验(western blotting,WB)对网络药理学预测结果进行实验验证。结果:通过TCMSP数据库筛选出黄芪的32个有效化合物及552个基因靶点,从疾病数据库中筛选出730个早发性卵巢功能不全的疾病靶点,两者共62个交集基因,其中黄芪中的主要活性成分包括槲皮素(quercetin)、异鼠李素(isorhamnetin)、山奈酚(kaempferol)、丁子香萜(Mairin)、芒柄花黄素(formononetin)和芒柄花黄素(astragaloside IV),10个POI的潜在核心靶基因为ALB、INS、AKT1、ACTB、TP53、TNF、ESR1、CASP3、STAT3和PTEN;潜在靶点基因主要参与调控JAK2/STAT3、PI3K/Akt信号通路;分子对接验证了黄芪主要活性化合物与核心蛋白STAT3和Akt1存在较强的结合作用;细胞实验结果发现,黄芪中的重要活性化合物槲皮素能促进JAK2/STAT3信号通路关键分子JAK2及STAT3的磷酸化水平,改变卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白表达水平。结论:网络药理学和分子对接分析表明中药黄芪能通过调节对雌二醇的反应、抑制凋亡过程以及调控JAK-STAT和PI3K-Akt信号通路治疗早发性卵巢功能不全,其机制可能与激活JAK2/STAT3信号通路,抑制卵巢颗粒细胞 李锦婧 钟婉 黄元华 马燕琳关键词:网络药理学 分子对接 引物组及试剂盒 本发明提出了一组引物组以及包含该引物组的试剂盒。利用根据本发明实施例的引物组是针对Y染色体的6个STS位点设计的引物组,该引物组可应用于单个多重聚合酶链式反应,即在同一个PCR反应中使用该组引物进行扩增,可同时得到多个P... 李崎 马燕琳 陈宏健 周繇文献传递